Factores genéticos del grado de disfunción eréctil y respuesta al tratamiento con tadalafilo en pacientes con diabetes (EDGEN)

Incluiremos en el estudio 90 pacientes con diabetes y disfunción eréctil. Utilizaremos el cuestionario IIEF-5 para confirmar el diagnóstico de disfunción eréctil. Se incluirán en el estudio pacientes entre 40 y 65 años que obtengan una puntuación de 21 puntos o menos en la escala IIEF-5.

La investigación será clínicamente farmacológica, prospectiva, intervencionista y genético-asociativa. Los pacientes serán seleccionados de forma secuencial, según su voluntad de participar en la investigación, teniendo en cuenta los criterios de inclusión y exclusión. Como resultado, no estarán sujetos a aleatorización. En el primer examen y luego de firmar el consentimiento informado para participar en la investigación, a los pacientes se les extraerá sangre para pruebas de laboratorio y genética molecular, recibirán el medicamento para el tratamiento de la disfunción eréctil tadalafilo, el cual recibirán en un dosis de 5 mg diarios durante un período de tres meses. Después de tres meses, los pacientes volverán a completar el cuestionario IIEF-5.

Al inicio de la investigación, explicaremos el curso y propósito de la investigación a las personas involucradas, ellas completarán un formulario de consentimiento para participar en la investigación. Tras la inclusión, realizaremos lo siguiente en todos los temas:

• Historia y examen clínico (incluido peso, talla e índice de masa corporal). El grado de disfunción eréctil se clasificará mediante el cuestionario IIEF-5 en cuatro categorías, a saber, grave (5-7 puntos), moderada (8-11 puntos), leve a moderada (12-16 puntos) y forma leve (17-11 puntos). 21 puntos ) de disfunción eréctil.
• Pruebas de laboratorio Se tomará sangre venosa periférica para determinar parámetros de laboratorio: función renal, hepatograma, lipidograma, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, testosterona (total y libre), ácido fólico.
• Pruebas de genética molecular Se extraerán de los examinados de 3 a 5 ml de sangre venosa periférica en un tubo de ensayo con EDTA. La centrifugación separará el plasma sanguíneo de la parte celular de la sangre. El ADN genómico se aislará de la parte celular de la sangre utilizando conjuntos de reactivos comerciales (DNA Mini Kit y Flexigene DNA kit; Qiagen, Hilden, Alemania). Para determinar los polimorfismos de nucleótidos individuales en los genes de la vía de síntesis, la función del NO y la vía del folato, utilizaremos métodos modernos de alto rendimiento basados ​​en la reacción de PCR en tiempo real, como la prueba de 5'-exonucleasa (ensayo de genotipado TaqMan SNP). ; Applied Biosystems, Foster City, CA, EE. UU.) y reacciones de PCR competitivas específicas de alelo (ensayo KASPar; KBiosciences, Herts, Reino Unido).

Los genes candidatos se seleccionaron basándose en una revisión de la literatura, centrándose en las vías relacionadas con la patogénesis molecular de la disfunción eréctil y las vías relacionadas con el metabolismo y la acción del tadalafilo. Con base en una revisión de las bases de datos (dbSNP, PharmGKB) y la literatura, buscamos cambios genéticos en los genes mencionados que son comunes en la raza blanca y que afectan la expresión del gen o la función de la proteína escrita. En base a esto, decidimos incluir en el análisis los siguientes genes y polimorfismos:

• vía de señalización NO: NOS3: 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• factores de la pared vascular: VEGF: 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947); AS: rs1800764, rs4343, rs1799752; ACE2: rs2285666, rs1978124
• vía del folato: MTHFR: rs1801133 (p.Ala222Val; c. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala; c.1298 A>C), MS: rs1805087 (p.Asp919Gly; c.2756A>G), MTRR: rs1801394 (p.Ala66Gly; 66A>G)
• Metabolismo de tadalafilo: CYP3A4*22 y CYP3A5*3
• objetivo de tadalafilo: PDE5A: rs12646525, rs3806808