Enkeltdosis AAV-MECP2 Sikkerhed/tolerabilitet og effektivitet i Rett-syndrom

Forskningsbaggrund:

Rett syndrom (RTT) er en medfødt neuroudviklingsforstyrrelse, der hovedsageligt påvirker kvinder. Dens typiske kliniske manifestationer inkluderer ophør eller endda regression af neurale udvikling fra 6-18 måneder efter fødslen, tab af erhvervede færdigheder såsom kognition, sprogfærdighed og håndfunktion, ofte ledsaget af stereotype håndbevægelser, unormale respiratoriske rytmer, anfald og angstlidere. RTT er en sjælden sygdom med en forekomst på ca. 1/10000-15000, hvilket anslås at tage højde for mere end 10% af den kvindelige intellektuelle handicap. Det har en stor indflydelse på patienter og deres familier med alvorlig skade på deres sociale funktion og en meget dårlig livskvalitet.

Cirka 90-95% af typiske RTT-patienter og 40-50% af atypiske RTT-patienter har påvist abnormiteter i methyleringen CpG-bindingsprotein 2 (MECP2), der koder for gen, samt mutationer eller deletioner i MECP2-genet. Human MECP2 -genet er placeret ved XQ28, og dets kodede proteinmethylerede CpG -bindingsprotein 2 er medlem af methyleringsdomænefamilien. Det er en transkriptioninhiberende faktor, der regulerer RNA -splejsning og er en vigtig epigenetisk regulator i hjernen, der påvirker neurale funktion. I dyreforsøg blev det fundet, at MECP2 -mangelfulde mus viste signifikant forbedring af RTT -symptomer efter at have modtaget MECP2 -proteintilskud gennem genteknologi.

I de senere år har succes med genterapi i neuromuskulære sygdomme, såsom spinal muskelatrofi (SMA), vist muligheden for at anvende genterapiteknologi i den menneskelige krop. Siden 2021 har Taysha og Neurogene udført kliniske forsøg med genterapi til Rett -syndrom. I øjeblikket har 2 voksne RTT -patienter og 3 børn afsluttet administrationen og demonstreret en gunstig sikkerhedsprofil. Der har ikke været nogen alvorlige behandlingsrelaterede bivirkninger og ingen rapporter om MECP2-overekspressionstoksicitet eller symptomer.

Professor Qiu Zilong, seniorforsker ved Songjiang Research Institute of Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, har udført langsigtet forskning på RTT. I 2012 blev det opdaget, at MECP2 regulerer neuronal synaptisk homeostase -plasticitet; I 2014 blev det opdaget, at MECP2 regulerer mikroRNA -splejsningsbehandling; Etableret MECP2 transgene krabbe spisende abe dyremodel i 2016; I 2019 blev den neurale mekanisme for MECP2 -mus identificeret, og genredigering af interventionsterapi blev forsøgt; Opret en MECP2 -mutant mus AAV -genterapiteknologiske køreplan i 2022 og ansøg om et opfindelsespatent. Den uafhængigt udviklede AAV-MECP2 forlængede signifikant levetiden for MECP2-knockout-mus i laterale ventrikelinjektionseksperimenter, og den terapeutiske virkning af AAV-MECP2 med CAG-promotor var signifikant bedre end lignende produkter. Sikkerheden og effektiviteten af ​​intratekal administration i abe er testet i 8 måneder, og blodrutine, blodbiokemi og immunfaktorindikatorer har alle vist god sikkerhed.

I sammendraget er RTT en alvorlig neuroudviklingsforstyrrelse, der udgør stor skade på patienterne, og der er i øjeblikket ingen effektiv behandlingsmetode. Det kliniske forsøg, som vores forskere indledte, sigter mod at evaluere sikkerheden, tolerabiliteten og den foreløbige effektivitet af AAV-MECP2 i behandlingen af ​​Rett-syndrom gennem en enkelt intratekal injektion, som har en vigtig medicinsk og social værdi. Sikkerheden og effektiviteten af ​​intratekal administration er testet i 8 måneder, og blodrutine, blodbiokemi og immunfaktorindikatorer har alle vist god sikkerhed.

Forskningsoversigt:

Samlet forskningsdesign:

En multicenter, enkelt arm, enkelt intratekal dosisundersøgelsesundersøgelse af AAV-MECP2 initieret af forskere sigter mod at undersøge to måldoser, med tre forsøgspersoner, der er indskrevet i hver dosis, for at evaluere sikkerheden, tolerabiliteten og den foreløbige effektivitet af enkelt intrathecal injektion af AAV-MECP2 i behandlingen af ​​RTT.

