Toleranse og effektivitet av C14 på HPV-infeksjon (PREPAP)

1. Rasjonal:

   Gruppen humant papillomavirus (HPV) inkluderer 200 kjente virus. Vedvarende høyrisiko HPV-infeksjon kan forårsake livmorhalskreft, og er assosiert med kreft i vulva, vagina, munn/hals, penis og anus. Effektive forebyggende intervensjoner mot HR-HPV finnes i utviklede land, som Gardasil- og Cervarix-vaksinene. Disse intervensjonene gjennomføres med stor ulikhet i Afrika sør for Sahara, hvor mange afrikanske kvinner bærer høye cervikale virale belastninger av HR-HPV og precancerøse og dysplastiske lesjoner. Bruken av antimikrobielle molekyler ser ut til å være en måte å forbedre håndteringen av disse kvinnene på.

   Monoterpenoid sinktetra-askorbo-kamforat ("C14") har således pleiotrope antimikrobielle egenskaper. Flere in vitro-eksperimenter har vist C14s viricidale aktivitet mot HIV (Shattock, 1997; Barré-Sinoussi, 2008) og HPV (Mboumba Bouassa, 2021). En fase I/II klinisk studie av C14s toleranse-effekt på genital onkogen HPV-belastning (HR-HPV) og på precancerøse cervikale lesjoner er nå sett for seg, med sikte på å øke utviklingen av C14 gjennom en større studie.

2. Mål

   2.1. Generelt mål

   Denne forskningen har som mål å bidra til å redusere dødeligheten av livmorhalskreft gjennom in vivo-evaluering av C14 som et potensielt mikrobicid eller terapeutisk medikament mot onkogen HPV.

   2.2. Spesifikke mål:

   • Bestem om C14 er effektiv for å redusere den genitale virusmengden av HR-HPV og til å behandle lavgradige dysplastiske lesjoner i livmorhalsen;
   • Evaluer toleransen til C14 blant frivillige.
3. Metoder

3.1. Studiedesign

Denne studien er en dobbeltblind randomisert placebokontrollert klinisk studie. Det vil omfatte 66 pasienter i Polyclinique Citadelle, et helsesenter i Bunia, Den demokratiske republikken Kongo. Det er estimert å vare i 18 uker med tanke på endelig datainnsamling for primære utfallsmålinger.

3.2. Deltakere

1. Inkluderingskriterier:

   Målgruppen er alle seksuelt aktive kvinner, i alderen minst 30 år og som vil gi sitt informerte samtykke til å delta i studien.

   Årsaken til denne målpopulasjonen er basert på den naturlige historien til HPV-infeksjon. HPV erverves ved utbruddet av seksuell aktivitet som oppstår rundt 15 til 20 års alder. Prevalensen er svært høy i yngre alder og er ofte forbigående fordi de fleste kvinner vil spontant eliminere viruset etter noen år. Når den vedvarer, kan HPV-infeksjon ta i gjennomsnitt 10 år før det fører til livmorhalskreft. Dermed anslås testing å starte 10 år senere etter seksuell debut i dette tilfellet fra 25 til 30 år og fremover.

2. Ekskluderingskriterier:

Gravide, ammende og post-partum kvinner vil ikke bli akseptert i studien. Ved mistanke om eller diagnostisert livmorhalskreft vil kvinnene bli henvist til et tertiærsykehus for forsvarlig behandling. Andre eksklusjonskriterier inkluderer: tidligere livmorhalskirurgi, medisinsk historie med alvorlige sykdommer, inntak eller bruk av andre antivirale midler, kjent eller mistenkt allergisk eller negativ respons på undersøkelsesproduktet eller dets komponenter og kvinner som ikke er i stand til å følge studieprotokollen.

3.3. Randomiseringsprosedyrer

Deltakerne vil randomisere i forholdet 1:1 gjennom blokkrandomisering. Kvalifiserte deltakere ble tilfeldig tildelt en av to selvtestende grupper, C14-gruppe eller placebo-gruppe, ved bruk av sekvensielt nummererte forseglede randomiseringskonvolutter.

3.4. Prosedyrer og oppfølging

Før studiestart vil det bli organisert grunnopplæring for legene og sykepleierne som er involvert i undersøkelsen. Denne opplæringen vil dekke Good Clinical Practice (GCP), prøvetaking ved bruk av vaginalt slør (V-V-Veil Up) og Thinprep cytobørster, samt prosedyrer for visuell inspeksjon etter påføring av eddiksyre (VIA) og kryoterapi.

