Sicurezza/tollerabilità AAV-MECP2 monodose ed efficacia nella sindrome di Rett

Background di ricerca:

La sindrome Rett (RTT) è un disturbo neurologico congenito che colpisce principalmente le donne. Le sue tipiche manifestazioni cliniche comprendono la cessazione o la regressione dello sviluppo neurale da 6-18 mesi dopo la nascita, la perdita di abilità acquisite come cognizione, capacità linguistica e funzione della mano, spesso accompagnate da movimenti stereotipati delle mani, ritmi respiratori anormali, convulsioni e disturbi d'ansia. RTT è una malattia rara con un tasso di incidenza di circa 1/10000-15000, che si stima rappresenti oltre il 10% della disabilità intellettuale femminile. Ha un grande impatto sui pazienti e sulle loro famiglie, con gravi danni al loro funzionamento sociale e una scarsa qualità della vita.

Circa il 90-95% dei tipici pazienti con RTT e il 40-50% dei pazienti con RTT atipici hanno rilevato anomalie nel gene legante la proteina 2 (MECP2) che codificano la metilazione, nonché mutazioni o delezioni nel gene MECP2. Il gene MECP2 umano si trova a XQ28 e la sua proteina 2lata di CPG con metilata di proteina codificata è un membro della famiglia del dominio della metilazione. È un fattore inibitorio della trascrizione che regola la giunzione dell'RNA ed è un regolatore epigenetico chiave nel cervello, influenzando la funzione neurale. Negli esperimenti sugli animali, è stato riscontrato che i topi carenti di MECP2 hanno mostrato un significativo miglioramento dei sintomi di RTT dopo aver ricevuto l'integrazione di proteine ​​MECP2 attraverso la tecnologia di ingegneria genetica.

Negli ultimi anni, il successo della terapia genica nelle malattie neuromuscolari come l'atrofia muscolare spinale (SMA) ha dimostrato la fattibilità dell'applicazione della tecnologia della terapia genica nel corpo umano. Dal 2021, Taysha e Neurogene hanno condotto studi clinici sulla terapia genica per la sindrome rett. Attualmente, 2 pazienti con RTT per adulti e 3 bambini hanno completato la somministrazione, dimostrando un profilo di sicurezza favorevole. Non ci sono stati seri eventi avversi legati al trattamento e nessun segnalazione di tossicità o sintomi di sovraespressione di MECP2.

Il professor Qiu Zilong, ricercatore senior presso il Songjiang Research Institute della Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, ha condotto ricerche a lungo termine su RTT. Nel 2012, è stato scoperto che MECP2 regola la plasticità dell'omeostasi sinaptica neuronale; Nel 2014, è stato scoperto che MECP2 regola l'elaborazione di giunzione di MicroRNA; Modello animale per animali per alimentazione transgenica di granchio transgenico MECP2 nel 2016; Nel 2019 è stato identificato il meccanismo neurale dei topi MECP2 ed è stata tentata la terapia di intervento di editing genico; Stabilire una tabella di marcia della tecnologia del gene AAV Mutant Mutant Mutant Mutant nel 2022 e richiedere un brevetto di invenzione. L'AAV-MECP2 sviluppato in modo indipendente ha prolungato significativamente la durata della vita dei topi knockout MECP2 negli esperimenti di iniezione di ventricolo laterale e l'effetto terapeutico di AAV-MECP2 con il promotore CAG era significativamente migliore di prodotti simili. La sicurezza e l'efficacia della somministrazione intratecale in scimmia sono state testate per 8 mesi e la routine del sangue, la biochimica del sangue e gli indicatori del fattore immunitario hanno mostrato una buona sicurezza.

In sintesi, RTT è un grave disturbo da sviluppo neurologico che pone gravi danni ai pazienti e attualmente non esiste un metodo di trattamento efficace. La sperimentazione clinica iniziata dai nostri ricercatori mira a valutare la sicurezza, la tollerabilità e l'efficacia preliminare di AAV-MECP2 nel trattamento della sindrome rett attraverso un'unica iniezione intratecale, che ha un importante valore medico e sociale. La sicurezza e l'efficacia della somministrazione intratecale sono state testate per 8 mesi e la routine del sangue, la biochimica del sangue e gli indicatori del fattore immunitario hanno mostrato una buona sicurezza.

Panoramica della ricerca:

Progetto di ricerca generale:

Uno studio multicentrico, singolo a braccio singolo, a dose intratecale singola di AAV-MECP2 avviata dai ricercatori mira a esplorare due dosi target, con tre soggetti iscritti ad ogni dose, per valutare la sicurezza, la tollerabilità e l'efficacia preliminare della singola iniezione intratecale di AAV-MECP2 nel trattamento di RTT.