Undersøgelsespopulation:

Børn i alderen 4-10 år, der er blevet diagnosticeret med RTT gennem konsultation på Neurology/Behavioral Development Department of Guangzhou Women and Children’s Medical Center og Child Health Department of Xiamen Children’s Hospital.

Testplacering:

Research Ward of Women and Children’s Medical Center, Guangzhou Medical University

Afslut kriterier midtvejs:

Familiemedlemmer kan stadig trække sig tilbage fra undersøgelsen efter at have fået informeret samtykke.

Kriterier for løsrivelse/ekskludering:

jeg. Patienten skal justere den behandlingsmedicin, der blev anvendt i undersøgelsesperioden;

Ii. Under undersøgelsen kræves brugen af ​​medikamenter/behandlinger, der er forbudt for undersøgelsen: Under undersøgelsen er følgende samtidige medikamenter/behandlinger forbudt:

• Lægemidler, der bruges til behandling af muskelforstyrrelser eller neurodegenerative sygdomme (ekskl. Antiepileptiske lægemidler).
• Et lægemiddel, der bruges til behandling af diabetes.
• Immunosuppressiva (såsom glukokortikoider, cyclosporin, tacrolimus, methotrexat, cyclophosphamid, intravenøs immunoglobulin, rituximab osv.) Blev startet inden for 3 måneder før tilmelding.
• For dem, der ikke har brugt antiepileptiske lægemidler eller rehabiliteringsbehandlingsplaner inden tilmelding, har de brugt antiepileptiske lægemidler eller implementerede rehabiliteringsbehandlingsplaner efter tilmelding.

III. Kan ikke deltage i behandling på hospitalet i en uge i henhold til den etablerede medicinplan; iv. Efter kommunikation og koordinering af tid kan projektvalueringen ikke afsluttes; v. Hvis der opstår nogen bivirkninger, abnormiteter i laboratorie eller andre medicinske tilstande i undersøgelsesperioden, og der træffes passende foranstaltninger, mener forskerne, at fortsat forsøget kan øge risikoen for forsøgspersoner.

Antal deltagere og grupperingsmetode:

Der var 6 deltagere i injektionsgruppen. Seks forsøgspersoner blev indskrevet i forsøget i rækkefølge, hvor en patient afsluttede administrationen og ingen signifikant dosisbegrænsende toksicitet (DLT) observeret i løbet af en måned opfølgning. Det sidstnævnte emne blev indskrevet i forsøgsmedicinen.

DLT-definition: Enhver af følgende begivenheder (klassificeret i henhold til NCI CTCAE V5.0), der forekommer inden for 30 dage efter administration og bestemmes af forskeren som muligvis eller bestemt relateret til AAV-MECP2 (se 4.2 Bivirkningens sværhedsgrad): ≥ Grad 3 Bivirkning; Niveau 3 Laboratorie abnormiteter vedvarer i ≥ 7 dage med nødvendig medicinsk indgriben; Niveau 4 Laboratorie abnormalitet.

Eksperimentelt lægemiddel:

Eksperimentel medicin: AAV-MECP2 ； Aktiv ingrediens: rekombinant AAV-genterapi-vektor indeholdende neuronspecifik promotor (CAG) drevet MECP2; Tilbehør: 4-hydroxyethylpiperazinethanesulfonsyre, kaliumchlorid, natriumchlorid, calciumchlorid, glukose, poloxamer F68 og injektionsvand; Doseringsform: Intratekal injektion; Udseende: Farveløs og gennemsigtig væske; Specifikation: uafhængigt pakket penicillinflaske, med en titer på 2 × 1014 VG/ml og et volumen på 0,5 ml; Administrationsrute: Intratekal injektion; Administrationsfrekvens: 1 gang;

Forskningstrin og metoder:

1. Interventionsmetode: AAV-MECP2, fortyndet med 20 ml fysiologisk saltvand, to efterforskningsdoser (dosis 1, dosis 2, detaljeret nedenfor), enkelt intratekal injektion;

   Lægemiddeldosering:

   Dosisudforskningsreglerne har udviklet sig fra det traditionelle "3+3 design". De to forudindstillede dosisniveauer til denne undersøgelse er: dosis 1 (7 × 1014Vg/person); Dosis 2 (1,5 × 1015vg/person).

