AAV-MECP2-veiligheid/verdraagbaarheid en werkzaamheid met één dosis in Rett-syndroom

Onderzoeksachtergrond:

Rett -syndroom (RTT) is een aangeboren neurologische aandoening die voornamelijk vrouwen treft. De typische klinische manifestaties omvatten beëindiging of zelfs regressie van neurale ontwikkeling van 6-18 maanden na de geboorte, verlies van verworven vaardigheden zoals cognitie, taalvermogen en handfunctie, vaak vergezeld van stereotiepe handbewegingen, abnormale ademhalingsritmes, epileptische aanbouwen en angststoornissen. RTT is een zeldzame ziekte met een incidentiepercentage van ongeveer 1/10000-15000, die naar schatting meer dan 10% van de vrouwelijke intellectuele handicaps goed is. Het heeft een grote impact op patiënten en hun families, met ernstige schade aan hun sociale functioneren en een zeer slechte kwaliteit van leven.

Ongeveer 90-95% van de typische RTT-patiënten en 40-50% van de atypische RTT-patiënten hebben afwijkingen gedetecteerd in het methylering CPG-bindend eiwit 2 (MECP2) dat codeert, evenals mutaties of verwijderingen in het MECP2-gen. Het menselijke MECP2 -gen bevindt zich op XQ28 en het gecodeerde eiwit gemethyleerde CpG -bindend eiwit 2 is een lid van de methylatiedomeinfamilie. Het is een transcriptieremmende factor die RNA -splicing reguleert en een belangrijke epigenetische regulator in de hersenen is, wat de neurale functie beïnvloedt. In dierexperimenten werd vastgesteld dat MECP2 -deficiënte muizen een significante verbetering vertoonden in RTT -symptomen na het ontvangen van MECP2 -eiwitsuppletie door middel van genetische technologie -technologie.

In de afgelopen jaren heeft het succes van gentherapie bij neuromusculaire ziekten zoals spinale spieratrofie (SMA) de haalbaarheid aangetoond om gentherapietechnologie in het menselijk lichaam toe te passen. Sinds 2021 hebben Taysha en neurogene klinische proeven uit gentherapie uitgevoerd voor het Rett -syndroom. Momenteel hebben 2 volwassen RTT -patiënten en 3 kinderen de administratie voltooid, wat een gunstig veiligheidsprofiel aantoont. Er zijn geen ernstige behandelingsgerelateerde bijwerkingen geweest en geen meldingen van MECP2-overexpressietoxiciteit of symptomen.

Professor Qiu Zilong, een senior onderzoeker aan het Songjiang Research Institute van Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, heeft langdurig onderzoek gedaan naar RTT. In 2012 werd ontdekt dat MECP2 neuronale synaptische homeostase plasticiteit reguleert; In 2014 werd ontdekt dat MECP2 microRNA -splicing -verwerking reguleert; Opgerichte MECP2 transgene krab etende aapmodel in 2016; In 2019 werd het neurale mechanisme van MECP2 -muizen geïdentificeerd en werd genen van genbewerkingstherapie; Stel in 2022 een MECP2 -mutante muis AAV -gentherapietechnologie -routekaart op en solliciteert een uitvinding octrooi. De onafhankelijk ontwikkelde AAV-MECP2 verlengde de levensduur van MECP2 knock-out muizen in laterale ventrikel injectie-experimenten aanzienlijk, en het therapeutische effect van AAV-MECP2 met CAG-promoter was aanzienlijk beter dan vergelijkbare producten. De veiligheid en werkzaamheid van intrathecale toediening bij aap zijn 8 maanden getest en bloedroutine, bloedbiochemie en immuunfactorindicatoren hebben allemaal een goede veiligheid getoond.

Samenvattend is RTT een ernstige neurologische aandoening die patiënten veel schade toebrengt, en er is momenteel geen effectieve behandelingsmethode. De klinische studie die door onze onderzoekers is geïnitieerd, wil de veiligheid, verdraagbaarheid en voorlopige effectiviteit van AAV-MECP2 evalueren bij de behandeling van Rett-syndroom door een enkele intrathecale injectie, die een belangrijke medische en sociale waarde heeft. De veiligheid en werkzaamheid van intrathecale toediening zijn 8 maanden getest en bloedroutine, bloedbiochemie en immuunfactorindicatoren hebben allemaal een goede veiligheid getoond.

