Erektiohäiriöiden asteen geneettiset tekijät ja vaste tadalafiilihoitoon diabeetikoilla (EDGEN)

Otamme mukaan tutkimukseen 90 potilasta, joilla on diabetes ja erektiohäiriö. Käytämme IIEF-5-kyselylomaketta vahvistaaksemme erektiohäiriön diagnoosin. Tutkimukseen otetaan mukaan 40–65-vuotiaat potilaat, jotka saavat 21 pistettä tai vähemmän IIEF-5-asteikolla.

Tutkimus on kliinisesti farmakologista, prospektiivista, interventiota ja geneettis-assosiatiivista. Potilaat valitaan peräkkäin sen mukaan, haluavatko he osallistua tutkimukseen, huomioiden mukaanotto- ja poissulkemiskriteerit. Tämän seurauksena niitä ei satunnaisteta. Ensimmäisessä tutkimuksessa ja tutkimukseen osallistumista koskevan tietoisen suostumuslomakkeen allekirjoittamisen jälkeen potilailta otetaan verta laboratorio- ja molekyyligeneettisiä kokeita varten, he saavat erektiohäiriön hoitoon tarkoitetun lääkkeen tadalafiilia, jonka he saavat 5 mg vuorokaudessa kolmen kuukauden ajan. Kolmen kuukauden kuluttua potilaat täyttävät IIEF-5-kyselylomakkeen uudelleen.

Selvitämme tutkimuksen alussa osallistujille tutkimuksen kulun ja tarkoituksen, he täyttävät suostumuslomakkeen tutkimukseen osallistumisesta. Osallistumisen jälkeen teemme seuraavat kaikki aiheet:

• Historia ja kliininen tutkimus (mukaan lukien paino, pituus ja painoindeksi). Erektiohäiriön aste luokitellaan IIEF-5-kyselylomakkeella neljään luokkaan, jotka ovat vaikea (5-7 pistettä), kohtalainen (8-11 pistettä), lievä tai kohtalainen (12-16 pistettä) ja lievä muoto (17-pistettä). 21 pistettä) erektiohäiriöstä.
• Laboratoriokokeet Perifeeristä laskimoverta otetaan laboratorioparametrien määrittämiseksi: munuaisten toiminta, hepatogrammi, lipidogrammi, HbA1c (TIR), PSA, TSH, LH, FSH, PRL, SHBG, testosteroni (kokonais- ja vapaa), foolihappo.
• Molekyyligeneettiset testit Tutkittavista otetaan 3-5 ml perifeeristä laskimoverta koeputkeen EDTA:lla. Sentrifugointi erottaa veriplasman veren soluosasta. Genominen DNA eristetään veren soluosasta käyttämällä kaupallisia reagenssisarjoja (DNA Mini Kit ja Flexigene DNA Kit; Qiagen, Hilden, Saksa). Yksittäisten nukleotidien polymorfismien määrittämiseksi synteesireitin, NO-toiminnan ja folaattireitin geeneissä käytämme nykyaikaisia, reaaliaikaiseen PCR-reaktioon perustuvia korkean suorituskyvyn menetelmiä, kuten 5'-eksonukleaasitestiä (TaqMan SNP genotyping assay). Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) ja alleelispesifiset kompetitiiviset PCR-reaktiot (KASPar-määritys; KBiosciences, Herts, UK).

Ehdokasgeenit valittiin kirjallisuuskatsauksen perusteella, jossa keskityttiin erektiohäiriöiden molekyylipatogeneesiin liittyviin reitteihin ja tadalafiilin metaboliaan ja toimintaan liittyviin reitteihin. Tietokantojen (dbSNP, PharmGKB) ja kirjallisuuden tarkastelun perusteella etsimme mainituista geeneistä geneettisiä muutoksia, jotka ovat yleisiä valkoisessa rodussa ja vaikuttavat geenin ilmentymiseen tai kirjoitetun proteiinin toimintaan. Tämän perusteella päätimme sisällyttää analyysiin seuraavat geenit ja polymorfismit:

• signalointireitti NO: NOS3: 894G/T (rs1799983), 786T/C (rs2070744)
• verisuonen seinämän tekijät: VEGF: 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs1570360), 2578A/C (rs699947); ACE: rs1800764, rs4343, rs1799752; ACE2: rs2285666, rs1978124
• folaattireitti: MTHFR: rs1801133 (p.Ala222Val; n. 677 C>T), rs1801131 (p.Glu429Ala; c.1298 A>C), MS: rs1805087 (p.Asp919Gly; c.275MRRTA>G), rs1801394 (p.Ala66Gly; 66A>G)
• tadalafiilin metabolia: CYP3A4*22 ja CYP3A5*3
• Tadalafiilikohde: PDE5A: rs12646525, rs3806808