   De to forudindstillede dosisniveauer i denne undersøgelse er det indledende dosisniveau i dosis 1 og et højere dosisniveau i dosis 2. Under forskningsprocessen er det muligt at undersøge et dosisniveau under dosis 1 eller en mellemdosis mellem dosis 1 og dosis 2 baseret på akkumulerede sikkerheds- og effektivitetsdata, med forbehold af SRC-godkendelse.

   På dosis 1 -niveau blev tre forsøgspersoner først tilmeldt, og derefter i DLT -observationsperioden blev antallet af forsøgspersoner, der udviklede DLT blandt de tre forsøgspersoner, observeret. Baseret på antallet af personer, der observeres at have DLT, skal du beslutte, om de skal øges til den næste dosisgruppe, opretholde den nuværende dosisgruppe eller falde til en lavere dosisgruppe.

   1. Hvis ingen af ​​de tre forsøgspersoner, der er tilmeldt denne dosis, udvikler DLT, eller kun et individ udvikler DLT, kan dosis øges til en højere dosisgruppe, eller forsøget kan stoppes (når det allerede er dosis 2).
   2. Hvis 2 ud af de 3 forsøgspersoner, der er tilmeldt denne dosis, udvikler DLT, vil administrationen til nye forsøgspersoner blive suspenderet, indtil SRC træffer en beslutning; På dette tidspunkt, efter en omfattende evaluering af de aktuelle sikkerheds- og effektivitetsdata, vil SRC give en af ​​de følgende tre opløsninger: ① Reducer dosis til en lavere dosis og tilmeldt tre vurderbare personer; ② Tilføj 3 yderligere vurderbare personer til den aktuelle dosis; ③ Stop eksperimentet.

   SRC står for Safety Review Committee, der er ansvarlig for at gennemgå sikkerhedsdata for emner, sammensat af forskere og samarbejde med medicinske skærme. Under forskningsprocessen er SRC ansvarlig for at beskytte emners sikkerhed, og dens ansvar er som følger:

   Gennemgå sikkerhedsspørgsmålene for hver deltager; Gennemgå regelmæssigt sikkerhedsdata, mens forsøgspersonerne fortsætter med at modtage undersøgelsesbehandling; Evaluer, om det er nødvendigt at udvide antallet af forsøgspersoner i hvert trin, og om det er muligt at fortsætte til den næste dosisfase, inklusive dosisoptrapning eller dosisreduktion; Hold forskningsdata og resultater fortrolige.

2. Lægemiddelstyring:

For alle modtagne forskningsinterventionsprodukter skal forskeren eller det udpegede personale bekræfte, at passende temperaturforhold opretholdes under transport, og eventuelle uoverensstemmelser er rapporteret og løst, før de bruger forskningsinterventionsprodukterne. Dette forskningsprodukt pakkes i penicillinflasker og transporteres med tøris. Efter modtagelse af det gemmer forskningscenteret det på -75 ± 15 ℃.

Kun tilmeldte forsøgspersoner kan modtage forskningsinterventioner, og kun autoriseret forskningscenter kan eller administrere forskningsinterventioner. Alle forskningsinterventioner skal opbevares i et sikkert, miljømæssigt kontrolleret og overvåges (manuelt eller automatisk) område i henhold til de angivne opbevaringsbetingelser, og kun forskere og autoriserede forskningscenter har adgang til området.

Forskeren eller lægemiddelchefen for forskningscentret tæller og verificerer forskningsinterventionsprodukterne og opretholder relevante poster (dvs. modtagelse og verificering af poster og endelige bortskaffelsesregistre).

Forskningsevaluering:

Forskningsprogrammet og dets tidsplan findes i 'forskningsplan'. Denne tabel viser alle evalueringer og bruger "X" til at repræsentere de evalueringer, der udføres ved hvert besøg. Hvis emnet ikke er i stand til at gå til prøvecentret på grund af særlige grunde, kan emnet eller deres juridiske repræsentant kontakte personalet i prøvecentret på andre alternative midler (såsom telefon eller virtuel video). Detaljer om bivirkninger og samtidige medicin skal indsamles under kommunikation. I denne periode kan deltagerne muligvis ikke deltage i laboratorieundersøgelser og kliniske evalueringer, der er specificeret under undersøgelsesbesøget, men alle relevante oplysninger skal registreres i detaljer. Hvis laboratoriedata for forsøgspersoner indsamles, eller kliniske evalueringer udføres gennem alternative metoder, skal der registreres relevant information i detaljer.