Onderzoeksoverzicht:

Algemeen onderzoeksontwerp:

Een multicenter, enkele arm, enkele intrathecale dosis exploratiestudie van AAV-MECP2 geïnitieerd door onderzoekers wil twee doeldoses verkennen, met drie proefpersonen die bij elke dosis zijn ingeschreven, om de veiligheid, verdraagbaarheid en voorlopige werkzaamheid van enkele intrathecale injectie van AAV-MECP2 in de behandeling van RTT te evalueren.

Studiepopulatie:

Kinderen van 4-10 jaar bij wie RTT is vastgesteld door consultatie op de afdeling neurologie/gedragsontwikkeling van Guangzhou Women and Children's Medical Center en de Child Health Department of Xiamen Children's Hospital.

Testlocatie:

Onderzoeksafdeling van vrouwen en kindermedisch centrum, Guangzhou Medical University

Exit Criteria Midway:

Familieleden kunnen zich nog steeds terugtrekken uit het onderzoek na het verkrijgen van geïnformeerde toestemming.

Criteria voor detachement/uitsluiting:

i. De patiënt moet de behandelingsmedicatie aanpassen die tijdens de studieperiode wordt gebruikt;

II. Tijdens de studie is het gebruik van geneesmiddelen/behandelingen die uit de studie zijn verboden vereist: tijdens de studie zijn de volgende gelijktijdige geneesmiddelen/behandelingen verboden:

• Geneesmiddelen die worden gebruikt om spieraandoeningen of neurodegeneratieve ziekten te behandelen (exclusief anti -epileptische geneesmiddelen).
• Een medicijn dat wordt gebruikt om diabetes te behandelen.
• Immunosuppressiva (zoals glucocorticoïden, cyclosporine, tacrolimus, methotrexaat, cyclofosfamide, intraveneuze immunoglobuline, rituximab, etc.) werden gestart binnen 3 maanden vóór de inschrijving.
• Voor degenen die vóór de inschrijving geen anti -epileptica of revalidatiebehandelingsplannen hebben gebruikt, hebben ze na de inschrijving geen anti -epileptica of geïmplementeerde revalidatiebehandelingsplannen gebruikt.

iii. Niet in staat om een ​​week in het ziekenhuis bij te wonen volgens het gevestigde medicatieplan; IV. Na communicatie en coördinatie van tijd kan de projectevaluatie niet worden voltooid; v. Als bijwerkingen, laboratoriumafwijkingen of andere medische aandoeningen optreden tijdens de studieperiode en passende maatregelen worden genomen, zijn de onderzoekers van mening dat het voortzetten van de studie het risico voor de proefpersonen kan vergroten.

Aantal deelnemers en groeperingsmethode:

Er waren 6 deelnemers aan de injectiegroep. Zes proefpersonen werden in volgorde ingeschreven in de proef, waarbij één patiënt de toediening voltooide en geen significante dosisbeperkte toxiciteit (DLT) waargenomen tijdens een follow-up van een maand. Het laatste onderwerp werd ingeschreven voor de proefmedicatie.

DLT Definitie: een van de volgende gebeurtenissen (geregistreerd volgens NCI CTCAE v5.0) die plaatsvinden binnen 30 dagen na toediening en worden bepaald door de onderzoeker om mogelijk of zeker gerelateerd te zijn aan AAV-MECP2 (zie 4.2 Bijwerkingen van de bijwerkingen): ≥ Grade 3 bijwerkingen; Laboratoriumafwijkingen van niveau 3 blijven ≥ 7 dagen bestaan ​​met de nodige medische interventie; Niveau 4 Laboratoriumafwijking.