Den innledende fasen av utprøvingen vil innebære prospektiv rekruttering av minst 420 kvinner som oppfyller våre kriterier. Formelt informert samtykke vil bli innhentet, og det vil bli gitt opplæring om viktigheten av livmorhalskreftdiagnostikk og forebygging med tidlig behandling av mulige pre-cancerøse livmorhalsskader. Kvalifiserte frivillige vil bli invitert til å delta i et lokalsamfunnsbasert screeningprogram for livmorhalskreft (VIA). Deretter vil primær molekylær screening for HR-HPV bli utført ved bruk av et medisinsk utstyr for selvprøvetaking av cervicovaginale sekreter (Vaginal Veil Collector V-Veil Up UP2™, VVeil-Up Production SRL, Romania). Cervikale vaginale sekreter vil bli avsatt i CytAll transportmedium før PCR-analyse ved bruk av Singu 20 ekstraktor (Singuway, Shenzhen, Kina) og QuantGene 9600 termosykler (Bioer Technology, Hangzhou, Kina). Ved tilstedeværelse av minst én HR-HPV (positiv HPV-test med Ct < 33), vil kvalifiserte deltakere ligge i litotomistilling på gynekologisk bord. Etter å ha eksponert livmorhalsen med et spekulum satt inn i skjeden, vil legen ta en livmorhalsprøve med Thinprep PreservCyt®-løsning (Hologic, Marlborough, USA) for cervikal cytologisk analyse. Cervikale lesjoner vil bli tolket i henhold til Bethesda-klassifiseringen.

Prøvefasen vil bestå av sykehusadministrasjon med vaginal sprøyte med 5 ml 1 % C14, to ganger daglig i 7 dager, og starter den første kuren under follikkelfasen av syklusen, like etter siste menstruasjon (S1), den andre kuren. den påfølgende måneden (S5), den tredje kuren 4 uker senere (S9) og den siste kuren 8 uker senere (S13). Gynekologisk oppfølging med HPV molekylær testing og livmorhalsutstryk vil bli utført to dager etter hvert behandlingsforløp ved S2, S6, S10, S14 og 2 uker etter siste behandlingsforløp (S16). Ubeskyttet samleie vil ikke være tillatt under hvert behandlingsforløp, og i minst 72 timer før hver kjønnsprøve.

Fase I-studien vil være en toleransetest etter første behandlingsforløp. Alle deltakere vil fylle ut WHOs spørreskjema for klinisk toleranse under en medisinsk undersøkelse. Fysiske og kolposkopiske undersøkelser vil bli utført, etterfulgt av en analyse av pro-inflammatoriske, systemiske og cervico-vaginale markører, og en hematologisk, hepatisk og nyrekontroll.

Fase II-studien vil være en effektstudie etter hvert behandlingsforløp (fire kurs), som sammenligner effekten av C14 mellom de to studiearmene. Endepunkter vil være virologiske (genital HR-HPV-belastning) og cytologiske. Cytologiske kontroller vil bli utført etter 6 måneder og ett år fra starten av forsøket.

3.5. Statistiske analyser

Data vil bli samlet inn i Excel-database ved hjelp av le Kobo collect KoboCollect programvare og analysene vil bli utført med SPSS 20.0 (IBM, Atlanta, USA). Proporsjoner vil bli sammenlignet med x2 eller Fishers eksakte tester (når nødvendig). Elevens t-test vil bli brukt for kontinuerlige variabler. En Mc Nemar-test vil bli brukt for sammenligninger innen pasient der det er hensiktsmessig. Ikke-normalfordelte variabler vil bli transformert, eller ikke-parametriske tester (Wilcoxon eller Kruskal-Wallis) vil bli brukt. Trinnvise multivariate analyser vil bli utført, og alle mulige interaksjoner opp til ordre 2 vil bli testet. Alle rapporterte P-verdier vil være 2-sidige. For alle statistiske analyser vil en P-verdi på ≤0,05 anses som statistisk signifikant.

3..6. Etiske spørsmål PREPAP-studien er godkjent av de institusjonelle etiske komiteene ved både universitetet i Kisangani og universitetet i Bunia. Den vil bli gjennomført i full overensstemmelse med prinsippene i "Helsingforserklæringen" og påfølgende relevante endringer. Alle deltakere vil gi skriftlig informert samtykke før de går inn i prøven.