Popolazione di studio:

I bambini di età compresa tra 4-10 anni a cui sono stati diagnosticati RTT attraverso la consultazione presso il dipartimento di sviluppo neurologia/comportamento del centro medico di Guangzhou e del Centro medico per bambini e del dipartimento per la salute dei bambini dell'ospedale pediatrico di Xiamen.

Posizione del test:

Research Ward of Women and Children's Medical Center, Guangzhou Medical University

Criteri di uscita a metà strada:

I familiari possono ancora ritirarsi dallo studio dopo aver ottenuto il consenso informato.

Criteri per il distacco/esclusione:

io. Il paziente deve regolare i farmaci per il trattamento utilizzati durante il periodo di studio;

Ii. Durante lo studio, è richiesto l'uso di farmaci/trattamenti che sono vietati dallo studio: durante lo studio, sono vietati i seguenti farmaci/trattamenti concomitanti:

• Farmaci usati per trattare i disturbi muscolari o le malattie neurodegenerative (esclusi i farmaci antiepilettici).
• Un farmaco usato per trattare il diabete.
• Gli immunosoppressori (come glucocorticoidi, ciclosporina, tacrolimus, metotrexato, ciclofosfamide, immunoglobulina endovenosa, rituximab, ecc.) Sono stati avviati entro 3 mesi prima dell'iscrizione.
• Per coloro che non hanno usato farmaci antiepilettici o piani di trattamento della riabilitazione prima dell'iscrizione, hanno usato farmaci antiepilettici o implementato piani di trattamento della riabilitazione dopo l'iscrizione.

iii. Incapace di partecipare a cure in ospedale per una settimana secondo il piano farmacologico stabilito; iv. Dopo la comunicazione e il coordinamento del tempo, la valutazione del progetto non può essere completata; v. Se durante il periodo di studio si verificano eventi avversi, anomalie di laboratorio o altre condizioni mediche e vengono adottate misure appropriate, i ricercatori ritengono che continuare il processo possa aumentare il rischio per i soggetti.

Numero di partecipanti e metodo di raggruppamento:

C'erano 6 partecipanti al gruppo di iniezione. Sei soggetti sono stati iscritti allo studio in sequenza, con un paziente che ha completato la somministrazione e nessuna tossicità di limitazione della dose significativa (DLT) osservata durante un follow-up di un mese. Quest'ultimo soggetto è stato iscritto al farmaco di prova.

Definizione DLT: uno dei seguenti eventi (classificati secondo NCI CTCAE V5.0) che si verificano entro 30 giorni dalla somministrazione e sono determinati dal ricercatore per essere eventualmente o decisamente correlati a AAV-MECP2 (vedere 4,2 Evento avverso Gravità): ≥ Evento avverso di grado 3; Le anomalie di laboratorio di livello 3 persistono per ≥ 7 giorni con l'intervento medico necessario; Anomalia di laboratorio di livello 4.

Droga sperimentale:

Farmaci sperimentali: AAV-MECP2 ； Ingrediente attivo: vettore di terapia del gene AAV ricombinante contenente MECP2 guidato dal promotore specifico per neuroni (CAG); Accessori: acido etanosolfonico 4-idrossietilpiperazina, cloruro di potassio, cloruro di sodio, cloruro di calcio, glucosio, poloxamer F68 e acqua di iniezione; Forma di dosaggio: iniezione intratecale; Aspetto: liquido incolore e trasparente; Specifica: bottiglia di penicillina in confezione indipendente, con un titolo di 2 × 1014 Vg/mL e un volume di 0,5 ml; Percorso di somministrazione: iniezione intratecale; Frequenza amministrativa: 1 volta;

Passaggi e metodi di ricerca:

1. Metodo di intervento: AAV-MECP2, diluito con soluzione salina fisiologica a 20 ml, due dosi esplorative (dose 1, dose 2, dettagliata di seguito), iniezione intratecale singola;

   Dosaggio del farmaco:

   Le regole di esplorazione della dose si sono evolute dal tradizionale "3+3 design". I due livelli di dose pre-set per questo studio sono: dose 1 (7 × 1014vg/persona); Dose 2 (1,5 × 1015vg/persona).

   I due livelli di dose pre-set in questo studio sono il livello di dose iniziale di dose 1 e un livello di dose più elevato di dose 2. Durante il processo di ricerca, è possibile esplorare un livello di dose inferiore alla dose 1 o una dose intermedia tra dose 1 e dose 2 in base ai dati di sicurezza e di efficacia accumulati, soggetto all'approvazione SRC.