Experimenteel medicijn:

Experimentele medicatie: AAV-MECP2 ； Actief ingrediënt: recombinante AAV-gentherapie vector die neuronspecifieke promotor (CAG) aangedreven MECP2 bevat; Accessoires: 4-hydroxyethylpiperazine ethanesulfonzuur, kaliumchloride, natriumchloride, calciumchloride, glucose, poloxameer F68 en injectiewater; Doseringsvorm: intrathecale injectie; Uiterlijk: kleurloze en transparante vloeistof; Specificatie: onafhankelijk verpakte penicilline -fles, met een titer van 2 × 1014 Vg/ml en een volume van 0,5 ml; Administratieroute: intrathecale injectie; Behandelingsfrequentie: 1 keer;

Onderzoeksstappen en methoden:

1. Interventiemethode: AAV-MECP2, verdund met 20 ml fysiologische zoutoplossing, twee verkennende doses (dosis 1, dosis 2, hieronder gedetailleerd), enkele intrathecale injectie;

   Dosering dosering:

   De dosisonderzoeksregels zijn geëvolueerd uit het traditionele "3+3 -ontwerp". De twee vooraf ingestelde dosisniveaus voor deze studie zijn: dosis 1 (7 × 1014VG/persoon); Dosis 2 (1,5 × 1015vg/persoon).

   De twee vooraf ingestelde dosisniveaus in deze studie zijn het initiële dosisniveau van dosis 1 en een hoger dosis dosis 2. Tijdens het onderzoeksproces is het mogelijk om een ​​dosisniveau onder dosis 1 of een tussenliggende dosis tussen dosis 1 en dosis 2 te verkennen op basis van geaccumuleerde veiligheids- en werkzaamheidsgegevens, onderwerp van SRC-goedkeuring.

   Op dosis 1 -niveau werden drie proefpersonen eerst ingeschreven en vervolgens tijdens de DLT -observatieperiode werd het aantal proefpersonen dat DLT ontwikkelde onder de drie proefpersonen waargenomen. Op basis van het aantal personen dat wordt waargenomen DLT, beslissen of ze moeten verhogen naar de volgende dosisgroep, de huidige dosisgroep handhaven of afnemen tot een lagere dosisgroep.

   1. Als geen van de drie onderwerpen die bij deze dosis zijn ingeschreven, DLT ontwikkelt of slechts één onderwerp DLT ontwikkelt, kan de dosis worden verhoogd tot een hogere dosisgroep of kan de proef worden gestopt (wanneer het al dosis 2 is).
   2. Als 2 van de 3 onderwerpen die bij deze dosis zijn ingeschreven, DLT ontwikkelen, zal de administratie aan nieuwe onderwerpen worden opgeschort totdat SRC een beslissing neemt; Op dit punt, na een uitgebreide evaluatie van de huidige veiligheids- en werkzaamheidsgegevens, biedt SRC een van de volgende drie resoluties: ① de dosis verlaagt tot een lagere dosis en drie beoordelingsbare onderwerpen inschrijven; ② Voeg 3 aanvullende beoordelingsbare onderwerpen toe aan de huidige dosis; ③ Stop het experiment.

   SRC staat voor Safety Review Committee, verantwoordelijk voor het beoordelen van veiligheidsgegevens van proefpersonen, samengesteld uit onderzoekers en samenwerkende medische monitors. Tijdens het onderzoeksproces is SRC verantwoordelijk voor het beschermen van de veiligheid van de onderwerpen, en de verantwoordelijkheden ervan zijn als volgt:

   De veiligheidsproblemen van elke deelnemer bekijken; Bekijk regelmatig de veiligheidsgegevens terwijl de proefpersonen een studiebehandeling blijven krijgen; Evalueren of het nodig is om het aantal onderwerpen in elke fase uit te breiden en of het mogelijk is om door te gaan naar de volgende dosisfase, inclusief dosis escalatie of dosisverlaging; Houd onderzoeksgegevens en resultaten vertrouwelijk.

