Evaluering av genetisk molekylære årsaker til hjertestans utenfor sykehus: Fra pasienter til familier (GenetiCA)

Hjertestans utenfor sykehus (OHCA) er en av de viktigste dødsårsakene, og flertallet av OHCA-er kan tilskrives hjerte- og karsykdommer. Andelen unge pasienter (i alderen ≤ 50 år) blant OHCA-ofrene er ikke ubetydelig (1-20 per 100.000 innbyggere). Mange OHCA -er i denne populasjonen kan skyldes endringer i gener som fører til molekylære endringer som forårsaker arytmogene sykdommer. Derfor, annet enn å utføre en obduksjon i alle uforklarlige dødsfall hos unge mennesker (≤50 år), anbefales det av de viktigste europeiske og amerikanske vitenskapelige samfunnene å utføre en genetisk test etter mortem for de vanligste genene assosiert med sjeldne arytmogene arvelige hjertesykdommer gjennom 5-10 ml av fullblod bevart i Edta. Slike prosedyrer utføres imidlertid ikke rutinemessig, og vanligvis utføres de bare på sykehusinnlagte pasienter som dessverre representerer et mindretall av OHCA -ofre. Gjennomføringen av en genetisk test etter døden kan faktisk forklare opptil 15-25% av plutselige hjertedødsfall hos unge mennesker, og av denne grunn bør et felles konsensusdokument blant 5 vitenskapelige samfunn understreker at plutselig død hos unge mennesker bør betraktes som en folkehelseprioritet gitt den høye prosentandelen av arvelig genetisk hjertesykdom og innvirkningen på familien, oppmuntre til investering av offentlige midler iarv i forskning i forskning i forskning i forskning i forskning i forskningen. En rekke studier som evaluerer arytmogen hjertesykdom hos pasienter som overlevde eller døde av hjertestans, har blitt utført de siste to tiårene. I noen av dem, utført på begynnelsen av 2000-tallet, fokuserte forskere analysen på gener relatert til langt QT-syndrom (LQTS) og katekolaminerg polymorf ventrikulær takykardi (CPVT), og fant patogene varianter hos 11-40% av pasientene. I de senere år, takket være bruk av nye teknikker som neste generasjons sekvensering (NGS), har det vært mulig å utvide analysen, med optimalisering av kostnader og genetisk materiale som kreves, til multi-gen-paneler som utforsker gener knyttet til LQTS, CPVT, kort QT-syndrom (Sqts), Brugada Syndrome (Barke Qt Syndrome (Sqts), Brugada Syndrome (Barhyts), Brugada Syndrome (BroggyShyts), (ACM), Hypertrofisk kardiomyopati (HCM), restriktiv kardiomyopati (RCM), utvidet kardiomyopati (DCM) og ikke-komprimeringskardiomyopati (LCVN). Imidlertid involverte alle disse studiene til dags dato et begrenset antall pasienter, valgt fra overlevende fra OHCA eller fra ofre for OHCAs som obduksjonsfunn var påkrevd for. Dessuten fokuserte disse studiene på begrensede geografiske områder. Det er foreløpig ingen studier som homogent og tverrsnittlig involverer et helt geografisk område ved å evaluere alle pasienter som lider av en OHCA på det territoriet.

Alle pasientene som lider av OHCA av medisinsk etiologi i Lombardy -regionen ≤50 år, som gjenopplivningsmanøvrer ble startet av EMS (AREU), vil bli registrert. EMS -personellet vil lagre 10 ml blod anskaffet under gjenopplivningsmanøvrer gjennom vaskulære tilgangsruter plassert for pasientens omsorg. Dette vil ikke endre standard pasientbehandling. Blodet vil bli lagret ved 4 ° C i EMS -provinsielle stasjoner og vil bli samlet inn periodisk. EMS -personellet vil skaffe seg informert samtykke for genetisk analyse av en tredjepart som tilhører den samme genetiske linjen som pasienten eller vil be om en kontaktadresse for etterfølgende kontakt fra forskerteamet.

Laboratoriet vil utføre alikvoting og genetisk analyse. DNA -ekstraksjonen vil bli utført gjennom en automatisert avtrekk og de ekstraherte DNA -prøvene vil bli sekvensert ved bruk av 1. Et oppdatert tilpasset Agilent -panel inkludert kjente og validerte sykdomsgener så vel som nye kandidatgener; 2. Illumina TruSightCardio multi-gen-panel, inkludert alle gener som oftest er assosiert med LQTS, CPVT, SQTS, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, Rasopathies, Lysosomale lagringssykdommer, andre sjeldne kardiovaskulære sykdommer.

I tilfelle av en P-LP-variant eller en VUS ble identifisert, vil genetisk rådgivning og klinisk instrumental evaluering av probands første grads familiemedlemmer bli tilbudt på Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Alle familiemedlemmene vil bli screenet med et elektrokardiogram og et ekkokardiogram, og behovet for utførelse av andre diagnostiske tester vil bli evaluert basert på individuelle egenskaper og familiehistorien til hver pasient. Hvis en P-LP-variant ble identifisert i proband, vil førstegrads familiemedlemmer bli invitert til å gjennomgå en genetisk test for å bekrefte om de er bærere av samme varianter. Alle dataene angående de terapeutiske handlingene som er utført for å forhindre ytterligere plutselige hjertedødsfall, vil bli samlet inn.

For hver pasientdata angående OHCA-egenskapene før sykehus, behandlingen av kliniske data og laboratoriedata (for overlevde pasienter) og overlevelsen vil bli samlet inn ved hjelp av Lombardiacare. Data angående den genetiske analysen og angående familiemedlemmer, alle dataene angående tidligere medisinsk historie og de diagnostiske og terapeutiske prosedyrene som er utført, vil bli samlet inn. Alle disse dataene vil bli arkivert ved hjelp av REDCAP® (Research Electronic Data Capture) -plattformen, som er vert på Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, og vil bli slått sammen til en unik database.

Variantutbredelsen vil bli beregnet som forholdet mellom pasienter der en variant er funnet for det totale antallet pasienter med OHCA og dets binomiale eksakte 95% konfidensintervall. Videre vil forskjellene i utbredelsen av P/LP eller VUS hos pasienter stratifisert for kjønn, provins, som presenterer rytme og andre OHCA -egenskaper, sammenlignes. Forskjellen i overlevelse ved ankomst på sykehus og ved utskrivning mellom pasienter med eller uten potensiell P-LP-variant vil bli beregnet. Til slutt vil forskjeller i utbredelse og overlevelse i henhold til nivået av miljøgifter i de forskjellige geografiske områdene bli evaluert på riktig måte.