Переносимость и эффективность C14 при инфекции ВПЧ (PREPAP)

1. Рационально:

   Группа вирусов папилломы человека (ВПЧ) включает 200 известных вирусов. Стойкая инфекция ВПЧ высокого риска может вызвать рак шейки матки и связана с раком вульвы, влагалища, рта/горла, полового члена и ануса. В развитых странах существуют эффективные профилактические меры против ВПЧ-ВПЧ, такие как вакцины Гардасил и Церварикс. Эти вмешательства с большой разницей реализуются в странах Африки к югу от Сахары, где многие африканские женщины являются носителями высокой вирусной нагрузки шейки матки ВПЧ-ВПЧ, а также предраковых и диспластических поражений. Использование антимикробных молекул, по-видимому, является одним из способов улучшения лечения этих женщин.

   Таким образом, монотерпеноид тетрааскорбокамфората цинка («С14») обладает плейотропными противомикробными свойствами. Несколько экспериментов in vitro продемонстрировали вирицидную активность C14 против ВИЧ (Shattock, 1997; Barré-Sinoussi, 2008) и ВПЧ (Mboumba Bouassa, 2021). В настоящее время предусматривается фаза I/II клинического исследования эффективности толерантности C14 к генитальной онкогенной нагрузке ВПЧ (HR-HPV) и предраковым поражениям шейки матки с целью стимулирования разработки C14 посредством более масштабного исследования.

2. Цели

   2.1. Общая цель

   Это исследование направлено на снижение смертности от рака шейки матки посредством оценки in vivo C14 как потенциального микробицида или терапевтического препарата против онкогенного ВПЧ.

   2.2. Конкретные цели:

   • Определить, эффективен ли C14 для снижения генитальной вирусной нагрузки ВПЧ-ВПЧ и лечения диспластических поражений шейки матки низкой степени тяжести;
   • Оцените переносимость C14 среди добровольцев.
3. Методы

3.1. Дизайн исследования

Настоящее исследование представляет собой двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое клиническое исследование. В него войдут 66 пациентов поликлиники Цитадель, медицинского центра в Буниа, Демократическая Республика Конго. Предполагается, что он продлится 18 недель с учетом сбора окончательных данных для измерения основных результатов.

3.2. Участники

1. Критерии включения:

   Целевой группой являются все сексуально активные женщины в возрасте не менее 30 лет, давшие информированное согласие на участие в исследовании.

   Причина появления такой целевой группы основана на естественном течении инфекции ВПЧ. ВПЧ передается в начале половой жизни, примерно в возрасте от 15 до 20 лет. Его распространенность очень высока в более молодом возрасте и часто носит преходящий характер, поскольку у большинства женщин вирус устраняется спонтанно через несколько лет. Если инфекция сохраняется, в среднем через 10 лет инфекция ВПЧ может привести к раку шейки матки. Таким образом, тестирование планируется начать через 10 лет после дебюта половой жизни, в данном случае в возрасте от 25 до 30 лет.

2. Критерии исключения:

Беременные, кормящие женщины и женщины в послеродовом периоде к участию в исследовании не допускаются. В случае подозрения или диагностирования рака шейки матки женщину направят в больницу третичного уровня для надлежащего лечения. Другие критерии исключения включают: предыдущую операцию на шейке матки, наличие в анамнезе каких-либо тяжелых заболеваний, прием или применение других противовирусных препаратов, известную или предполагаемую аллергию или неблагоприятную реакцию на исследуемый продукт или его компоненты, а также женщин, которые не могут следовать протоколу исследования.

3.3. Процедуры рандомизации

Участники будут рандомизированы в соотношении 1:1 посредством рандомизации блоков. Подходящие участники были случайным образом распределены в одну из двух групп самотестирования: группу C14 или группу плацебо, с использованием последовательно пронумерованных запечатанных конвертов рандомизации.

3.4. Процедуры и последующее наблюдение

Перед началом исследования для врачей и медсестер, участвующих в исследовании, будет организовано базовое обучение. Этот тренинг будет охватывать надлежащую клиническую практику (GCP), сбор образцов с использованием вагинальной вуали (V-V-Veil Up) и цитощеток Thinprep, а также процедуры визуального осмотра после применения уксусной кислоты (VIA) и криотерапии.