2. Drugbeheer:

Voor alle ontvangen onderzoeksinterventieproducten moet de onderzoeker of het aangewezen personeel bevestigen dat de juiste temperatuuromstandigheden worden gehandhaafd tijdens het transport, en eventuele inconsistenties zijn gemeld en opgelost voordat de onderzoeksinterventieproducten worden gebruikt. Dit onderzoeksproduct is verpakt in penicilline -flessen en getransporteerd door droog ijs. Na het ontvangen, slaat het onderzoekscentrum het op bij -75 ± 15 ℃.

Alleen ingeschreven onderwerpen kunnen onderzoeksinterventies ontvangen en alleen geautoriseerd onderzoekscentrumpersoneel kan onderzoeksinterventies verstrekken of beheren. Alle onderzoeksinterventies moeten worden opgeslagen in een veilig, milieuvriendelijk en gecontroleerd (handmatig of automatisch) gebied volgens de aangegeven opslagomstandigheden, en alleen onderzoekers en geautoriseerde onderzoekscentrum hebben toegang tot het gebied.

De onderzoeker of drugsbeheerder van het onderzoekscentrum telt en verifieert de onderzoeksinterventieproducten en houdt relevante gegevens bij (d.w.z. het ontvangen en verifiëren van records en definitieve verwijderingsrecords).

Onderzoeksevaluatie:

Het onderzoeksprogramma en het schema zijn te vinden in het 'onderzoeksschema'. Deze tabel geeft een overzicht van alle evaluaties en maakt gebruik van "X" om de evaluaties weer te geven die bij elk bezoek worden uitgevoerd. Als het onderwerp om speciale redenen niet naar het proefcentrum kan gaan, kan het onderwerp of hun wettelijke vertegenwoordiger via andere alternatieve middelen contact opnemen met het personeel van het proefcentrum (zoals telefoon of virtuele video). Details van bijwerkingen en gelijktijdige medicijnen moeten tijdens de communicatie worden verzameld. Tijdens deze periode kunnen deelnemers mogelijk niet deelnemen aan de laboratoriumtests en klinische evaluaties die tijdens het onderzoeksbezoek zijn gespecificeerd, maar alle relevante informatie moet in detail worden vastgelegd. Als laboratoriumgegevens van proefpersonen worden verzameld of klinische evaluaties worden uitgevoerd via alternatieve methoden, moet relevante informatie in detail worden vastgelegd.

Primaire uitkomstmaten: veiligheidsindicatoren

1. Demografie/medische geschiedenis:

   i. Huidige medische geschiedenis: inclusief diagnostische basis, gerelateerde symptomen, ontwikkelingsgeschiedenis, huidige en eerdere behandelingsstatus voor medicatie/herstel, enz.; II. Geschiedenis van andere interne of chirurgische ziekten (vooral geneesmiddelenallergieën, spinale trauma, enz.); iii. Afwijkingen in zwangerschapsduur en prenatale onderzoeken; IV. Eerdere ziekenhuisopnames sinds de geboorte, inclusief duur van ziekenhuisopname, redenen, ontvangen behandeling en ziekteprogressie; Indien mogelijk, verstrekt ICD-10 coderingsinformatie voor elke diagnose van ziekenhuisopnames; v. Familiegeschiedenis

2. Lichamelijk onderzoek:

   i. Genernaal lichamelijk onderzoek inclusief neurologisch onderzoek moet worden uitgevoerd en opgenomen bij aangewezen bezoeken, die ten minste de volgende inhoud moeten omvatten: hoofd/nek, ogen, oren, neus/keel, cardiovasculair systeem, longen, buik, musculoskeletaalsysteem, centraal zenuwstelsel en huid.

   II. Vitale tekenen, hoogte en gewicht: vóór het meten van vitale tekenen, moeten proefpersonen in een rustige en ongestoorde omgeving rusten gedurende ten minste 3 minuten, en vervolgens meten in een halve rugliggende positie, inclusief lichaamstemperatuur, systolische en diastolische bloeddruk, ademhalingssnelheid, puls- en bloedzuurstofverzadiging.

   iii. Na intrathecale injectie van AAV-MECP2 ligt u 6 uur plat terwijl het kussen is verwijderd en de bloeddruk, ademhalingssnelheid, puls en zuurstofverzadiging om de 15 minuten (± 5 minuten) te meten en vast te leggen; Controleer daarna de bovenstaande indicatoren elk uur (± 15 minuten) tot 6 uur na intrathecale injectie van AAV-MECP2.