   A livello di dose 1, tre soggetti sono stati arruolati per primi e poi durante il periodo di osservazione DLT, è stato osservato il numero di soggetti che hanno sviluppato DLT tra i tre soggetti. Sulla base del numero di soggetti osservati per avere DLT, decidere se aumentare il gruppo di dose successivo, mantenere l'attuale gruppo di dose o diminuire a un gruppo di dose inferiore.

   1. Se nessuno dei tre soggetti iscritti a questa dose sviluppa DLT o solo un soggetto sviluppa DLT, la dose può essere aumentata a un gruppo di dose più elevato o la prova può essere arrestata (quando è già dose 2).
   2. Se 2 dei 3 soggetti iscritti a questa dose sviluppano DLT, l'amministrazione a nuovi argomenti verrà sospesa fino a quando SRC non prende una decisione; A questo punto, dopo una valutazione completa degli attuali dati sulla sicurezza e l'efficacia, SRC fornirà una delle seguenti tre risoluzioni: ① Ridurre la dose a una dose più bassa e iscrivere tre soggetti valutabili; ② Aggiungi 3 soggetti valutabili aggiuntivi alla dose corrente; ③ fermare l'esperimento.

   SRC sta per il comitato di revisione della sicurezza, responsabile della revisione dei dati di sicurezza delle materie, composte da ricercatori e di collaborare ai monitor medici. Durante il processo di ricerca, SRC è responsabile della protezione della sicurezza dei soggetti e le sue responsabilità sono le seguenti:

   Rivedere i problemi di sicurezza di ciascun partecipante; Rivedere regolarmente i dati di sicurezza mentre i soggetti continuano a ricevere un trattamento dello studio; Valutare se è necessario espandere il numero di soggetti in ogni fase e se è possibile procedere alla fase di dose successiva, inclusa l'escalation della dose o la riduzione della dose; Mantieni riservati i dati e i risultati della ricerca.

2. Gestione dei farmaci:

Per tutti i prodotti di intervento di ricerca ricevuti, il ricercatore o il personale designato devono confermare che durante il trasporto vengono mantenute e risolte condizioni di temperatura appropriate e che siano state riportate e risolte eventuali incoerenze prima di utilizzare i prodotti di intervento di ricerca. Questo prodotto di ricerca è confezionato in bottiglie di penicillina e trasportato da ghiaccio secco. Dopo averlo ricevuto, il centro di ricerca lo memorizza a -75 ± 15 ℃.

Solo i soggetti iscritti possono ricevere interventi di ricerca e solo il personale del centro di ricerca autorizzato può fornire o amministrare interventi di ricerca. Tutti gli interventi di ricerca devono essere conservati in un'area sicura, controllata dall'ambiente e monitorata (manualmente o automaticamente) in base alle condizioni di stoccaggio indicate e solo i ricercatori e il personale autorizzato del Centro di ricerca hanno accesso all'area.

Il ricercatore o il direttore della droga del Centro di ricerca conta e verifica i prodotti di intervento di ricerca e mantengono registri pertinenti (ad es. ricevere e verificare i record e i registri di smaltimento finale).

Valutazione della ricerca:

Il programma di ricerca e il suo programma sono disponibili nel "programma di ricerca". Questa tabella elenca tutte le valutazioni e utilizza "X" per rappresentare le valutazioni eseguite ad ogni visita. Se l'argomento non è in grado di andare al centro di prova per motivi speciali, l'argomento o il loro rappresentante legale possono contattare il personale del centro di prova con altri mezzi alternativi (come il telefono o il video virtuale). I dettagli degli eventi avversi e dei farmaci concomitanti devono essere raccolti durante la comunicazione. Durante questo periodo, i partecipanti potrebbero non essere in grado di partecipare ai test di laboratorio e alle valutazioni cliniche specificate durante la visita allo studio, ma tutte le informazioni pertinenti dovrebbero essere registrate in dettaglio. Se vengono raccolti i dati di laboratorio dei soggetti o vengono condotte valutazioni cliniche attraverso metodi alternativi, le informazioni pertinenti dovrebbero essere registrate in dettaglio.

