Genetiske faktorer for erektil dysfunktionsgrad og respons på tadalafilbehandling hos patienter med diabetes (EDGEN)

Vi vil inkludere i undersøgelsen 90 patienter med diabetes og erektil dysfunktion. Vi vil bruge IIEF-5 spørgeskemaet til at bekræfte diagnosen erektil dysfunktion. Patienter mellem 40 og 65 år, som scorer 21 point eller mindre på IIEF-5-skalaen, vil blive inkluderet i undersøgelsen.

Forskningen vil være klinisk farmakologisk, prospektiv, interventionel og genetisk-associativ. Patienter vil blive udvalgt sekventielt i henhold til deres vilje til at deltage i forskningen under hensyntagen til inklusions- og eksklusionskriterierne. Som følge heraf vil de ikke være genstand for randomisering. Ved den første undersøgelse og efter at have underskrevet den informerede samtykkeerklæring for deltagelse i forskningen, vil der blive taget blod fra patienterne til laboratorie- og molekylærgenetiske tests, de vil modtage lægemidlet til behandling af erektil dysfunktion tadalafil, som de vil modtage i en dosis på 5 mg dagligt i en periode på tre måneder. Efter tre måneder vil patienter udfylde IIEF-5-spørgeskemaet igen.

I begyndelsen af ​​forskningen vil vi forklare forløbet og formålet med forskningen til de involverede personer, de vil udfylde en samtykkeerklæring for deltagelse i forskningen. Ved inklusion udfører vi følgende på alle emner:

• Anamnese og klinisk undersøgelse (herunder vægt, højde og kropsmasseindeks). Graden af ​​erektil dysfunktion vil blive klassificeret ved hjælp af IIEF-5 spørgeskemaet i fire kategorier, nemlig svær (5-7 point), moderat (8-11 point), mild til moderat (12-16 point) og mild form (17-point). 21 point ) af erektil dysfunktion.
• Laboratorieprøver Der vil blive taget perifert veneblod for at bestemme laboratorieparametre: nyrefunktion, hepatogram, lipidogram, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, testosteron (totalt og frit), folinsyre.
• Molekylærgenetiske tests Der tages 3-5 ml perifert veneblod fra eksaminanderne i et reagensglas med EDTA. Centrifugering vil adskille blodplasmaet fra den cellulære del af blodet. Genomisk DNA vil blive isoleret fra den cellulære del af blodet ved hjælp af kommercielle reagenssæt (DNA Mini Kit og Flexigene DNA kit; Qiagen, Hilden, Tyskland). For at bestemme polymorfismer af individuelle nukleotider i generne af syntesevejen, NO-funktionen og folatvejen, vil vi bruge moderne high-throughput metoder baseret på real-time PCR-reaktionen, såsom 5'-exonuklease-testen (TaqMan SNP genotyping assay) Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) og allelspecifikke kompetitive PCR-reaktioner (KASPar-assay; KBiosciences, Herts, UK).

Kandidatgener blev udvalgt baseret på en litteraturgennemgang med fokus på veje relateret til den molekylære patogenese af erektil dysfunktion og veje relateret til metabolisme og virkning af tadalafil. På baggrund af en gennemgang af databaserne (dbSNP, PharmGKB) og litteraturen søgte vi efter genetiske ændringer i de nævnte gener, som er almindelige i den hvide race og påvirker genets ekspression eller funktionen af ​​det skrevne protein. Baseret på dette besluttede vi at inkludere følgende gener og polymorfier i analysen:

• signalvej NO: NOS3: 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• karvægsfaktorer: VEGF: 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947); ACE: rs1800764, rs4343, rs1799752; ACE2: rs2285666, rs1978124
• folatvej: MTHFR: rs1801133 (p.Ala222Val; ca. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala; c.1298 A>C), MS: rs1805087 (p.Asp917Gly; c:217Gly; c:298A>C). rs1801394 (s.Ala66Gly; 66A>G)
• tadalafil metabolisme: CYP3A4*22 og CYP3A5*3
• tadalafil-mål: PDE5A: rs12646525, rs3806808