Primære resultatmål: Sikkerhedsindikatorer

1. Demografi/medicinsk historie:

   jeg. Nuværende medicinsk historie: inklusive diagnostisk grundlag, relaterede symptomer, udviklingshistorie, nuværende og tidligere medicin/genvindingsbehandlingsstatus osv.; ii. Historie om andre indre eller kirurgiske sygdomme (især medikamentallergi, rygmarvstraume osv.); III. Abnormiteter i svangerskabsalder og fødsel undersøgelser; iv. Tidligere indlæggelser siden fødslen, herunder varighed af indlæggelse, grunde, modtaget behandling og sygdomsprogression; Hvis det er muligt, skal du give ICD-10-kodningsoplysninger til hver diagnose af hospitalisering; v. Familiehistorie

2. Fysisk undersøgelse:

   jeg. Gennal fysisk undersøgelse inklusive neurologisk undersøgelse skal udføres og registreres ved udpegede besøg, som i det mindste skal omfatte følgende indhold: hoved/hals, øjne, ører, næse/hals, hjerte -kar -system, lunger, mave, muskuloskeletalt system, centralnervesystemet og hud.

   ii. Vituationstegn, højde og vægt: Før man måler vitale tegn, skal emner hvile i et roligt og uforstyrret miljø i mindst 3 minutter og derefter måle i en semi -liggende position, inklusive kropstemperatur, systolisk og diastolisk blodtryk, åndedrætshastighed, puls og blodoxygenmætning.

   III. Efter intratekal injektion af AAV-MECP2, ligger fladt i 6 timer med puden fjernet og måler og registrere blodtryk, respirationshastighed, puls og iltmætning hvert 15. minut (± 5 minutter); Overvåg derefter ovenstående indikatorer hver time (± 15 minutter) indtil 6 timer efter intratekal injektion af AAV-MECP2.

   iv. I løbet af screeningsperioden skal højden måles og måles vægt ved udpegede besøg.

3. Laboratorieundersøgelser ： i. Urinrutine: Specifik tyngdekraft, pH -værdi, glukose, protein, blod, ketonlegemer, bilirubin, urobilinogen, nitrit, leukocytesterase (testpapirmetode), mikroskopisk undersøgelse (hvis blod- eller proteintestresultater er unormale).

   ii. Blodrutine: Røde blodlegemer, hæmoglobin, blodpladetælling, tælling af hvidt blodlegemer og klassificeringstælling, hæmatokrit, gennemsnitlig corpuskulær volumen, gennemsnitlig corpuskulær hæmoglobinkoncentration og reticulocytantal; III. Blodbiokemi: aspartataminotransferase (AST), alaninaminotransferase (ALT), gamma glutamyltransferase (GGT), alkalisk phosphatase (ALP), total bilirubin, direkte bilirubin, total protein, skabelse, uren nitrogen, potassium, sodium, calcium.

   iv. Det myokardiale enzymspektrum: kreatinkinase (CK), kreatinkinase isoenzym (CK-MB), hydroxybutyratdehydrogenase (HBDH), lactatdehydrogenase (LDH) og højfølsomhed troponin I (HSTNI).

   v. Koagulationsfunktionen: aktiveret delvis thromboplastin-tid (APTT), protrombintid (PT), thrombintid (TT), fibrinogen (FG, FIB) og D-Dimer.

   vi. Immunfunktion: Perifer blodlymfocytunderpopulationstælling:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Komplementsystem: Total komplementaktivitet (CH50), C3 -aktivitet og kvantificering, C4 -aktivitet og kvantificering.

   vii. Serumcytokiner inkluderer: TNFa 、 IFN-y 、 IL-10 、 IL-10.

4. Elektrokardiogram (EKG): En konventionel 12 bly -EKG opnås ved hjælp af en EKG -enhed, der automatisk kan beregne hjerterytme og måle PR-, QRS-, QT- og QTC -intervaller.
5. Ekkokardiografi: I løbet af screeningsperioden planlægges en transthoracisk farve ekkokardiografiundersøgelse til at udelukke potentielle hjertelæsioner og hjertedysfunktion. Undersøgelsen blev fortolket og analyseret af ultralydlæger og kardiologer på forskningscentret.
6. Røntgenbillede af bryst: I løbet af screeningsperioden udføres røntgeneksamen i brystet hovedsageligt for at udelukke lungeinfektioner, der ofte forekommer hos patienter. Hvis det er vanskeligt at stille en klar diagnose på almindelig film, med samtykke fra motivets Guardian, kan der udføres en yderligere CT CT -scanning.
7. Hoved MRI: I løbet af screeningsperioden kræves det, at der er behov for en hovedmri -scanning af hovedet for at detektere eventuelle anatomiske abnormiteter eller andre centralnervesystemer, der skal udelukkes. To MR-scanninger af hovedet, der var planlagt i opfølgningsperioden, blev anvendt til at evaluere toksiciteten forbundet med AAV-MECP2-injektion og overvåge udvikling af centralnervesystemet.