Предварительная фаза исследования будет включать в себя предполагаемый набор как минимум 420 женщин, соответствующих нашим критериям. Будет получено официальное информированное согласие, и будет проведено обучение важности диагностики и профилактики рака шейки матки, а также раннего лечения возможных предраковых поражений шейки матки. Соответствующие критериям добровольцы будут приглашены для участия в общественной программе скрининга рака шейки матки (VIA). Затем будет проведен первичный молекулярный скрининг на ВПЧ-HR с использованием медицинского устройства для самостоятельного взятия цервикально-влагалищного секрета (Vaginal Veil Collector V-Veil Up UP2™, VVeil-Up Production SRL, Румыния). Цервикальные вагинальные выделения будут помещены в транспортную среду CytAll перед ПЦР-анализом с использованием экстрактора Singu 20 (Singuway, Шэньчжэнь, Китай) и термоциклера QuantGene 9600 (Bioer Technology, Ханчжоу, Китай). В случае наличия хотя бы одного ВПЧ-ВПЧ (положительный тест на ВПЧ с Ct <33), подходящие участники будут лежать в положении литотомии на гинекологическом столе. После обнажения шейки матки с помощью зеркала, введенного во влагалище, врач возьмет образец шейки матки с использованием раствора Thinprep PreservCyt® (Hologic, Мальборо, США) для цитологического анализа шейки матки. Поражения шейки матки будут интерпретироваться в соответствии с классификацией Bethesda.

Фаза исследования будет состоять из введения в больницу вагинального шприца 5 мл 1% C14 два раза в день в течение 7 дней, начиная первый курс лечения во время фолликулярной фазы цикла, сразу после последней менструации (S1), второй курс лечения. в следующем месяце (S5), третье лечение через 4 недели (S9) и последнее лечение через 8 недель (S13). Гинекологическое наблюдение с молекулярным тестированием на ВПЧ и мазком из шейки матки будет проводиться через два дня после каждого курса лечения в S2, S6, S10, S14 и через 2 недели после последнего курса лечения (S16). Незащищенный половой акт не будет разрешен во время каждого курса лечения и в течение как минимум 72 часов перед каждым мазком из половых органов.

Испытание фазы I будет представлять собой тест на переносимость после первого курса лечения. Все участники заполнят анкету ВОЗ по клинической толерантности во время медицинского осмотра. Будут проведены физикальное и кольпоскопическое обследование, за которым последует анализ провоспалительных, системных и цервикально-вагинальных маркеров, а также гематологическое, печеночное и почечное обследование.

Исследование фазы II будет представлять собой исследование эффективности после каждого курса лечения (четыре курса), в котором будет сравниваться эффективность C14 между двумя группами исследования. Конечными точками будут вирусологические (генитальная нагрузка ВПЧ-ВПЧ) и цитологические. Цитологический контроль будет проводиться через 6 месяцев и один год с начала исследования.

3.5. Статистический анализ

Данные будут собраны в базе данных Excel с использованием программного обеспечения le Kobo Collect KoboCollect, а анализ будет выполнен с помощью SPSS 20.0 (IBM, Атланта, США). Пропорции будут сравниваться с использованием критерия x2 или точного теста Фишера (при необходимости). Для непрерывных переменных будет использоваться t-критерий Стьюдента. При необходимости для сравнения внутри пациента будет использоваться тест Мак-Немара. Ненормально распределенные переменные будут преобразованы или будут использованы непараметрические критерии (Уилкоксона или Крускала-Уоллиса). Будет выполнен поэтапный многомерный анализ и протестированы все возможные взаимодействия до порядка 2. Все сообщаемые значения P будут двусторонними. Для всех статистических анализов значение P ≤0,05 будет считаться статистически значимым.

3..6. Этические вопросы Исследование PREPAP одобрено институциональными этическими комитетами Университета Кисангани и Университета Буниа. Оно будет проводиться в полном соответствии с принципами «Хельсинкской декларации» и последующими соответствующими поправками. Все участники предоставят письменное информированное согласие перед участием в исследовании.