Evaluatie van genetische moleculaire oorzaken van hartstilstand buiten het ziekenhuis: van patiënten tot families (GenetiCA)

Out-of-Hospital Cardiac Rest (OHCA) is een van de belangrijkste doodsoorzaken en de meerderheid van OHCA's zijn toe te schrijven aan hart- en vaatziekten. Het aandeel jonge patiënten (≤ 50 jaar) bij de OHCA-slachtoffers is niet te verwaarlozen (1-20 per 100.000 inwoners). Veel OHCA's in deze populatie kunnen te wijten zijn aan veranderingen in genen die leiden tot moleculaire veranderingen die aritmogene ziekten veroorzaken. Dat is de reden waarom, afgezien van het uitvoeren van een autopsie bij alle onverklaarbare sterfgevallen bij jongeren (≤50 jaar), het door de belangrijkste Europese en Amerikaanse wetenschappelijke samenlevingen wordt aanbevolen om een ​​post-mortem genetische test uit te voeren voor de meest voorkomende genen geassocieerd met zeldzame aritmogene erfelijke hartziekten tot en met 5-10 ml volle bloed in EDTA. Dergelijke procedures worden echter niet routinematig uitgevoerd en meestal worden ze alleen uitgevoerd op in het ziekenhuis opgenomen patiënten die helaas een minderheid van OHCA -slachtoffers vertegenwoordigen. De uitvoering van een post-mortem genetische test kan in feite tot 15-25% van plotselinge hartdood bij jongeren verklaren en om deze reden benadrukt een gezamenlijk consensusdocument onder 5 wetenschappelijke samenlevingen dat plotselinge dood bij jongeren als een prioriteit voor de volksgezondheid moet worden beschouwd, gezien het hoge percentage van erfelijke genetische hartziekten en de impact op het gezin, de investering van de investering van het onderzoek in dit veld. Een aantal onderzoeken die aritmogene hartziekte evalueren bij patiënten die overleefden of stierven aan een hartstilstand zijn de afgelopen 2 decennia uitgevoerd. In sommige van hen, uitgevoerd in de vroege jaren 2000, concentreerden onderzoekers hun analyse op genen gerelateerd aan lang QT-syndroom (LQTS) en catecholaminerge polymorfe ventriculaire tachycardie (CPVT), waarbij pathogene varianten bij 11-40% van de patiënten werden gevonden. In more recent years, thanks to the use of new techniques such as next-generation sequencing (NGS), it has been possible to extend the analysis, with optimisation of costs and genetic material required, to multi-gene panels exploring genes linked to LQTS, CPVT, short QT syndrome (SQTS), Brugada syndrome (BrS), arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM), Hypertrofische cardiomyopathie (HCM), restrictieve cardiomyopathie (RCM), verwijde cardiomyopathie (DCM) en niet-compactie cardiomyopathie (LCVN). Tot nu toe betrof al deze studies echter een beperkt aantal patiënten, geselecteerd door overlevenden van OHCA of van slachtoffers van OHCA's voor wie autopsiebevindingen nodig waren. Bovendien waren deze studies gericht op beperkte geografische gebieden. Er zijn momenteel geen studies die homogeen en dwarsdoorsnede een volledig geografisch gebied betrekken door alle patiënten te evalueren die aan een OHCA op dat grondgebied lijden.

Alle patiënten die lijden aan OHCA van medische etiologie in Lombardije -regio ≤50 jaar, voor wie reanimatiemanoeuvres is gestart door EMS (ASU), zullen worden ingeschreven. Het EMS -personeel zal 10 ml bloed opslaan die is verkregen tijdens reanimatiemanoeuvres via de vasculaire toegangsroutes die zijn geplaatst voor de zorg van de patiënt. Dit zal de standaard patiëntbehandeling niet veranderen. Het bloed wordt opgeslagen bij 4 ° C in de EMS -provinciale stations en zal periodiek worden verzameld. Het EMS -personeel verwerft geïnformeerde toestemming voor genetische analyse door een derde partij die tot dezelfde genetische lijn behoort als de patiënt of zal vragen om een ​​contactadres voor daaropvolgend contact door het onderzoeksteam.

Het laboratorium zal aliquoting en genetische analyse uitvoeren. De DNA -extractie wordt uitgevoerd via een geautomatiseerde extractor en de geëxtraheerde DNA -monsters worden gesequenced met 1. Een bijgewerkt aangepast Agilent -panel met bekende en gevalideerde ziektegenen en nieuwe kandidaatgenen; 2. Het Illumina TrusightCardio Multi-Gene-panel, inclusief alle genen die het meest worden geassocieerd met LQT's, CPVT, SQTS, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, Rasopathies, lysosomale opslagziekten, andere zeldzame genetische cardiovasculaire ziekten, zeldzame vormen van autosomale recessieve myopathieën en erfelijke metabolische metabolische metabolische metabolische ziektes.

In het geval van een P-LP-variant of een VUS werd geïdentificeerd, worden genetische counseling en klinisch-instrumentele evaluatie van de eerste graad familieleden van de proband aangeboden in de Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Alle familieleden zullen worden gescreend met een elektrocardiogram en een echocardiogram, en de noodzaak voor het uitvoeren van andere diagnostische tests zal worden geëvalueerd op basis van individuele kenmerken en de familiegeschiedenis van elke patiënt. Bovendien, als een P-LP-variant in de proband werd geïdentificeerd, zullen de eerstegraads familieleden worden uitgenodigd om een ​​genetische test te ondergaan om te verifiëren of ze dragers van dezelfde variant zijn. Alle gegevens over de therapeutische acties die worden uitgevoerd om verdere plotselinge cardiale sterfgevallen te voorkomen, worden verzameld.

Voor elke patiëntgegevens met betrekking tot de OHCA-kenmerken vóór het ziekenhuis, de behandeling, de klinische en laboratoriumgegevens na de responsatie (voor overleefde patiënten) en de overleving zal worden verzameld met behulp van de Lombardiacare. Gegevens met betrekking tot de genetische analyse en, wat betreft de familieleden, alle gegevens over de medische geschiedenis in het verleden en de diagnostische en therapeutische procedures worden verzameld. Al deze gegevens worden ingediend met behulp van het RedCap® -platform (Research Electronic Data Capture), gehost op Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, en worden samengevoegd tot een unieke database.

De variantprevalentie zal worden berekend als de verhouding van patiënten bij wie een variant wordt gevonden tot het totale aantal patiënten met OHCA en het binomiale exacte 95% betrouwbaarheidsinterval. Bovendien zullen de verschillen in de prevalentie van P/LP of VUS bij patiënten gestratificeerd voor geslacht, provincie, met ritme en andere OHCA -kenmerken worden vergeleken. Het verschil in overleving bij aankomst in het ziekenhuis en bij ontslag tussen patiënten met of zonder een potentiële P-LP-variant zal worden berekend. Ten slotte zullen verschillen in prevalentie en overleving volgens het niveau van verontreinigende stoffen in de verschillende geografische gebieden correct worden geëvalueerd.