Misure di esito primario: indicatori di sicurezza

1. Demografia/Storia medica:

   io. Storia medica attuale: compresa la base diagnostica, i sintomi correlati, la storia dello sviluppo, lo stato di trattamento di farmaci/recupero attuali e passati, ecc.; ii. Storia di altre malattie interne o chirurgiche (in particolare allergie farmacologiche, traumi spinali, ecc.); iii. Anomalie nell'età gestazionale e esami prenatali; iv. Precedenti ricoveri dalla nascita, tra cui la durata del ricovero in ospedale, le ragioni, il trattamento ricevuto e la progressione della malattia; Se possibile, fornire informazioni sulla codifica ICD-10 per ciascuna diagnosi di ricovero; v. Storia familiare

2. Esame fisico:

   io. L'esame fisico genernale, incluso l'esame neurologico, deve essere eseguito e registrato durante le visite designate, che dovrebbero includere almeno i seguenti contenuti: testa/collo, occhi, orecchie, naso/gola, sistema cardiovascolare, polmoni, addome, sistema muscoloscheletrico, sistema nervoso centrale e pelle.

   ii. Segni vitali, altezza e peso: prima di misurare i segni vitali, i soggetti dovrebbero riposare in un ambiente silenzioso e indisturbato per almeno 3 minuti e quindi misurare in una posizione semi supina, tra cui temperatura corporea, pressione arteriosa sistolica e diastolica, velocità respiratoria, impulso e saturazione di ossigeno nel sangue.

   iii. Dopo iniezione intratecale di AAV-MECP2, si trova piatto per 6 ore con il cuscino rimosso e misura e registra la pressione sanguigna, la frequenza respiratoria, il polso e la saturazione di ossigeno ogni 15 minuti (± 5 minuti); Successivamente, monitorare gli indicatori di cui sopra ogni ora (± 15 minuti) fino a 6 ore dopo l'iniezione intratecale di AAV-MECP2.

   iv. Durante il periodo di screening, l'altezza deve essere misurata e misurata il peso durante le visite designate.

3. Indagini di laboratorio ： i. Routine delle urine: gravità specifica, valore del pH, glucosio, proteina, sangue, corpi chetonici, bilirubina, urobilinogeno, nitrito, leucociti esterasi (metodo della carta di prova), esame microscopico (se i risultati del test del sangue o delle proteine ​​sono anormali).

   ii. Routine del sangue: conta dei globuli rossi, emoglobina, conta piastrinica, conta dei globuli bianchi e conta della classificazione, ematocrito, volume corpuscolare medio, concentrazione media di emoglobina corpuscolare e conta dei reticolociti; iii. Biochimica del sangue: aspartato aminotransferasi (AST), alanina aminotransferasi (ALT), gamma glutamil transferasi (GGT), fosfatasi alcalina (ALP), bilirubina totale, bilirubina diretta, proteina totale, creatinina, nitrogeno urea, potassio, sodo e calcio.

   iv. Lo spettro enzimatico miocardico: creatina chinasi (CK), isoenzima di creatina chinasi (CK-MB), idrossibutirrato deidrogenasi (HBDH), lattato deidrogenasi (LDH) e troponina ad alta sensibilità (HSTNI).

   v. La funzione di coagulazione: tempo di tromboplastina parziale attivata (APTT), tempo di protrombina (PT), tempo di trombina (TT), fibrinogeno (FG, FIB) e d-dimero.

   vi. Funzione immunitaria: conteggio della sottopopolazione dei linfociti del sangue periferico:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Sistema di complemento: attività totale del complemento (CH50), attività C3 e quantificazione, attività C4 e quantificazione.

   vii. Le citochine sieriche includono: TNFα 、 IFN-γ 、 IL-10 、 IL-10.

4. Electrocardiogramma (ECG): un ECG a 12 lead convenzionale si ottiene utilizzando un dispositivo ECG in grado di calcolare automaticamente la frequenza cardiaca e misurare gli intervalli di PR, QRS, QT e QTC.
5. Ecocardiografia: durante il periodo di screening, sarà programmato un esame di ecocardiografia a colori transtoracici per escludere potenziali lesioni cardiache e disfunzione cardiaca. L'esame è stato interpretato e analizzato da medici e cardiologi ad ultrasuoni presso il Centro di ricerca.
6. RAY del torace: durante il periodo di screening, viene condotto principalmente l'esame a raggi X per escludere le infezioni polmonari che si verificano frequentemente nei pazienti. Se è difficile fare una chiara diagnosi su un film semplice, con il consenso del tutore del soggetto, è possibile eseguire un'ulteriore scansione della TC toracica.
7. MRI head: durante il periodo di screening, è necessaria una scansione semplice della risonanza magnetica per rilevare eventuali anomalie anatomiche o altre lesioni del sistema nervoso centrale che devono essere escluse. Due scansioni di risonanza magnetica previste durante il periodo di follow-up sono state utilizzate per valutare la tossicità associata all'iniezione AAV-MECP2 e monitorare lo sviluppo del sistema nervoso centrale.

