Ocena genetycznych przyczyn zatrzymania serca poza szpitalnym: od pacjentów po rodziny (GenetiCA)

Zatrzymanie kardiologiczne (OHCA) poza szpitalem jest jedną z najważniejszych przyczyn śmierci, a większość OHC jest przypisywana chorobom sercowo-naczyniowym. Odsetek młodych pacjentów (w wieku ≤ 50 lat) wśród ofiar OHCA nie jest nieistotny (1-20 na 100 000 mieszkańcy). Wiele OHC w tej populacji może być spowodowane zmianami genów prowadzących do zmian molekularnych powodujących choroby arytmogenne. Właśnie dlatego, oprócz wykonywania autopsji we wszystkich niewyjaśnionych zgonach u młodych ludzi (≤50 lat), zaleca się główne europejskie i amerykańskie społeczeństwa naukowe do przeprowadzenia post-mortemowego testu genetycznego dla najczęstszych genów związanych z rzadkimi arytmogennymi dziedzicznymi chorobami serca przez 5-10 ml pełnej krwi zachowanej w EDTA. Takie procedury nie są jednak rutynowo wykonywane i zwykle wykonywane są tylko u hospitalizowanych pacjentów, którzy niestety reprezentują mniejszość ofiar OHCA. Wykonanie pośmiertnego testu genetycznego może w rzeczywistości wyjaśnić do 15-25% nagłych zgonów serca u młodych ludzi i z tego powodu wspólny dokument konsensusowy wśród 5 społeczeństw naukowych podkreśla, że ​​nagła śmierć u młodych ludzi należy uznać za priorytet zdrowia publicznego. W ciągu ostatnich 2 dekad przeprowadzono szereg badań oceniających arytmogenną chorobę serca u pacjentów, którzy przeżyli lub zmarli z powodu zatrzymania krążenia. W niektórych z nich, przeprowadzonych na początku 2000 roku, naukowcy skupili swoją analizę na genach związanych z zespołem długiego QT (LQTS) i katecholaminergicznym polimorficznym tachykardią komorową (CPVT), znajdując patogenne warianty u 11–40% pacjentów. W ostatnich latach, dzięki zastosowaniu nowych technik, takich jak sekwencjonowanie nowej generacji (NGS), możliwe było rozszerzenie analizy, z optymalizacją kosztów i wymaganego materiału genetycznego, na panele wielofunkcyjne badające geny powiązane z LQTS, CPVT, krótkimi zespołem QT (SQT), zespołem Brugada (BRS), arhypatii (ACTMM), przelewu (SQTS), zespołu Brugada (BRS). Kardiomiopatia (HCM), kardiomiopatia restrykcyjna (RCM), kardiomiopatia rozszerzona (DCM) i kardiomiopatia niekompaktowa (LCVN). Jednak wszystkie te dotychczasowe badania obejmowały ograniczoną liczbę pacjentów, wybranych od osób, które przeżyły OHCA lub od ofiar OHCA, dla których wymagane były wyniki autopsji. Ponadto badania te koncentrowały się na ograniczonych obszarach geograficznych. Obecnie nie ma badań, które jednorodnie i przekrojowe obejmują cały obszar geograficzny poprzez ocenę wszystkich pacjentów cierpiących na OHCA na tym terytorium.

Wszyscy pacjenci cierpiący na OHCA Etiologii Medycznej w regionie Lombardii ≤50 lat, dla których Manewry resuscytacyjne zostały założone przez EMS (AREU), zostaną włączone. Personel EMS będzie przechowywał 10 ml krwi nabytych podczas manewrów resuscytacyjnych poprzez trasy dostępu naczyniowego ustawione na opiekę pacjenta. Nie zmieni to standardowego leczenia pacjenta. Krew będzie przechowywana w temperaturze 4 ° C na stacjach prowincji EMS i będzie okresowo zebrana. Personel EMS zyska świadomą zgodę na analizę genetyczną przez stronę trzecią należącą do tej samej linii genetycznej co pacjent lub poprosi o adres kontaktowy w celu późniejszego kontaktu przez zespół badawczy.

Laboratorium przeprowadzi analizę podwielokrotności i analizy genetycznej. Ekstrakcja DNA zostanie wykonana za pomocą zautomatyzowanego ekstraktora, a ekstrahowane próbki DNA zostaną zsekwencjonowane przy użyciu 1. Zaktualizowany niestandardowy panel Agilent, w tym znane i zatwierdzone geny choroby, a także nowe geny kandydujące; 2. Multi-gen panel Illumina trusightcardio, w tym wszystkie geny najczęściej związane z LQTS, CPVT, SQTS, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, rasopathies, lizosomalne choroby magazynowe, inne rzadkie genetyczne choroby sercowo-naczyniowe, rzadkie formy autosomalowe miopatyczne i dzielone matki.

W przypadku wariantu P-LP lub VUS został zidentyfikowany, doradztwo genetyczne i instrumentalna kliniczna ocena członków rodziny pierwszego stopnia będą oferowane w Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Wszyscy członkowie rodziny zostaną przesiewani elektrokardiogramem i echokardiogramem, a potrzeba wykonywania innych testów diagnostycznych zostanie oceniona na podstawie indywidualnych cech i historii rodziny każdego pacjenta. Ponadto, jeśli w probandu zidentyfikowano wariant P-LP, członkowie rodziny pierwszego stopnia zostaną zaproszeni do poddania się testowi genetycznemu w celu sprawdzenia, czy są nosicielami tego samego wariantu. Zebrane zostaną wszystkie dane dotyczące działań terapeutycznych w celu zapobiegania dalszemu nagłym zgonom serca.

Dla każdego danych pacjentów dotyczących cech OHCA przed szpitalem, leczenia, danych klinicznych i laboratoryjnych po resuscytacji (dla pacjentów przeżytych) i przeżycia zostaną zebrane przy użyciu Lombardiacare. Zebrane zostaną dane dotyczące analizy genetycznej i, w odniesieniu do członków rodziny, wszystkie dane dotyczące przeszłej historii medycznej oraz przeprowadzonych procedur diagnostycznych i terapeutycznych. Wszystkie te dane zostaną złożone przy użyciu platformy RedCap® (Research Electronic Data Capture), hostowanej w Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo i zostaną połączone w unikalną bazę danych.

Rozpowszechnienie wariantu zostanie obliczone jako stosunek pacjentów, u których wariant stwierdzono całkowitą liczbę pacjentów z OHCA i jego dwumianową dokładną przedział ufności 95%. Ponadto porównane zostaną różnice w rozpowszechnieniu P/LP lub VUS u pacjentów stratyfikowanych dla płci, prowincji, przedstawiających rytm i inne cechy OHCA. Różnica w przeżyciu w przyjeździe szpitalnym i wydzieleniem między pacjentami z potencjalnym wariantem P-LP lub bez niego zostanie obliczona. Wreszcie różnice w rozpowszechnieniu i przeżyciu zgodnie z poziomem zanieczyszczeń w różnych obszarach geograficznych zostaną właściwie ocenione.