Evaluering af genetiske molekylære årsager til hjertestop uden for hospitalet: Fra patienter til familier (GenetiCA)

Uden for hospitalets hjertestop (OHCA) er en af ​​de vigtigste årsager til død, og størstedelen af ​​OHCAS kan tilskrives hjerte-kar-sygdomme. Andelen af ​​unge patienter (alderen ≤ 50 år) blandt OHCA-ofrene er ikke ubetydelig (1-20 pr. 100.000 indbyggere). Mange OHCA'er i denne population kan skyldes ændringer i gener, der fører til molekylære ændringer, der forårsager arytmogene sygdomme. Derfor, bortset fra at udføre en obduktion i alle uforklarlige dødsfald hos unge mennesker (≤50 år), anbefales det af de største europæiske og amerikanske videnskabelige samfund at udføre en genetisk test efter mortem for de mest almindelige gener, der er forbundet med sjældne arytmogene arvelige hjertesygdomme gennem 5-10 ml helblod, der er bevaret i EDTA. Sådanne procedurer udføres imidlertid ikke rutinemæssigt, og normalt udføres de kun kun på indlagte patienter, der desværre repræsenterer et mindretal af OHCA -ofre. Udførelsen af ​​en genetisk test efter slagtning kan faktisk forklare op til 15-25% af pludselige hjertedødsfald hos unge, og af denne grund understreger et fælles konsensusdokument mellem 5 videnskabelige samfund, at pludselig død i unge mennesker bør betragtes som en folkesundhedsprioritet i betragtning af den høje procentdel af arvede genetiske hjertesygdomme og virkningen på familien, hvilket tilskynder til investeringer inden for offentlige fond inden for dette område. En række undersøgelser, der evaluerer arytmogen hjertesygdom hos patienter, der overlevede eller døde af hjertestop, er blevet udført i de sidste 2 årtier. I nogle af dem, der blev udført i de tidlige 2000'ere, fokuserede forskere deres analyse på gener relateret til langt QT-syndrom (LQT'er) og catecholaminergiske polymorfe ventrikulære takykardi (CPVT), fundet patogene varianter hos 11-40% af patienterne. I de senere år, takket være brugen af ​​nye teknikker, såsom næste generations sekventering (NGS), har det været muligt at udvide analysen med optimering af omkostninger og genetisk materiale, der kræves, til multi-genpaneler, der udforsker gener, der er knyttet til LQTS, CPVT, kort QT-syndrom (SQTS), Brugada syndrom (BRS), Arrythmogenic CardiOmopathy Hypertrofisk kardiomyopati (HCM), restriktiv kardiomyopati (RCM), udvidet kardiomyopati (DCM) og ikke-smal kardiomyopati (LCVN). Imidlertid involverede alle disse undersøgelser til dato et begrænset antal patienter, der blev valgt enten fra overlevende fra OHCA eller fra ofre for OHCAS, for hvem der var krævet obduktionsresultater. Desuden fokuserede disse undersøgelser på begrænsede geografiske områder. Der er i øjeblikket ingen undersøgelser, der homogent og tværsnit involverer et helt geografisk område ved at evaluere alle patienter, der lider af en OHCA på dette område.

Alle de patienter, der lider af OHCA af medicinsk etiologi i Lombardy -regionen ≤50 år, for hvem genoplivningsmanøvrer blev startet af EMS (AREU), vil blive tilmeldt. EMS -personalet vil opbevare 10 ml blod, der er erhvervet under genoplivningsmanøvrer gennem de vaskulære adgangsruter, der er placeret til patientens pleje. Dette vil ikke ændre standard patientbehandling. Blodet opbevares ved 4 ° C i EMS -provinsstationer og indsamles med jævne mellemrum. EMS -personalet vil erhverve informeret samtykke til genetisk analyse af en tredjepart, der tilhører den samme genetiske linje som patienten eller vil bede om en kontaktadresse til efterfølgende kontakt fra forskerteamet.

Laboratoriet udfører alikvotning og genetisk analyse. DNA -ekstraktionen udføres gennem en automatiseret ekstraktor, og de ekstraherede DNA -prøver sekventeres ved anvendelse af 1. Et opdateret tilpasset agilent panel inklusive kendte og validerede sygdomsgener såvel som nye kandidatgener; 2.. Illumina Trusightcardio multi-gen-panel, inklusive alle gener, der oftest er forbundet med LQT'er, CPVT, SQTS, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, Rasopathies, Lysosomale opbevaringssygdomme, andre sjældne genetiske kardiovaskulære sygdomme, sjældne former for autosomale recessive Myopathies og Heritable metaboliske sygdomme.

I tilfælde af en P-LP-variant eller en VUS blev identificeret, vil genetisk rådgivning og klinisk-instrumental evaluering af Probands første grads familiemedlemmer blive tilbudt på Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Alle familiemedlemmer vil blive screenet med et elektrokardiogram og et ekkokardiogram, og behovet for udførelse af andre diagnostiske tests evalueres baseret på individuelle egenskaber og familiehistorien for hver patient. Hvis en P-LP-variant blev identificeret i proband, vil de første grads familiemedlemmer blive inviteret til at gennemgå en genetisk test for at verificere, om de er bærere af den samme variant. Alle data om de terapeutiske handlinger, der udføres for at forhindre yderligere pludselige hjertedødsfald, indsamles.

For hver patientdata vedrørende OHCA-egenskaberne før hospitalet indsamles behandlingen, behandlingen, kliniske post-rescitation og laboratoriedata (for overlevede patienter) og overlevelsen ved hjælp af Lombardiacare. Data vedrørende den genetiske analyse og vedrørende familiemedlemmerne vil alle data om den tidligere medicinske historie og de udførte diagnostiske og terapeutiske procedurer blive indsamlet. Alle disse data indgives ved hjælp af RedCap® (Research Electronic Data Capture) platform), der er vært hos Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, og vil blive fusioneret til en unik database.

Variantprævalensen beregnes som forholdet mellem patienter, hvor en variant findes til det samlede antal patienter med OHCA og dets binomiale nøjagtige 95% konfidensinterval. Derudover sammenlignes forskellene i forekomsten af ​​P/LP eller VUS hos patienter for køn, provins, der præsenterer rytme og andre OHCA -egenskaber. Forskellen i overlevelse ved hospitalets ankomst og ved udskrivning mellem patienter med eller uden en potentiel P-LP-variant beregnes. Endelig vil forskelle i forekomst og overlevelse i henhold til niveauet af forurenende stoffer i de forskellige geografiske områder evalueres korrekt.