Misure di esito secondario: valutazione dell'efficacia

1. RTT Specifiche cliniche Global Impressioni Scale La gravità (CGI) e le impressioni globali cliniche Scale Improvement (CGI-I);
2. Questionario sulla valutazione della gravità rett (RSSS);
3. Questionario sul comportamento della sindrome Rett (RSBQ);
4. Valutazione del comportamento motorio rivisto (R-MBA);
5. Scala delle funzioni manuali della sindrome Rett (RSHFS);
6. Questionario per le abitudini del sonno dei bambini;
7. Questionario sullo stress genitoriale retto;
8. Scala di valutazione dello sviluppo Griffiths - versione cinese (GDS -C): viene utilizzata solo l'età di sviluppo relativa come valutazione della validità. Se l'età ha più di 8 anni e l'abilità ha meno di 6 anni, viene ancora utilizzata la valutazione GDS-C;
9. Diagnosi dell'autismo Scala di osservazione del comportamento (ADOS);
10. Scala di valutazione del comportamento adattivo per bambini di età compresa tra 0 e 6 (seconda edizione) - Modulo di valutazione dei genitori;
11. Scala del comportamento aberrante (ABC);

12. Registri dell'epilessia: durante lo studio, i tutori in materia dovevano registrare il verificarsi di convulsioni, comprese tutte le date con e senza convulsioni, tra cui la presentazione, la durata, la frequenza e la data delle convulsioni. Portalo con te ad ogni visita di follow-up per i ricercatori per valutare la frequenza e la durata delle convulsioni epilettiche.

    La frequenza delle convulsioni epilettiche verrà definita utilizzando variabili ordinate con cinque categorie: aumento, nessuna variazione, remissione del 75%, remissione del 50% e senza crisi.

13. Prove video: verranno effettuate brevi registrazioni video del processo di valutazione dei soggetti durante il periodo di base, del periodo di ricovero in ospedale ai farmaci e 1, 3, 6 e 12 mesi dopo l'iniezione. Se si verifica un comportamento anormale in altri tempi, i ricercatori possono anche decidere di aggiungere prove video. I genitori/tutori legali possono anche fornire video a casa con funzioni di visualizzazione migliorate. Dopo il completamento della registrazione, il team di ricerca caricherà immediatamente il video su un computer o un laptop crittografato ed elimina il file video dalla scheda di archiviazione della fotocamera. Qualsiasi video ricevuto dalla parte cooperante sarà considerato dati di ricerca riservati. Il team di ricerca e i partner saranno responsabili della protezione delle informazioni di identità delle materie e dei loro genitori/tutori nella registrazione video.
14. Elettroencefalogramma (EEG);
15. Weardable Wristband: Record Sleep Conditions;
16. Fattore di differenziazione della crescita 11 (GDF11) nel liquido e nel sangue cerebrospinale: una proteina secreta della superfamiglia del fattore di crescita trasformante - β (TGF - β), espressa principalmente nel tessuto cerebrale e regolare negativamente la neurogenesi durante lo sviluppo e l'età adulta. Le mutazioni nel GDF11 possono portare a anomalie dello sviluppo che coinvolgono il sistema craniofacciale, spinale e nervoso. Prove recenti suggeriscono che il gene GDF11 è uno dei geni target regolati da MECP2: MECP2 riduce l'espressione di GDF11 inducendo la metilazione dell'istone del potenziatore GDF11. Nei topi RTT, l'espressione di GDF11 è diminuita; Al contrario, nei topi MDS, l'espressione di GDF11 è aumentata.

Precedenti studi hanno dimostrato che GDF11 è secreto dal tessuto cerebrale e può essere rilevato nel sangue. Pertanto, questo esperimento esplorerà i cambiamenti nei livelli di GDF11 nel sangue prima e dopo il trattamento.

Valutazione dell'immunogenicità:

In order to evaluate the humoral and cellular immune responses induced by AAV9 capsid after administration, peripheral blood was collected for anti-AAV9 antibody detection (ELISA method), and whole blood was collected for AAV antigen-specific T cell quantitative detection (IFN - γ enzyme-linked immunosorbent assay) on isolated peripheral blood mononuclear cells, IFN-γ Elispot). I campioni di sangue immunogenico sono stati inviati a laboratori di terze parti designati per i test.

Somministrazione orale profilattica di prednisolone:

Somministrato per via orale 24 ore prima del trattamento e mantenuto in base alle regole di dosaggio e di ritiro fino alla nona settimana dopo il trattamento.

