Tolerance og effektivitet af C14 på HPV-infektion (PREPAP)

1. Rationel:

   Gruppen human papillomavirus (HPV) omfatter 200 kendte vira. Vedvarende højrisiko HPV-infektion kan forårsage livmoderhalskræft og er forbundet med kræft i vulva, vagina, mund/hals, penis og anus. Effektive forebyggende indgreb mod HR-HPV findes i udviklede lande, såsom Gardasil- og Cervarix-vaccinerne. Disse interventioner gennemføres med stor forskel i Afrika syd for Sahara, hvor mange afrikanske kvinder bærer høje cervikale virale belastninger af HR-HPV og præcancerøse og dysplastiske læsioner. Brugen af ​​antimikrobielle molekyler ser ud til at være en måde at forbedre håndteringen af ​​disse kvinder på.

   Monoterpenoid zinktetra-ascorbo-camphorat ("C14") besidder således pleiotrope antimikrobielle egenskaber. Adskillige in vitro eksperimenter har vist C14's viricide aktivitet mod HIV (Shattock, 1997; Barré-Sinoussi, 2008) og HPV (Mboumba Bouassa, 2021). Et fase I/II klinisk forsøg af C14's tolerance-effektivitet på genital onkogen HPV-belastning (HR-HPV) og på præcancerøse cervikale læsioner er nu påtænkt med henblik på at øge udviklingen af ​​C14 gennem et større forsøg.

2. Mål

   2.1. Generel målsætning

   Denne forskning har til formål at bidrage til reduktion af livmoderhalskræft morbimortalitet gennem in vivo evaluering af C14 som et potentielt mikrobicid eller terapeutisk lægemiddel mod onkogen HPV.

   2.2. Specifikke mål:

   • Bestem, om C14 er effektiv til at reducere den genitale virale belastning af HR-HPV og til behandling af lavgradige dysplastiske læsioner i livmoderhalsen;
   • Evaluer tolerabiliteten af ​​C14 blandt frivillige.
3. Metoder

3.1. Studie design

Nærværende undersøgelse er et dobbeltblindt randomiseret placebokontrolleret klinisk forsøg. Det vil omfatte 66 patienter i Polyclinique Citadelle, et sundhedscenter i Bunia, Den Demokratiske Republik Congo. Det anslås at vare 18 uger i betragtning af den endelige dataindsamling til primære resultatmålinger.

3.2. Deltagere

1. Inklusionskriterier:

   Målgruppen er alle seksuelt aktive kvinder, der er mindst 30 år gamle, og som vil give deres informerede samtykke til at deltage i undersøgelsen.

   Årsagen til denne målpopulation er baseret på HPV-infektionens naturlige historie. HPV erhverves ved begyndelsen af ​​seksuel aktivitet, som forekommer omkring 15 til 20 års alderen. Dens udbredelse er meget høj i en yngre alder og er ofte forbigående, fordi de fleste kvinder spontant vil fjerne virussen efter nogle år. Når det fortsætter, kan HPV-infektion i gennemsnit tage 10 år at føre til livmoderhalskræft. Således forventes testning at starte 10 år senere efter seksuel debut i dette tilfælde fra 25 til 30 år og fremefter.

2. Ekskluderingskriterier:

Gravide, ammende og post-partum kvinder vil ikke blive accepteret i undersøgelsen. I tilfælde af mistanke om eller diagnosticeret livmoderhalskræft vil kvinderne blive henvist til et tertiært hospital for korrekt behandling. Andre eksklusionskriterier omfatter: tidligere cervikal kirurgi, sygehistorie med alvorlige sygdomme, indtagelse eller anvendelse af andre antivirale midler, kendt eller formodet allergisk eller negativ reaktion på forsøgsproduktet eller dets komponenter og kvinder, der ikke er i stand til at følge undersøgelsesprotokollen.

3.3. Randomiseringsprocedurer

Deltagerne vil randomisere i forholdet 1:1 gennem blokrandomisering. Kvalificerede deltagere blev tilfældigt tildelt en af ​​to selvtestende grupper, C14-gruppe eller placebo-gruppe, ved hjælp af sekventielt nummererede forseglede randomiseringskonvolutter.

3.4. Procedurer og opfølgning

Inden studiestart vil der blive tilrettelagt grunduddannelse for de læger og sygeplejersker, der er involveret i undersøgelsen. Denne uddannelse vil dække Good Clinical Practice (GCP), prøvetagning ved hjælp af vaginalsløret (V-V-Veil Up) og Thinprep cytobørster, samt procedurer for visuel inspektion efter påføring af eddikesyre (VIA) og kryoterapi.

