Avaliação de causas genéticas-moleculares de parada cardíaca fora do hospital: de pacientes para famílias (GenetiCA)

A parada cardíaca fora do hospital (OHCA) é uma das causas mais importantes da morte e a maioria dos OHCAs é atribuída a doenças cardiovasculares. A proporção de pacientes jovens (com idade ≤ 50 anos) entre as vítimas da OHCA não é insignificante (1-20 por 100.000 habitantes). Muitos OHCAs nessa população podem ser devidos a alterações nos genes que levam a alterações moleculares causando doenças arritmogênicas. É por isso que, além de realizar uma autópsia em todas as mortes inexplicáveis ​​em jovens (≤50 anos), é recomendado pelas principais sociedades científicas européias e americanas para realizar um teste genético post mortem para os genes mais comuns associados a raros doenças cardíacas arritmogênicas raras por 5 a 10 ml de sangue inteiro preservados em Edta. Tais procedimentos, no entanto, não são realizados rotineiramente e geralmente são realizados apenas em pacientes hospitalizados que, infelizmente, representam uma minoria de vítimas de OHCA. A execução de um teste genético post-mortem pode de fato explicar até 15-25% das mortes cardíacas súbitas em jovens e, por esse motivo, um documento de consenso conjunto entre 5 sociedades científicas enfatiza que a morte súbita em jovens deve ser considerada uma prioridade de saúde pública, dada a alta porcentagem de pesquisas genéticas e o impacto da família. Vários estudos que avaliam doença cardíaca arritmogênica em pacientes que sobreviveram ou morreram de parada cardíaca foram realizados nas últimas 2 décadas. Em alguns deles, realizados no início dos anos 2000, os pesquisadores concentraram sua análise em genes relacionados à síndrome de QT longa (LQTS) e taquicardia ventricular polimórfica catecolaminérgica (CPVT), encontrando variantes patogênicas em 11-40% dos pacientes. In more recent years, thanks to the use of new techniques such as next-generation sequencing (NGS), it has been possible to extend the analysis, with optimisation of costs and genetic material required, to multi-gene panels exploring genes linked to LQTS, CPVT, short QT syndrome (SQTS), Brugada syndrome (BrS), arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM), Cardiomiopatia hipertrófica (HCM), cardiomiopatia restritiva (RCM), cardiomiopatia dilatada (DCM) e cardiomiopatia não compactada (LCVN). No entanto, todos esses estudos até o momento envolveram um número limitado de pacientes, selecionados de sobreviventes de OHCA ou de vítimas de OHCAs para quem foram necessários os achados da autópsia. Além disso, esses estudos se concentraram em áreas geográficas limitadas. Atualmente, não existem estudos que envolvam homogeneamente e transversalmente uma área geográfica inteira, avaliando todos os pacientes que sofrem de uma OHCA nesse território.

Todos os pacientes que sofrem de OHCA de etiologia médica na região da Lombardia ≤50 anos, para quem as manobras de ressuscitação foram iniciadas pelo EMS (AREU), serão matriculadas. O pessoal do EMS armazenará 10 ml de sangue adquirido durante as manobras de ressuscitação através das rotas de acesso vascular posicionadas para os cuidados do paciente. Isso não alterará o tratamento padrão do paciente. O sangue será armazenado a 4 ° C nas estações provinciais do EMS e será coletado periodicamente. O pessoal do EMS adquirirá consentimento informado para análise genética por terceiros pertencentes à mesma linha genética que o paciente ou solicitará um endereço de contato para o contato subsequente da equipe de pesquisa.

O laboratório realizará alíquotas e análises genéticas. A extração de DNA será realizada através de um extrator automatizado e as amostras de DNA extraídas serão sequenciadas usando 1. Um painel Agilent personalizado atualizado, incluindo genes de doenças conhecidas e validadas, bem como novos genes candidatos; 2. the Illumina TrusightCardio multi-gene panel, including all genes most commonly associated with LQTS, CPVT, SQTS, BrS, ACM, HCM, RCM, DCM, RASopathies, lysosomal storage diseases, other rare genetic cardiovascular diseases, rare forms of autosomal recessive myopathies and heritable metabolic diseases.

No caso de uma variante P-LP ou uma VUS, foi identificada, o aconselhamento genético e a avaliação clínica-instrumental dos membros da família de primeiro grau do Proband serão oferecidos no Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Todos os membros da família serão rastreados com um eletrocardiograma e um ecocardiograma, e a necessidade de execução de outros testes de diagnóstico será avaliada com base nas características individuais e no histórico familiar de cada paciente. Além disso, se uma variante P-LP foi identificada no probando, os membros da família em primeiro grau serão convidados a passar por um teste genético para verificar se são portadores da mesma variante. Todos os dados sobre as ações terapêuticas executadas para evitar mais mortes cardíacas repentinas serão coletadas.

Para cada dados do paciente sobre as características pré-hospitalares do OHCA, o tratamento, os dados clínicos e laboratoriais pós-ressuscitação (para pacientes sobrevividos) e a sobrevida serão coletados usando o Lombardiacare. Dados sobre a análise genética e, sobre os membros da família, todos os dados sobre o histórico médico passado e os procedimentos diagnósticos e terapêuticos serão coletados. Todos esses dados serão arquivados na plataforma RedCap® (pesquisa de captura de dados eletrônicos), hospedados no Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo e serão mesclados em um banco de dados exclusivo.

A prevalência variante será calculada como a razão de pacientes nos quais uma variante é encontrada para o número total de pacientes com OHCA e seu intervalo de confiança de 95% exato binomial. Além disso, as diferenças na prevalência de P/LP ou VUs em pacientes estratificadas para gênero, província, apresentando ritmo e outras características da OHCA serão comparadas. A diferença na sobrevivência na chegada do hospital e na alta entre pacientes com ou sem uma variante P-LP em potencial será calculada. Finalmente, as diferenças na prevalência e sobrevivência de acordo com o nível de poluentes nas diferentes áreas geográficas serão avaliadas adequadamente.