Quasi tutti i farmaci di terapia genica usati nel corpo umano, indipendentemente dalla via di somministrazione, hanno osservato risposte delle cellule T specifiche dell'antigene 2-4 settimane dopo la somministrazione. Le potenziali conseguenze avverse di questa reazione sono la clearance delle cellule trasdotte immuno-mediate e la perdita di espressione transgenica.

Al fine di alleviare la risposta immunitaria del corpo ai farmaci di terapia genica AAV, i soggetti devono assumere corticosteroidi orali profilattici e utilizzare il prednisolone 24 ore prima di ricevere iniezione.

Durante l'uso di glucocorticoidi, devono essere condotti regolari controlli della funzione epatica per determinare se i farmaci possono essere ridotti o arrestati in base agli indicatori di funzionalità epatica. Se i valori GGT, AST o ALT sono ≥ 2 × ULN, i ricercatori devono fornire un trattamento corrispondente in base alla situazione individuale dei soggetti. Sulla base della precedente esperienza clinica con l'uso di droghe AAV, il periodo ad alto rischio per il rimbalzo degli enzimi epatici è entro 2 settimane dalla riduzione o dalla sospensione ormonale. Pertanto, il monitoraggio della funzione epatica dovrebbe essere rafforzato durante questa fase. Per il piano di uso e riduzione del prednisolone sopra menzionato, i ricercatori possono apportare modifiche personalizzate in base alla valutazione della sicurezza dei soggetti. Oltre alla funzionalità epatica, è possibile considerare anche il monitoraggio dei risultati delle cellule T periferiche per l'antigene del sangue specifiche per l'antigene e possono essere aggiunti altri agenti immunosoppressivi se necessario. Se i glucocorticoidi utilizzati sono preparativi diversi dal prednisolone, il dosaggio e il piano di astinenza dovrebbero essere formulati in base alla dose equivalente di prednisolone dopo la conversione.

Consenso informato:

I bambini di età inferiore agli 8 anni che partecipano agli studi clinici dovrebbero ottenere un modulo di consenso informato firmato dal loro tutore e dovrebbero essere informati di informazioni pertinenti sulla sperimentazione clinica nell'ambito che i soggetti possono comprendere. Quando il bambino ha la capacità di prendere una decisione di accettare di partecipare allo studio clinico, dovrebbe essere ottenuto anche il proprio consenso; I bambini di età superiore a 8 anni (inclusi 8 anni) partecipano a studi clinici, se hanno la possibilità di firmare il modulo di consenso informato, sia se stessi che i loro tutori dovrebbero firmare il modulo di consenso informato. Se non hanno la capacità di firmare il modulo di consenso informato, i loro tutori dovrebbero firmare il modulo di consenso informato.

Eventi e trattamenti medici avversi diversi da concomitanti:

I farmaci/i farmaci che si verificano dalla firma del modulo di consenso informato fino a quando la prima somministrazione non sarà registrata come storia medica/comorbidità e storia del trattamento nell'ECRF e non devono essere registrate sulla pagina AE e la pagina di trattamento/trattamento concomitante; A meno che l'infortunio/danno non sia causato dalle procedure di esame di laboratorio clinico, deve essere registrato come AE sulla pagina AE e, per altri trattamenti diversi dai farmaci/farmaci concomitanti per questo AE, devono essere registrati di conseguenza sulla pagina di trattamento/trattamento concomitante.

Il percorso tecnico specifico è dettagliato nel programma di ricerca.

Reazioni avverse previste e metodi di trattamento:

I rischi associati ai partecipanti a questo studio includono principalmente rischi relativi alle procedure di somministrazione di farmaci (foratura della guaina), rischi correlati al farmaco studiato AAV-MECP2 e rischi correlati all'immunosoppressione profilattica.

Rischi associati alla puntura di iniezione di guaina:

1) La puntura di iniezione della guaina è generalmente considerata sicura e i soggetti selezionati subiranno una scansione di risonanza magnetica della testa (MRI) prima della puntura lombare per escludere la possibilità di spazio intracranico che occupa lesioni (specialmente nella fossa posteriore) o aumento della pressione intracranica. I possibili rischi della puntura lombare includono quanto segue: i. Mal di testa dopo puntura lombare: i pazienti sottoposti a puntura lombare sperimentano mal di testa a causa di infiltrazioni di liquidi nei tessuti vicini dopo la puntura. Il mal di testa di solito inizia entro poche ore o due giorni dopo l'intervento chirurgico e possono essere accompagnati da nausea, vomito e vertigini. Di solito si verificano mal di testa durante la seduta o in piedi e possono essere sollevati quando si sdraia. Il mal di testa dopo la puntura lombare può durare per diverse ore a una settimana o più.

ii. Disagio o dolore nella parte posteriore: potrebbe esserci dolore o tenerezza nella parte bassa della schiena. Il dolore può diffondersi nella parte posteriore della gamba.

iii. Sanguinamento: sanguinamento vicino al sito di puntura o in rari casi può verificarsi nello spazio epidurale.

