Оценка генетических молекулярных причин остановки сердца вне дома: от пациентов до семейств (GenetiCA)

Остановка сердца вне дома (OHCA) является одной из наиболее важных причин смерти, и большинство OHCA связаны с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Доля молодых пациентов (в возрасте ≤ 50 лет) среди жертв OHCA не является незначительной (1-20 на 100.000 жители). Многие оканты в этой популяции могут быть связаны с изменениями генов, приводящих к молекулярным изменениям, вызывающим аритмогенные заболевания. Вот почему, кроме того, что вы проведете вскрытие во всех необъяснимых смертельных случаях у молодых людей (≤50 лет), это рекомендуется крупным европейским и американским научным обществам провести посмертный генетический тест для наиболее распространенных генов, связанных с редкими аритмогенными наследственными заболеваниями, через 5-10 мл всей крови, сохраняемые в EDTA. Такие процедуры, однако, не выполняются обычно, и обычно они выполняются только на госпитализированных пациентах, которые, к сожалению, представляют меньшинство жертв OHCA. Выполнение посмертного генетического теста может на самом деле объяснить до 15-25% внезапных сердечных смертей у молодых людей, и по этой причине совместный консенсусный документ среди 5 научных обществ, подчеркивает, что внезапная смерть у молодых людей следует считать приоритетом общественного здравоохранения, учитывая высокий процент наследственных генетических заболеваний сердца и воздействия на семью, поощряя инвестиции общественных средств в исследование на этом поле. За последние 2 десятилетия были проведены ряд исследований, оценивающих аритмогенные сердечные заболевания у пациентов, которые выжили или умерли от остановки сердца, были выполнены. В некоторых из них, проведенных в начале 2000-х годов, исследователи сосредоточили свой анализ генов, связанных с синдромом длинного QT (LQT) и катехоламинергической полиморфной желудочкой тахикардии (CPVT), обнаружив патогенные варианты у 11-40% пациентов. In more recent years, thanks to the use of new techniques such as next-generation sequencing (NGS), it has been possible to extend the analysis, with optimisation of costs and genetic material required, to multi-gene panels exploring genes linked to LQTS, CPVT, short QT syndrome (SQTS), Brugada syndrome (BrS), arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM), hypertrophic Кардиомиопатия (HCM), ограничительная кардиомиопатия (RCM), дилатационная кардиомиопатия (DCM) и некомплекционная кардиомиопатия (LCVN). Тем не менее, все эти исследования на сегодняшний день включали ограниченное количество пациентов, выбранных либо от выживших OHCA, либо от жертв OHCAS, для которых требовались результаты вскрытия. Более того, эти исследования были сосредоточены на ограниченных географических областях. В настоящее время нет исследований, которые гомогенно и поперечного сечения включают в себя целую географическую область, оценивая всех пациентов, страдающих от OHCA на этой территории.

Все пациенты, страдающие OHCA медицинской этиологии в регионе Ломбардии ≤50 лет, для которых будут зачислены маневры реанимации EMS (AREU). Персонал EMS будет хранить 10 мл крови, приобретенных во время реанимационных маневров через маршруты сосудистого доступа, расположенные для ухода за пациентом. Это не изменит стандартное лечение пациента. Кровь будет храниться при 4 ° C на провинциальных станциях EMS и будет периодически собираться. Персонал EMS получит информированное согласие на генетический анализ третьей стороной, принадлежащей к той же генетической линии, что и пациент, или попросит контактный адрес для последующего контакта исследовательской группой.

Лаборатория проведет аликвотирование и генетический анализ. Экстракция ДНК будет выполняться с помощью автоматического экстрактора, а извлеченные образцы ДНК будут секвенированы с использованием 1. Обновленная индивидуальная панель Agilent, включающая известные и проверенные гены заболевания, а также новые гены -кандидаты; 2. Многогленная панель Illumina TrusightCardio, включая все гены, наиболее часто связанные с LQT, CPVT, SQT, BRS, ACM, HCM, RCM, DCM, расопатиями, лизосомальными заболеваниями, другими редкими генотическими заболеваниями сердечно-сосудистых заболеваний, редкими формами аутосомальных рецессионных миопатированных и его знаковых.

В случае варианта P-LP или VUS был идентифицирован, генетическое консультирование и клиническая инструментальная оценка членов семьи первой степени пробанда будет предлагаться на Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo. Все члены семьи будут проверены с помощью электрокардиограммы и эхокардиограммы, а необходимость в выполнении других диагностических тестов будет оценена на основе индивидуальных характеристик и семейного анамнеза каждого пациента. Более того, если в пробанде был выявлен вариант P-LP, членам семьи первой степени будет предложено пройти генетический тест, чтобы проверить, являются ли они носителями того же варианта. Будут собраны все данные, касающиеся терапевтических действий, выполняемых для предотвращения дополнительных внезапных смертей от сердца.

Для каждого пациента данные, касающиеся до госпитальных характеристик OHCA, лечение, клинические и лабораторные данные после резускиции (для выживших пациентов) и выживаемость будут собираться с использованием Lombardiacare. Данные, касающиеся генетического анализа и, что касается членов семьи, будут собираться все данные, касающиеся прошлой истории болезни, а также диагностических и терапевтических процедур. Все эти данные будут поданы с использованием платформы REDCAP® (Research Electronic Data Capture), размещенную на Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, и будут объединены в уникальную базу данных.

Распространенность варианта будет рассчитана как отношение пациентов, у которых обнаружено общее количество пациентов с OHCA и его биномиальным точным 95% доверительным интервалом. Кроме того, различия в распространенности P/LP или VUS у пациентов, стратифицированных для пола, провинции, представленных ритма и других характеристик OHCA. Будет рассчитана разница в выживаемости при прибытии больницы и при выписке между пациентами с потенциальным вариантом P-LP или без них. Наконец, различия в распространенности и выживании в соответствии с уровнем загрязняющих веществ в различных географических областях будут должным образом оценены.