   IV. Tijdens de screeningperiode moet de hoogte worden gemeten en worden het gewicht gemeten bij aangewezen bezoeken.

3. Laboratoriumonderzoek: i. Urine -routine: specifiek gewicht, pH -waarde, glucose, eiwit, bloed, ketonlichamen, bilirubine, urobilinogeen, nitriet, leukocytenesterase (testpapiermethode), microscopisch onderzoek (als bloed- of eiwit testresultaten abnormaal zijn).

   II. Bloedroutine: het aantal rode bloedcellen, hemoglobine, het aantal bloedplaatjes, het aantal witte bloedcellen en classificatietelling, hematocriet, gemiddelde corpusculair volume, gemiddelde corpusculaire hemoglobineconcentratie en reticulocyten aantal; iii. Bloedbiochemie: aspartaat aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyltransferase (GGT), alkalinefosfatase (ALP), totaal bilirubine, direct bilirubine, totaal eiwit, ureumstikstof, koester, natrium, natrium, natrium en calcium.

   IV. Het myocardiale enzymspectrum: creatinekinase (CK), creatinekinase-iso-enzyme (CK-MB), hydroxybutyraat dehydrogenase (HBDH), lactaatdehydrogenase (LDH) en troponine I (Hstni).

   v. De coagulatiefunctie: geactiveerde gedeeltelijke tromboplastinetijd (APTT), protrombine-tijd (PT), trombine-tijd (TT), fibrinogeen (FG, FIB) en D-dimeer.

   vi. Immuunfunctie: perifere bloedlymfocyten subpopulatietelling:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Complementsysteem: totale complementactiviteit (CH50), C3 -activiteit en kwantificering, C4 -activiteit en kwantificering.

   vii. Serumcytokines omvatten: TNFa 、 IFN-γ 、 IL-10 、 IL-10.

4. Elektrocardiogram (ECG): een conventionele 12 lood ECG wordt verkregen met behulp van een ECG -apparaat dat de hartslag automatisch kan berekenen en PR-, QRS-, QT- en QTC -intervallen kan meten.
5. Echocardiografie: Tijdens de screeningperiode zal een transthoracale kleur echocardiografie -onderzoek worden gepland om potentiële hartlaesies en hartdisfunctie uit te sluiten. Het onderzoek werd geïnterpreteerd en geanalyseerd door echografie -artsen en cardiologen in het onderzoekscentrum.
6. Röntgenfoto van de borst: tijdens de screeningperiode wordt röntgenonderzoek naar de borst voornamelijk uitgevoerd om longinfecties uit te sluiten die vaak bij patiënten voorkomen. Als het moeilijk is om een ​​duidelijke diagnose te stellen voor een gewone film, met de toestemming van de voogd van het onderwerp, kan een extra CT CT -scan worden uitgevoerd.
7. Hoofd MRI: Tijdens de screeningperiode is een hoofd -MRI -platte scan vereist om anatomische afwijkingen of andere laesies in het centrale zenuwstelsel te detecteren die moeten worden uitgesloten. Twee hoofd-MRI-scans gepland tijdens de follow-upperiode werden gebruikt om de toxiciteit geassocieerd met AAV-MECP2-injectie te evalueren en de ontwikkeling van het centrale zenuwstelsel te volgen.

Secundaire uitkomstmaten: evaluatie van de werkzaamheid

1. RTT-specifieke klinische globale indrukken schaalvaart (CGI-S) en klinische globale indrukken schaalverbetering (CGI-I);
2. Rett Severity Assessment Questionnaire (RSSS);
3. Rett Syndrome Behavior Questionnaire (RSBQ);
4. Herziene Motor Behaviour Assessment (R-MBA);
5. Rett Syndrome Hand Function Scale (RSHFS);
6. Slaapgewoonten voor kinderen;
7. Rett Parenting Stress Questionnaire;
8. Griffiths Developmental Rating Scale - Chinese versie (GDS -C): alleen relatieve ontwikkelingsleeftijd wordt gebruikt als de validiteitsevaluatie. Als de leeftijd ouder is dan 8 jaar en het vermogen jonger dan 6 jaar oud is, wordt GDS-C-evaluatie nog steeds gebruikt;
9. Autisme diagnosegedrag Observatieschaal (ADOS);
10. Adaptieve gedragsbeoordelingsschaal voor kinderen van 0-6 jaar (tweede editie) - Formulier ouderbeoordeling;
11. Afwijkende gedragsschaal (ABC);

