Genetiske faktorer for erektil dysfunksjonsgrad og respons på tadalafilbehandling hos pasienter med diabetes (EDGEN)

Vi vil inkludere i studien 90 pasienter med diabetes og erektil dysfunksjon. Vi vil bruke IIEF-5 spørreskjema for å bekrefte diagnosen erektil dysfunksjon. Pasienter mellom 40 og 65 år som skårer 21 poeng eller mindre på IIEF-5-skalaen vil bli inkludert i studien.

Forskningen vil være klinisk farmakologisk, prospektiv, intervensjonell og genetisk assosiativ. Pasienter vil bli valgt sekvensielt, i henhold til deres vilje til å delta i forskningen, under hensyntagen til inklusjons- og eksklusjonskriteriene. Som et resultat vil de ikke bli gjenstand for randomisering. Ved den første undersøkelsen og etter å ha signert skjemaet for informert samtykke for deltakelse i forskningen, vil det bli tatt blod fra pasientene for laboratorie- og molekylærgenetiske tester, de vil motta stoffet for behandling av erektil dysfunksjon tadalafil, som de vil motta i en dose på 5 mg daglig i en periode på tre måneder. Etter tre måneder vil pasientene fylle ut IIEF-5 spørreskjemaet igjen.

I begynnelsen av forskningen vil vi forklare forløpet og formålet med forskningen til de involverte, de vil fylle ut et samtykkeskjema for å delta i forskningen. Ved inkludering vil vi utføre følgende på alle fag:

• Anamnese og klinisk undersøkelse (inkludert vekt, høyde og kroppsmasseindeks). Graden av erektil dysfunksjon vil bli klassifisert ved hjelp av IIEF-5-spørreskjemaet i fire kategorier, nemlig alvorlig (5-7 poeng), moderat (8-11 poeng), mild til moderat (12-16 poeng) og mild form (17- 21 poeng) av erektil dysfunksjon.
• Laboratorietester Perifert veneblod vil bli tatt for å bestemme laboratorieparametre: nyrefunksjon, hepatogram, lipidogram, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, testosteron (totalt og gratis), folsyre.
• Molekylærgenetiske tester Det tas 3-5 ml perifert veneblod fra de undersøkte i et reagensglass med EDTA. Sentrifugering vil skille blodplasmaet fra den cellulære delen av blodet. Genomisk DNA vil bli isolert fra den cellulære delen av blodet ved hjelp av kommersielle reagenssett (DNA Mini Kit og Flexigene DNA kit; Qiagen, Hilden, Tyskland). For å bestemme polymorfismer av individuelle nukleotider i genene til synteseveien, NO-funksjonen og folatveien, vil vi bruke moderne high-throughput-metoder basert på sanntids PCR-reaksjonen, for eksempel 5'-eksonuklease-testen (TaqMan SNP genotyping assay) ; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) og allelspesifikke kompetitive PCR-reaksjoner (KASPar-analyse; KBiosciences, Herts, UK).

Kandidatgener ble valgt basert på en litteraturgjennomgang, med fokus på veier relatert til den molekylære patogenesen av erektil dysfunksjon og veier relatert til metabolismen og virkningen av tadalafil. Basert på en gjennomgang av databasene (dbSNP, PharmGKB) og litteraturen søkte vi etter genetiske endringer i de nevnte genene som er vanlige i den hvite rasen og påvirker uttrykket av genet eller funksjonen til det skriftlige proteinet. Basert på dette bestemte vi oss for å inkludere følgende gener og polymorfismer i analysen:

• signalvei NO: NOS3: 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• vaskulære veggfaktorer: VEGF: 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947); ACE: rs1800764, rs4343, rs1799752; ACE2: rs2285666, rs1978124
• folatvei: MTHFR: rs1801133 (p.Ala222Val; ca. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala; ca.1298 A>C), MS: rs1805087 (p.Asp917Gly; c:219Gly; c:2). rs1801394 (s.Ala66Gly; 66A>G)
• tadalafil metabolisme: CYP3A4*22 og CYP3A5*3
• tadalafilmål: PDE5A: rs12646525, rs3806808