Sekundære resultatmål: Effektivitetsevaluering

1. RTT-specifikke kliniske globale indtryk skala sværhedsgrad (CGI-S) og kliniske globale indtryksskalaforbedring (CGI-I);
2. Rett Severity Assessment Questionnaire (RSSS);
3. Rett Syndrome Adfærdsspørgeskema (RSBQ);
4. Revideret vurdering af motorisk adfærd (R-MBA);
5. Rett Syndrome Hand Function Scale (RSHFS);
6. Børns søvnvaner spørgeskema;
7. Rett Parenting Stress -spørgeskema;
8. Griffiths Developmental Rating Scale - Kinesisk version (GDS -C): Kun relativ udviklingsalder bruges som gyldighedsevaluering. Hvis alderen er over 8 år gammel, og evnen er under 6 år gammel, bruges GDS-C-evaluering stadig;
9. Autism Diagnosis Behaviour Observation Scale (ADOS);
10. Adaptiv adfærdsvurderingsskala for børn i alderen 0-6 (anden udgave) - Forældervurderingsformular;
11. Aberrant Behaviour Scale (ABC);

12. Epilepsioptegnelser: Under undersøgelsen blev faglige værger krævet for at registrere forekomsten af ​​anfald, inklusive alle datoer med og uden anfald, herunder præsentation, varighed, frekvens og anfaldsdato. Bær det med dig ved hvert opfølgningsbesøg for forskere for at vurdere hyppigheden og varigheden af ​​epileptiske anfald.

    Hyppigheden af ​​epileptiske anfald defineres ved hjælp af bestilte variabler med fem kategorier: stigning, ingen ændring, 75% remission, 50% remission og ingen anfald.

13. Videobevis: Korte videooptagelser vil blive foretaget af evalueringsprocessen for forsøgspersoner i basislinjeperioden, hospitaliseringsperioden og 1, 3, 6 og 12 måneder efter injektion. Hvis der opstår unormal opførsel på andre tidspunkter, kan forskere også beslutte at tilføje videobevis. Forældre/juridiske værger kan også give hjemmevideoer forbedrede displayfunktioner. Efter at optagelsen er afsluttet, uploader forskerteamet straks videoen til en krypteret computer eller bærbar computer og sletter videofilen fra kameralagringskortet. Enhver video modtaget af den samarbejdsparti vil blive betragtet som fortrolige forskningsdata. Forskningsteamet og partnere er ansvarlige for at beskytte emnerne og deres forældre/værger/værgers identitet i videooptagelsen.
14. Elektroencefalogram (EEG);
15. Bærbart armbånd: Rekord søvnforhold;
16. Vækstdifferentieringsfaktor 11 (GDF11) i cerebrospinalvæske og blod: et udskilt protein af den transformerende vækstfaktor - β (TGF - β) superfamilie, hovedsageligt udtrykt i hjernevæv og negativt regulerende neurogenese under udvikling og voksen alder. Mutationer i GDF11 kan føre til udviklingsmæssige abnormiteter, der involverer craniofacial, rygmarv og nervesystemer. Nylige beviser tyder på, at GDF11 -genet er en af ​​målgenerne reguleret af MECP2: MECP2 nedregulerer ekspressionen af ​​GDF11 ved at inducere histonmethylering af GDF11 -enhancer. Hos RTT -mus faldt ekspressionen af ​​GDF11; Tværtimod, hos MDS -mus, steg ekspressionen af ​​GDF11.

Tidligere undersøgelser har vist, at GDF11 udskilles af hjernevæv og kan påvises i blodet. Derfor vil dette eksperiment undersøge ændringerne i GDF11 -niveauer i blodet før og efter behandling.

Immunogenicitetsvurdering:

In order to evaluate the humoral and cellular immune responses induced by AAV9 capsid after administration, peripheral blood was collected for anti-AAV9 antibody detection (ELISA method), and whole blood was collected for AAV antigen-specific T cell quantitative detection (IFN - γ enzyme-linked immunosorbent assay) on isolated peripheral blood mononuclear cells, IFN-γ Elispot). Immunogene blodprøver blev sendt til udpegede tredjepartslaboratorier til test.

