Genetische Faktoren für den Grad der erektilen Dysfunktion und das Ansprechen auf die Tadalafil-Behandlung bei Patienten mit Diabetes (EDGEN)

Wir werden 90 Patienten mit Diabetes und erektiler Dysfunktion in die Studie einbeziehen. Wir werden den IIEF-5-Fragebogen verwenden, um die Diagnose einer erektilen Dysfunktion zu bestätigen. In die Studie werden Patienten im Alter zwischen 40 und 65 Jahren einbezogen, die auf der IIEF-5-Skala 21 Punkte oder weniger erreichen.

Die Forschung wird klinisch-pharmakologisch, prospektiv, interventionell und genetisch-assoziativ sein. Die Patienten werden nacheinander entsprechend ihrer Bereitschaft zur Teilnahme an der Forschung unter Berücksichtigung der Einschluss- und Ausschlusskriterien ausgewählt. Daher unterliegen sie keiner Randomisierung. Bei der ersten Untersuchung und nach Unterzeichnung der Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Forschung wird den Patienten Blut für Labor- und molekulargenetische Untersuchungen entnommen, sie erhalten das Medikament zur Behandlung der erektilen Dysfunktion Tadalafil, das sie in einem erhalten Dosis von 5 mg täglich über einen Zeitraum von drei Monaten. Nach drei Monaten füllen die Patienten den IIEF-5-Fragebogen erneut aus.

Zu Beginn der Forschung erklären wir den beteiligten Personen den Ablauf und Zweck der Forschung, sie füllen eine Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Forschung aus. Nach der Aufnahme werden wir in allen Fächern Folgendes durchführen:

• Anamnese und klinische Untersuchung (einschließlich Gewicht, Größe und Body-Mass-Index). Der Grad der erektilen Dysfunktion wird mithilfe des IIEF-5-Fragebogens in vier Kategorien eingeteilt: schwere (5–7 Punkte), mittelschwere (8–11 Punkte), leichte bis mittelschwere (12–16 Punkte) und leichte Form (17–16 Punkte). 21 Punkte) einer erektilen Dysfunktion.
• Labortests Zur Bestimmung der Laborparameter wird periphervenöses Blut entnommen: Nierenfunktion, Hepatogramm, Lipidogramm, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, Testosteron (gesamt und frei), Folsäure.
• Bei molekulargenetischen Untersuchungen werden den Probanden 3-5 ml periphervenöses Blut in einem Reagenzglas mit EDTA entnommen. Durch Zentrifugation wird das Blutplasma vom zellulären Teil des Blutes getrennt. Genomische DNA wird mithilfe kommerzieller Reagenziensets (DNA Mini Kit und Flexigene DNA Kit; Qiagen, Hilden, Deutschland) aus dem zellulären Teil des Blutes isoliert. Zur Bestimmung von Polymorphismen einzelner Nukleotide in den Genen des Synthesewegs, der NO-Funktion und des Folatwegs werden wir moderne Hochdurchsatzmethoden auf Basis der Echtzeit-PCR-Reaktion einsetzen, wie zum Beispiel den 5‘-Exonuklease-Test (TaqMan SNP Genotyping Assay). ; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) und allelspezifische kompetitive PCR-Reaktionen (KASPar-Assay; KBiosciences, Herts, UK).

Kandidatengene wurden auf der Grundlage einer Literaturrecherche ausgewählt, wobei der Schwerpunkt auf Signalwegen im Zusammenhang mit der molekularen Pathogenese der erektilen Dysfunktion sowie auf Signalwegen im Zusammenhang mit dem Metabolismus und der Wirkung von Tadalafil lag. Basierend auf einer Durchsicht der Datenbanken (dbSNP, PharmGKB) und der Literatur suchten wir nach genetischen Veränderungen in den genannten Genen, die bei der weißen Rasse häufig vorkommen und die Expression des Gens oder die Funktion des geschriebenen Proteins beeinflussen. Auf dieser Grundlage haben wir beschlossen, die folgenden Gene und Polymorphismen in die Analyse einzubeziehen:

• Signalweg Nr.: NOS3: 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• Gefäßwandfaktoren: VEGF: 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947); ACE: rs1800764, rs4343, rs1799752; ACE2: rs2285666, rs1978124
• Folatweg: MTHFR: rs1801133 (p.Ala222Val; ca. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala; ca. 1298 A>C), MS: rs1805087 (p.Asp919Gly; ca. 2756A>G), MTRR: rs1801394 (S. Ala66Gly; 66A>G)
• Tadalafil-Metabolismus: CYP3A4*22 und CYP3A5*3
• Tadalafil-Ziel: PDE5A: rs12646525, rs3806808