La somministrazione di farmaci in questo studio è stata effettuata da medici qualificati nella sala di cura dell'ospedale. Prima dell'iniezione, l'area di iniezione è stata disinfettata e coperta di stoffa. Dopo l'iniezione, sono state eseguite emostasi di disinfezione e compressione e il paziente è stato costretto a letto per 6 ore con il cuscino rimosso. Dopo l'intervento chirurgico, i soggetti saranno attentamente monitorati per garantire che eventuali possibili complicanze vengano rilevate e trattate in modo tempestivo.

Rischi associati a AAV-MECP2:

Il soggetto può sperimentare reazioni allergiche a AAV-MECP2. A causa della risposta immunitaria indotta dall'iniezione intratecale di AAV, i soggetti non sono generalmente in grado di ricevere altre terapie geniche consegnate dai vettori AAV dello stesso sierotipo.

Al momento, ci sono tre studi clinici (NCT0531780, NCT05419492 e NCT04833970) registrati su ClinicalTrials.gov Sito Web per la somministrazione di farmaci AAV al ventricolo laterale per le malattie del sistema nervoso centrale, ma i dati clinici di sicurezza o di efficacia non sono ancora stati divulgati. AVXS-101 è la versione intratecale della terapia del gene SMA Zolgensma. Uno studio di escalation della dose di fase 1 condotto in soggetti di età compresa tra 6-60 mesi ha mostrato che AVXS-101 era sicuro e ben tollerato quando somministrato intratecale a una dose massima di 2,4 × 1014 Vg/persona, con un solo soggetto che viveva livelli di transaminasi elevata senza bilirubina elevata; Un soggetto ha sperimentato trombocitopenia (conteggio inferiore a 75 × 109/L), che si è risolto spontaneamente senza intervento.

Il seguente sintetizza le gravi reazioni avverse (eventi) riportate nei farmaci AAV che sono stati commercializzati o negli studi clinici:

1. Epatotossicità. Segnalato sull'iniezione endovenosa di farmaci AAV per il trattamento della SMA, la distrofia muscolare di Duchenne (DMD) e la miopatia legata all'X (XLMTM). Il verificarsi di epatotossicità è significativamente correlato al dosaggio del farmaco somministrato e i casi gravi di epatotossicità si osservano solo in soggetti che ricevono dosi AAV> 5 × 1013VG. Fatta eccezione per la tossicità epatica in XLMTM, che è considerata correlata alla malattia epatica sottostante del paziente, il meccanismo pubblicato di altri casi di tossicità epatica è considerato lesioni a cellule epatiche mediate dalle cellule T CD8+mirano a AAV.
2. Malattia microvascolare trombotica. Segnalato nel trattamento di SMA e DMD con iniezione endovenosa di farmaci AAV, anche il verificarsi di questo evento è dose-dipendente e tutti i casi erano soggetti che hanno ricevuto dosi AAV ≥ 5 × 1013vg. A causa della presenza di prove di laboratorio dell'attivazione del complemento in molti di questi casi, si ritiene che la loro presenza sia correlata all'attivazione del sistema di complemento da parte di complessi di anticorpi antigene che mirano a AAV.
3. Miocardite e miosite. Secondo solo l'iniezione endovenosa di farmaci AAV nel DMD. Sulla base del modello di mutazione del gene DMD specifico, del tempo di insorgenza e della risposta alla terapia immunosoppressiva presente nel caso, si ipotizza che l'essenza di tali eventi tossici sia la risposta immunitaria del corpo al prodotto geneticamente modificato "Mini proteina atrofia anti -muscolo".
4. Tossicità del ganglio della radice dorsale (DRG). La tossicità del DRG con manifestazioni cliniche (sensazione anormale della mano e del piede) è stata riportata solo in un paziente con sclerosi laterale familiare (SLA). Questo caso ha ricevuto una dose intratecale di 4,2 × 1014 Vg di farmaco AAV. La tossicità di DRG riportata in altri studi è stata scoperta accidentalmente durante l'autopsia dei soggetti farmacologici AAV e i soggetti non avevano manifestazioni cliniche rilevanti prima della loro morte.
5. Segnali MR anormale del cervello. È stato riportato uno studio clinico sul trattamento della malattia di Batten infantile tardiva (malattia di CLN2) mediante iniezione parenchimale cerebrale bilaterale di farmaci AAV sotto localizzazione stereotassica. Entro 48 ore dall'iniezione, il cervello della testa del soggetto MR ha mostrato iperintensità T2, iperintensità ponderate per diffusione e segnali limitati di diffusione localizzati nel sito di iniezione. Il follow-up successivo MR ha mostrato che tutti i soggetti hanno sviluppato nuove aree di segnale elevato T2. I ricercatori non hanno trovato sequele cliniche associate a segnali MR anormali. Si ipotizza che i segnali MR anormali che appaiono presto dopo la somministrazione siano correlati all'edema/infiammazione del tessuto sostenuto causato dalla più alta concentrazione di farmaci AAV attorno alla punta del catetere iniezione, mentre i segnali elevati T2 che sembrano in seguito sono difficili da determinare se sono correlati alla progressione della malattia, ai farmaci AAV o alle procedure di iniezione.