Profylaktisk oral administration af prednisolon:

Administreret oralt 24 timer før behandlingen og opretholdes i henhold til doserings- og tilbagetrækningsregler indtil den 9. uge efter behandlingen.

Næsten alle genterapimedicin, der er anvendt i den menneskelige krop, uanset indgivelsesvejen, har observeret antigenspecifikke T-celle-responser 2-4 uger efter administration. De potentielle negative konsekvenser af denne reaktion er clearance af immunmedierede transducerede celler og tabet af transgen ekspression.

For at lindre kroppens immunrespons på AAV -genterapimedicin, skal forsøgspersoner tage profylaktiske orale kortikosteroider og bruge prednisolon 24 timer før de modtager injektion.

Under brugen af ​​glukokortikoider skal der udføres regelmæssige leverfunktionskontrol for at bestemme, om medicin kan reduceres eller stoppes på grundlag af leverfunktionsindikatorer. Hvis GGT-, AST- eller ALT -værdierne er ≥ 2 × ULN, er forskere nødt til at tilvejebringe tilsvarende behandling baseret på emners individuelle situation. Baseret på tidligere klinisk erfaring med AAV-stofbrug er den højrisikoperiode for leverenzym rebound inden for 2 uger efter hormonreduktion eller seponering. Derfor skal leverfunktionsovervågning styrkes på dette trin. Til ovennævnte prednisolonbrugs- og reduktionsplan kan forskere foretage personaliserede justeringer baseret på sikkerhedsvurderingen af ​​forsøgspersoner. Foruden leverfunktion kan overvågning af resultaterne af perifere blodantigenspecifikke T-celler også være nødvendigt at overveje, og andre immunsuppressive midler kan tilføjes om nødvendigt. Hvis de anvendte glukokortikoider er andre præparater end prednisolon, skal doserings- og tilbagetrækningsplanen formuleres baseret på den ækvivalente dosis af prednisolon efter konvertering.

Informeret samtykke:

Børn under 8 år, der deltager i kliniske forsøg, bør opnå en underskrevet informeret samtykkeformular fra deres værge og bør informeres om relevant information om det kliniske forsøg inden for det omfang, som emnerne kan forstå. Når barnet har evnen til at tage en beslutning om at acceptere at deltage i det kliniske forsøg, bør deres eget samtykke også opnås; Børn over 8 år (inklusive 8 år gamle), der deltager i kliniske forsøg, hvis de har evnen til at underskrive den informerede samtykkeformular, bør både sig selv og deres værger underskrive den informerede samtykkeformular. Hvis de ikke har evnen til at underskrive den informerede samtykkeformular, skal deres værger underskrive formularen informeret samtykke.

Bivirkninger og andre behandlinger end samtidig:

Medicin/lægemidler, der opstår fra underskrivelsen af ​​den informerede samtykkeformular, indtil den første administration skal registreres som medicinsk historie/komorbiditet og behandlingshistorie i ECRF, og skal ikke registreres på AE -siden og samtidig medicin/behandlingsside; Medmindre skaden/skaden er forårsaget af kliniske laboratorieundersøgelsesprocedurer, skal den registreres som en AE på AE -siden, og for andre behandlinger af andre behandlinger end samtidig medicin/lægemidler til denne AE, skal de registreres på den samtidige medicin/behandlingsside i overensstemmelse hermed.

Den specifikke tekniske rute er detaljeret i forskningsplanen.

Forventede bivirkninger og behandlingsmetoder:

Risikoen forbundet med deltagere i denne undersøgelse inkluderer hovedsageligt risici relateret til lægemiddeladministrationsprocedurer (kappe-punktering), risici relateret til undersøgelsesmedicinen AAV-MECP2 og risici relateret til profylaktisk immunsuppression.

Risici forbundet med punktering af injektionsinjektion:

1) Punktering af hylsterinjektion betragtes generelt som sikker, og de valgte forsøgspersoner vil gennemgå en hovedmagnetisk resonansafbildning (MRI) -scanning før lumbale punktering for at udelukke muligheden for intrakranielt rumoptagelse af læsioner (især i den bageste fossa) eller øget intrakranielt tryk. De mulige risici ved punktering af lumbale inkluderer følgende: i. Hovedpine efter lumbale punktering: Patienter, der gennemgår lumbale punkteringsoplevelse Hovedpine på grund af væskeinfiltration i det nærliggende væv efter punktering. Hovedpine starter normalt inden for få timer til to dage efter operationen og kan ledsages af kvalme, opkast og svimmelhed. Hovedpine forekommer normalt under siddende eller stående, og kan lettes, når de ligger ned. Hovedpine efter lumbale punktering kan vare i flere timer til en uge eller længere.

ii. Ubehag eller smerter i ryggen: Der kan være smerter eller ømhed i korsryggen. Smerten kan sprede sig på bagsiden af ​​benet.

