Facteurs génétiques du degré de dysfonction érectile et réponse au traitement par Tadalafil chez les patients diabétiques (EDGEN)

Nous inclurons dans l'étude 90 patients souffrant de diabète et de dysfonction érectile. Nous utiliserons le questionnaire IIEF-5 pour confirmer le diagnostic de dysfonction érectile. Les patients âgés de 40 à 65 ans qui obtiennent 21 points ou moins sur l'échelle IIEF-5 seront inclus dans l'étude.

La recherche sera cliniquement pharmacologique, prospective, interventionnelle et génétique-associative. Les patients seront sélectionnés séquentiellement, en fonction de leur volonté de participer à la recherche, en tenant compte des critères d'inclusion et d'exclusion. En conséquence, ils ne seront pas soumis à une randomisation. Lors du premier examen et après avoir signé le formulaire de consentement éclairé pour la participation à la recherche, du sang sera prélevé sur les patients pour des tests de laboratoire et de génétique moléculaire, ils recevront le médicament pour le traitement de la dysfonction érectile, le tadalafil, qu'ils recevront dans un dose de 5 mg par jour pendant une période de trois mois. Après trois mois, les patients rempliront à nouveau le questionnaire IIEF-5.

Au début de la recherche, nous expliquerons le déroulement et le but de la recherche aux personnes impliquées, elles rempliront un formulaire de consentement pour participer à la recherche. Lors de l'inclusion, nous effectuerons les tâches suivantes sur tous les sujets :

• Antécédents et examen clinique (y compris poids, taille et indice de masse corporelle). Le degré de dysfonction érectile sera classé à l'aide du questionnaire IIEF-5 en quatre catégories, à savoir sévère (5 à 7 points), modérée (8 à 11 points), légère à modérée (12 à 16 points) et forme légère (17 à 11 points). 21 points ) de dysfonction érectile.
• Tests de laboratoire Du sang veineux périphérique sera prélevé pour déterminer les paramètres de laboratoire : fonction rénale, hépatogramme, lipidogramme, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, testostérone (totale et libre), acide folique.
• Tests génétiques moléculaires 3 à 5 ml de sang veineux périphérique seront prélevés sur les candidats dans un tube à essai avec EDTA. La centrifugation séparera le plasma sanguin de la partie cellulaire du sang. L'ADN génomique sera isolé de la partie cellulaire du sang à l'aide d'ensembles de réactifs commerciaux (DNA Mini Kit et Flexigene DNA kit ; Qiagen, Hilden, Allemagne). Pour déterminer les polymorphismes de nucléotides individuels dans les gènes de la voie de synthèse, de la fonction NO et de la voie des folates, nous utiliserons des méthodes modernes à haut débit basées sur la réaction PCR en temps réel, comme le test 5'-exonucléase (TaqMan SNP génotypage assay ; Applied Biosystems, Foster City, Californie, États-Unis) et réactions PCR compétitives spécifiques à un allèle (test KASPar ; KBiosciences, Herts, Royaume-Uni).

Les gènes candidats ont été sélectionnés sur la base d'une revue de la littérature, en se concentrant sur les voies liées à la pathogenèse moléculaire de la dysfonction érectile et les voies liées au métabolisme et à l'action du tadalafil. Sur la base d'une revue des bases de données (dbSNP, PharmGKB) et de la littérature, nous avons recherché des modifications génétiques dans les gènes mentionnés qui sont courantes chez la race blanche et affectent l'expression du gène ou la fonction de la protéine écrite. Sur cette base, nous avons décidé d'inclure les gènes et polymorphismes suivants dans l'analyse :

• voie de signalisation NO : NOS3 : 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• facteurs de la paroi vasculaire : VEGF : 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947) ; ACE : rs1800764, rs4343, rs1799752 ; ACE2 : rs2285666, rs1978124
• voie folate : MTHFR : rs1801133 (p.Ala222Val ; c. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala ; c.1298 A>C), MS : rs1805087 (p.Asp919Gly ; c.2756A>G), MTRR : rs1801394 (p.Ala66Gly ; 66A>G)
• métabolisme du tadalafil : CYP3A4*22 et CYP3A5*3
• Cible du tadalafil : PDE5A : rs12646525, rs3806808