Gli studi sui campioni di pazienti (1 anno dopo la somministrazione) e i primati non umani (1 mese dopo l'iniezione) hanno dimostrato che la probabilità di integrazione AAV nel genoma è bassa. Sulla base del record di sicurezza di AAV negli studi clinici, l'attuale consenso nel campo della terapia genica è che AAV ha una bassa tossicità genetica nell'uomo.

Le valutazioni preliminari di sicurezza preclinica di AAV-MECP2 nei topi RTT umanizzati e nei macachi che mangiano granchi hanno mostrato che AAV-MECP2 non ha causato danni alla funzione epatica o renale, danni ai nervi, tossicità immunitaria o cambiamenti istopatologici negli organi importanti negli animali e la condizione generale degli animali era buona. Pertanto, i dati esistenti di AAV-MECP2 non indicano rischi clinici chiari. L'evento avverso più comune previsto per i soggetti che ricevono AAV-MECP2 può essere un elevazione di grado 1/2 degli enzimi epatici.

Rischi associati all'immunosoppressione preventiva:

Questo protocollo stabilisce che a partire da un giorno prima della somministrazione di AAV-MECP2, la somministrazione orale di 1 mg/kg di prednisolone o una dose equivalente di altri glucocorticoidi dovrebbero essere avviati e il dosaggio dovrebbe essere mantenuto per almeno 30 giorni prima di ridurre lentamente. Lo scopo di usare i glucocorticoidi è di sopprimere le risposte immunitarie innate e acquisite indotte dai vettori AAV e ridurre le reazioni immunitarie che sono dannose per la sicurezza e l'efficacia. Quando si utilizzano ormoni, gli eventi avversi relativi agli ormoni, comprese le infezioni opportunistiche, saranno monitorati nei soggetti.

Corticosteroids (such as methylprednisolone and prednisone) have several clear side effects, including hypertension, tachycardia, congestive heart failure, changes in serum electrolytes, hyperglycemia, pain, elevated urea nitrogen and creatinine, osteoporosis and ischemic necrosis, decreased anti infective ability, dizziness, tremors, emotional instability, insomnia, Nausea, vomito, aumento di peso, pressione intraoculare elevata e induzione della cataratta.

Durante l'uso di ormoni, i ricercatori monitoreranno da vicino gli eventi avversi sopra menzionati, in particolare le infezioni opportunistiche che possono verificarsi nei soggetti.

Analisi statistica Questo studio è uno studio di esplorazione della dose precoce con l'obiettivo principale di valutare la sicurezza, pertanto non è stato condotto alcun calcolo formale della dimensione del campione.

La sicurezza e la tollerabilità del trattamento sono valutate in base alla frequenza e alla gravità degli eventi avversi che si verificano entro un anno dopo la somministrazione. La proporzione di soggetti con qualsiasi AE, qualsiasi SAE, qualsiasi AE relativo al farmaco investigativo e qualsiasi AE ≥ 3 AE sarà analizzata statisticamente nel suo insieme e dalle classi di organi (SOC) e termine preferito (PT), rispettivamente. L'incidenza di eventi avversi in diverse coorti di dose sarà anche statisticamente analizzata separatamente.

A causa della piccola dimensione del campione e della possibilità di diversi indicatori di efficacia tra i soggetti in diverse fasi della malattia, tutte le analisi di efficacia in questo studio sono descrittive e non comportano statistiche inferenziali.