III. Blødning: blødning i nærheden af ​​punkteringsstedet, eller i sjældne tilfælde kan det forekomme i det epidurale rum.

Administrationen af ​​medikamenter i denne undersøgelse blev udført af kvalificerede læger i hospitalets behandlingsrum. Før injektion blev injektionsområdet desinficeret og dækket med klud. Efter injektion blev der udført desinfektion og komprimeringshemostase, og patienten blev sengeliggende i 6 timer med puden fjernet. Efter operationen overvåges forsøgspersonerne nøje for at sikre, at eventuelle komplikationer opdages og behandles rettidigt.

Risici forbundet med AAV-MECP2:

Emnet kan opleve allergiske reaktioner på AAV-MECP2. På grund af immunresponsen induceret ved intratekal injektion af AAV er forsøgspersoner normalt ikke i stand til at modtage andre genterapier leveret af AAV -vektorer af den samme serotype.

På nuværende tidspunkt er der tre kliniske forsøg (NCT05317780, NCT05419492 og NCT04833970) registreret på ClinicalTrials.gov Hjemmeside til administration af AAV -lægemidler til den laterale ventrikel til sygdomme i centralnervesystemet, men kliniske sikkerheds- eller effektivitetskliniske data er endnu ikke blevet afsløret. AVXS-101 er den intratekale version af SMA-genterapien Zolgensma. En fase 1-dosis-eskaleringsundersøgelse udført hos personer i alderen 6-60 måneder viste, at AVXS-101 var sikker og godt tolereret, når de blev administreret intratecalt ved en maksimal dosis på 2,4 × 1014 VG/person, med kun et emne, der oplevede forhøjede transaminase-niveauer uden forhøjet bilirubin; Et individ oplevede thrombocytopeni (tælling under 75 × 109/L), som løste spontant uden indgriben.

Følgende opsummerer de alvorlige bivirkninger (begivenheder) rapporteret i AAV -lægemidler, der er markedsført eller i kliniske forsøg:

1. Hepatotoksicitet. Rapporteret om intravenøs injektion af AAV-lægemidler til behandling af SMA, Duchenne muskeldystrofi (DMD) og X-bundet myopati (XLMTM). Forekomsten af ​​hepatotoksicitet er signifikant korreleret med doseringen af ​​det indgivne lægemiddel, og alvorlige tilfælde af hepatotoksicitet ses kun hos personer, der modtager AAV -doser> 5 × 1013VG. Bortset fra levertoksiciteten i XLMTM, som anses for at være relateret til patientens underliggende leversygdom, anses den offentliggjorte mekanisme for andre levertoksicitetssager som levercelleskade medieret af CD8+T -celler, der er målrettet mod AAV.
2. Trombotisk mikrovaskulær sygdom. Rapporteret i behandlingen af ​​SMA og DMD med intravenøs injektion af AAV-lægemidler, forekomsten af ​​denne begivenhed er også dosisafhængig, og alle tilfælde var forsøgspersoner, der modtog AAV-doser ≥ 5 × 1013VG. På grund af tilstedeværelsen af ​​laboratoriebevis for komplementaktivering i mange af disse tilfælde betragtes det som, at deres forekomst er relateret til aktiveringen af ​​komplementsystemet med antigenantistofkomplekser, der er målrettet mod AAV.
3. Myocarditis og myositis. Kun rapporteret om intravenøs injektion af AAV -lægemidler i DMD. Baseret på det specifikke DMD -genmutationsmønster, begyndelsestid og respons på immunsuppressiv terapi, der er til stede i sagen, spekuleres det i, at essensen af ​​sådanne giftige begivenheder er kroppens immunrespons på det genetisk modificerede produkt "mini -anti -muskelatrofiprotein".
4. Dorsal rod ganglion (DRG) toksicitet. Toksiciteten af ​​DRG med kliniske manifestationer (unormal hånd- og fodsensation) er kun rapporteret hos en patient med familiær lateral sklerose (ALS). Denne sag modtog en intratekal dosis på 4,2 × 1014 VG af AAV -lægemiddel. Toksiciteten af ​​DRG, der blev rapporteret i andre undersøgelser, blev ved et uheld opdaget under obduktionen af ​​AAV -medikamenter, og forsøgspersonerne havde ingen relevante kliniske manifestationer før deres død.
5. Unormal hjerne MR -signaler. Der blev rapporteret om et klinisk forsøg på behandling af sen infantil batten sygdom (CLN2 -sygdom) ved bilateral hjerneparenchymal injektion af AAV -lægemidler under stereotaksisk lokalisering. Inden for 48 timer efter injektion viste motivets hovedhjerne MR MR-hyperintensiteter, diffusionsvægtede hyperintensiteter og diffusionsbegrænsede signaler lokaliseret til injektionsstedet. Efterfølgende MR-opfølgning viste, at alle forsøgspersoner udviklede nye T2-højsignalområder. Forskerne fandt ingen kliniske følger forbundet med unormale MR -signaler. Det spekuleres i, at de unormale MR -signaler, der vises tidligt efter administration, er relateret til det vedvarende vævsødem/betændelse forårsaget af den højeste koncentration af AAV -lægemidler omkring injektionskateterspidsen, mens T2 -høje signaler, der vises senere, er vanskelige at bestemme, om de er relateret til sygdomsprogression, AAV -lægemidler eller injektionsprocedurer.