Den indledende fase af forsøget vil involvere prospektiv rekruttering af mindst 420 kvinder, der opfylder vores kriterier. Der vil blive indhentet formelt informeret samtykke, og der vil blive givet undervisning i vigtigheden af ​​diagnosticering af livmoderhalskræft og forebyggelse med tidlig behandling af mulige præcancerøse livmoderhalslæsioner. Berettigede frivillige vil blive inviteret til at deltage i et lokalsamfundsbaseret screeningprogram for livmoderhalskræft (VIA). Derefter vil primær molekylær screening for HR-HPV blive udført ved hjælp af et medicinsk udstyr til selvprøvetagning af cervicovaginale sekreter (Vaginal Veil Collector V-Veil Up UP2™, VVeil-Up Production SRL, Rumænien). Cervikal vaginalt sekret vil blive deponeret i CytAll transportmedium før PCR-analyse ved hjælp af Singu 20-ekstraktoren (Singuway, Shenzhen, Kina) og QuantGene 9600 thermocycler (Bioer Technology, Hangzhou, Kina). I tilfælde af tilstedeværelse af mindst én HR-HPV (positiv HPV-test med Ct < 33), vil berettigede deltagere ligge i litotomiposition på det gynækologiske bord. Efter at have eksponeret livmoderhalsen med et spekulum indsat i skeden, vil lægen tage en livmoderhalsprøve med Thinprep PreservCyt®-opløsning (Hologic, Marlborough, USA) til cervikal cytologisk analyse. Cervikale læsioner vil blive fortolket i henhold til Bethesda-klassifikationen.

Forsøgsfasen vil bestå af hospitalsadministration med vaginal sprøjte med 5 ml 1% C14, to gange dagligt i 7 dage, med start af den første kur i follikulærfasen af ​​cyklussen, lige efter den sidste menstruation (S1), den anden kur. den følgende måned (S5), den tredje kur 4 uger senere (S9) og den sidste kur 8 uger senere (S13). Gynækologisk opfølgning med HPV molekylær testning og cervikal smear vil blive udført to dage efter hvert behandlingsforløb ved S2, S6, S10, S14 og 2 uger efter sidste behandlingsforløb (S16). Ubeskyttet samleje vil ikke være tilladt under hvert behandlingsforløb og i mindst 72 timer før hver genital podning.

Fase I forsøget vil være en tolerancetest efter det første behandlingsforløb. Alle deltagere vil udfylde WHO's kliniske toleranceskema under en lægeundersøgelse. Fysiske og kolposkopiske undersøgelser vil blive udført, efterfulgt af en analyse af pro-inflammatoriske, systemiske og cervico-vaginale markører og en hæmatologisk, lever- og nyrekontrol.

Fase II-studiet vil være et effektforsøg efter hvert behandlingsforløb (fire forløb), der sammenligner effektiviteten af ​​C14 mellem de to undersøgelsesarme. End-points vil være virologiske (genital HR-HPV-belastning) og cytologiske. Cytologiske kontroller vil blive udført efter 6 måneder og et år fra forsøgets start.

3.5. Statistiske analyser

Data vil blive indsamlet i Excel database ved hjælp af le Kobo collect KoboCollect software, og analyserne vil blive udført med SPSS 20.0 (IBM, Atlanta, USA). Proportioner vil blive sammenlignet ved hjælp af x2 eller Fishers eksakte test (når det kræves). Elevens t-test vil blive brugt til kontinuerte variable. En Mc Nemar-test vil blive brugt til sammenligninger inden for patienten, hvor det er relevant. Ikke-normalt fordelte variabler vil blive transformeret, eller ikke-parametriske tests (Wilcoxon eller Kruskal-Wallis) vil blive brugt. Trinvise multivariate analyser vil blive udført, og alle mulige interaktioner op til ordre 2 vil blive testet. Alle rapporterede P-værdier vil være 2-sidede. For alle statistiske analyser vil en P-værdi på ≤0,05 blive betragtet som statistisk signifikant.

3..6. Etiske spørgsmål PREPAP-undersøgelsen er godkendt af de institutionelle etiske komiteer på både universitetet i Kisangani og universitetet i Bunia. Den vil blive gennemført i fuld overensstemmelse med principperne i "Helsinki-erklæringen" og efterfølgende relevante ændringer. Alle deltagere vil give skriftligt informeret samtykke, før de går ind i forsøget.