Evaluación de causas genéticas moleculares de paro cardíaco fuera del hospital: de pacientes a familias (GenetiCA)

El paro cardíaco fuera del hospital (OHCA) es una de las causas más importantes de la muerte y la mayoría de las OHCA son atribuibles a enfermedades cardiovasculares. La proporción de pacientes jóvenes (mayores de 50 años) entre las víctimas de OHCA no es insignificante (1-20 por 100.000 habitantes). Muchos OHCA en esta población podrían deberse a alteraciones de los genes que conducen a alteraciones moleculares que causan enfermedades arritmogénicas. Es por eso que, aparte de realizar una autopsia en todas las muertes inexplicables en jóvenes (≤50 años), las principales sociedades científicas europeas y estadounidenses de europeas lo recomiendan realizar una prueba genética post mortem para los genes más comunes asociados con raras enfermedades hereditarias arritmogénicas a través de 5-10 ml de sangre completa preservada en edta. Sin embargo, tales procedimientos no se realizan de manera rutinaria y generalmente se realizan solo en pacientes hospitalizados que, desafortunadamente, representan una minoría de víctimas de OHCA. La ejecución de una prueba genética post mortem puede explicar hasta el 15-25% de las muertes cardíacas repentinas en los jóvenes y, por esta razón, un documento de consenso conjunto entre 5 sociedades científicas subrayan que la muerte súbita en los jóvenes debe considerarse una prioridad de salud pública dada el alto porcentaje de enfermedades cardíacas genéticas hereditarias y el impacto en la familia, fomentando la inversión de las fondos públicos en las investigaciones en este campo. Varios estudios que evalúan la enfermedad cardíaca arritmogénica en pacientes que sobrevivieron o murieron de paro cardíaco en las últimas 2 décadas. En algunos de ellos, llevados a cabo a principios de la década de 2000, los investigadores centraron su análisis en genes relacionados con el síndrome QT largo (LQTS) y la taquicardia ventricular polimórfica catecolaminérgica (CPVT), encontrando variantes patógenas en el 11-40% de los pacientes. In more recent years, thanks to the use of new techniques such as next-generation sequencing (NGS), it has been possible to extend the analysis, with optimisation of costs and genetic material required, to multi-gene panels exploring genes linked to LQTS, CPVT, short QT syndrome (SQTS), Brugada syndrome (BrS), arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM), miocardiopatía hipertrófica (HCM), miocardiopatía restrictiva (RCM), miocardiopatía dilatada (DCM) y miocardiopatía no competente (LCVN). Sin embargo, todos estos estudios hasta la fecha involucraron un número limitado de pacientes, seleccionados de sobrevivientes de OHCA o de víctimas de OHCA para quienes se requerían los hallazgos de la autopsia. Además, estos estudios se centraron en áreas geográficas limitadas. Actualmente no hay estudios que involucren homogéneo y transversalmente un área geográfica completa mediante la evaluación de todos los pacientes que sufren una OHCA en ese territorio.

Todos los pacientes que padecen OHCA de etiología médica en la región de Lombardía ≤50 años, para quienes EMS (ARUU) iniciará maniobras de reanimación. El personal de EMS almacenará 10 ml de sangre adquirida durante las maniobras de reanimación a través de las rutas de acceso vasculares posicionadas para el cuidado del paciente. Esto no alterará el tratamiento estándar del paciente. La sangre se almacenará a 4 ° C en las estaciones provinciales de EMS y se recolectará periódicamente. El personal de EMS adquirirá el consentimiento informado para el análisis genético por parte de un tercero que pertenece a la misma línea genética que el paciente o solicitará una dirección de contacto para el contacto posterior por parte del equipo de investigación.

El laboratorio realizará el análisis de alícuotas y genéticos. La extracción de ADN se realizará a través de un extractor automatizado y las muestras de ADN extraídas se secuenciarán usando 1. Un panel de Agilent personalizado actualizado que incluye genes de enfermedades conocidos y validados, así como nuevos genes candidatos; 2. El panel Illumina TrusightCardio Multi-Gene, incluidos todos los genes más comúnmente asociados con LQTS, CPVT, SQTS, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, Rasopatías, enfermedades de almacenamiento lisosomal, otras enfermedades cardiovasculares genéticas raras, raro forma raras de miopatías autosomales.

En el caso de una variante P-LP o se identificó un VUS, se ofrecerá asesoramiento genético y una evaluación clínica-instrumental de los miembros de la familia de primer grado de Proband en el Fondazione IRCCS Policllinico San Matteo. Todos los miembros de la familia serán examinados con un electrocardiograma y un ecocardiograma, y ​​la necesidad de ejecución de otras pruebas de diagnóstico se evaluará en función de las características individuales y el historial familiar de cada paciente. Además, si se identificó una variante P-LP en el Proband, los miembros de la familia de primer grado serán invitados a someterse a una prueba genética para verificar si son portadores de la misma variante. Se recopilarán todos los datos sobre las acciones terapéuticas realizadas para evitar más muertes cardíacas repentinas.

Para cada datos del paciente con respecto a las características de OHCA prehospitalaria, el tratamiento, los datos clínicos y de laboratorio posteriores a la reuscitación (para pacientes sobrevividos) y la supervivencia se recopilarán utilizando el Lombardiacare. Se recopilarán datos sobre el análisis genético y, con respecto a los miembros de la familia, todos los datos sobre el historial médico pasado y los procedimientos de diagnóstico y terapéuticos realizados. Todos estos datos se presentarán utilizando la plataforma RedCap® (Investigación de captura de datos electrónicos), alojados en Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, y se fusionará en una base de datos única.

La prevalencia de la variante se calculará como la relación de pacientes en los que se encuentra una variante para el número total de pacientes con OHCA y su intervalo de confianza binomial exacto del 95%. Además, se compararán las diferencias en la prevalencia de P/LP o VUS en pacientes estratificadas para el género, la provincia, el ritmo de presentación y otras características de OHCA. Se calculará la diferencia en la supervivencia a la llegada del hospital y al alta entre pacientes con o sin una variante potencial de P-LP. Finalmente, las diferencias en la prevalencia y la supervivencia de acuerdo con el nivel de contaminantes en las diferentes áreas geográficas se evaluarán adecuadamente.