Undersøgelser af patientprøver (1 år efter administration) og ikke-menneskelige primater (1 måned efter injektion) har vist, at sandsynligheden for AAV-integration i genomet er lav. Baseret på sikkerhedsrekorden for AAV i kliniske forsøg er den aktuelle konsensus inden for genterapi, at AAV har lav genetisk toksicitet hos mennesker.

Foreløbige prækliniske sikkerhedsevalueringer af AAV-MECP2 i humaniserede RTT-mus og krabbe spisning af macaques viste, at AAV-MECP2 ikke forårsagede lever- eller nyrefunktionsskade, nerveskade, immuntoksicitet eller histopatologiske ændringer i vigtige organer i dyr, og dyrens generelle tilstand var god. Derfor indikerer de eksisterende data fra AAV-MECP2 ikke klare kliniske risici. Den mest almindelige bivirkning, der forventes for forsøgspersoner, der modtager AAV-MECP2, kan være grad 1/2 højde af leverenzymer.

Risici forbundet med forebyggende immunsuppression:

Denne protokol bestemmer, at start fra en dag før AAV-MECP2-administration, oral administration af 1 mg/kg prednisolon eller tilsvarende dosis af andre glukokortikoider skal startes, og doseringen skal opretholdes i mindst 30 dage, før de langsomt reduceres. Formålet med at bruge glukokortikoider er at undertrykke de medfødte og erhvervede immunresponser induceret af AAV -vektorer og reducere immunreaktioner, der er skadelige for sikkerhed og effektivitet. Når man bruger hormoner, overvåges bivirkninger relateret til hormoner, inklusive opportunistiske infektioner, hos forsøgspersoner.

Kortikosteroider (såsom methylprednisolon og prednison) har adskillige klare bivirkninger, herunder hypertension, takykardi, kongestiv hjertesvigt, ændringer i serumelektrolytter, hyperglycæmi, smerter, forhøjet urinstofnitrogen og kreatinin, osteoporose og ischemisk nekrose, nedsat anti -infektion, glitrogen, træmor, rensemæss Ustabilitet, søvnløshed, kvalme, opkast, vægtøgning, forhøjet intraokulært tryk og induktion af grå stær.

Under brugen af ​​hormoner vil forskere nøje overvåge de ovennævnte bivirkninger, især opportunistiske infektioner, der kan forekomme i forsøgspersoner.

Statistisk analyse Denne undersøgelse er en tidlig dosisundersøgelsesundersøgelse med hovedmålet med at evaluere sikkerhed, derfor blev der ikke udført nogen formel beregning af prøvestørrelse.

Sikkerheden og tolerabiliteten af ​​behandlingen evalueres baseret på hyppigheden og sværhedsgraden af ​​bivirkninger, der forekommer inden for et år efter administration. Andelen af ​​emner med enhver AE, enhver SAE, enhver AE relateret til undersøgelsesmedicinen og enhver ≥ grad 3 AE vil blive statistisk analyseret som en helhed og af System Organ Classes (SOC) og foretrukne udtryk (PT). Forekomsten af ​​bivirkninger i forskellige dosiskohorter vil også blive statistisk analyseret separat.

På grund af den lille prøvestørrelse og muligheden for forskellige effektivitetsindikatorer blandt individer på forskellige sygdomsstadier er alle effektivitetsanalyser i denne undersøgelse beskrivende og involverer ikke inferentielle statistikker.