12. Epilepsie -records: tijdens de studie moesten de voogdijen het optreden van epileptische aanvallen vastleggen, inclusief alle datums met en zonder epileptische aanvallen, inclusief de presentatie, duur, frequentie en datum van aanvallen. Draag het bij u bij elk vervolgbezoek voor onderzoekers om de frequentie en duur van epileptische aanvallen te beoordelen.

    De frequentie van epileptische aanvallen zal worden gedefinieerd met behulp van geordende variabelen met vijf categorieën: toename, geen verandering, remissie van 75%, remissie van 50% en geen aanvallen.

13. Video -bewijsmateriaal: korte video -opnames worden gemaakt van het evaluatieproces van de proefpersonen tijdens de basisperiode, medicatie -ziekenhuisopperiode en 1, 3, 6 en 12 maanden na injectie. Als er op andere momenten abnormaal gedrag plaatsvindt, kunnen onderzoekers ook besluiten om videobewijs toe te voegen. Ouders/wettelijke voogden kunnen ook thuisvideo's bieden met verbeterde weergavefuncties. Nadat de opname is voltooid, zal het onderzoeksteam de video onmiddellijk uploaden naar een gecodeerde computer of laptop en het videobestand uit de camera -opslagkaart verwijderen. Elke video die door de samenwerkende partij wordt ontvangen, wordt beschouwd als vertrouwelijke onderzoeksgegevens. Het onderzoeksteam en de partners zullen verantwoordelijk zijn voor het beschermen van de identiteitsinformatie van de onderwerpen en hun ouders/voogden in de video -opname.
14. Elektro -encefalogram (EEG);
15. Wearable polsband: registratie van slaapomstandigheden;
16. Groeifactor 11 (GDF11) in cerebrospinale vloeistof en bloed: een uitgescheiden eiwit van de transformerende groeifactor - β (TGF - β) superfamilie, voornamelijk tot expressie gebracht in hersenweefsel en negatief reguleren van neurogenese tijdens ontwikkeling en volwassenheid. Mutaties in GDF11 kunnen leiden tot ontwikkelingsafwijkingen met betrekking tot het craniofaciale, wervelkolom- en zenuwstelsel. Recent bewijs suggereert dat het GDF11 -gen een van de doelgenen is gereguleerd door MECP2: MECP2 reguleert de expressie van GDF11 door histonmethylering van de GDF11 -versterker te induceren. In RTT -muizen nam de expressie van GDF11 af; Integendeel, bij MDS -muizen nam de expressie van GDF11 toe.

Eerdere studies hebben aangetoond dat GDF11 wordt uitgescheiden door hersenweefsel en in het bloed kan worden gedetecteerd. Daarom zal dit experiment de veranderingen in GDF11 -niveaus in het bloed voor en na behandeling onderzoeken.

Immunogeniciteitsbeoordeling:

Om de humorale en cellulaire immuunresponsen geïnduceerd door AAV9-capsid na toediening te evalueren, werd perifeer bloed verzameld voor anti-AAV9 antilichaamdetectie (ELISA-methode) en volbloed werd verzameld voor AAV antigeen-specifieke T-cel-kwantitatieve detectie (IFN-γ enzym-gekoppeld immunosor-in-γ op isoliseren perifere Elispot). Immunogene bloedmonsters werden gestuurd naar aangewezen laboratoria van derden voor testen.

Profylactische orale toediening van prednisolon:

Oraal toegediend 24 uur vóór de behandeling, en onderhouden volgens de doserings- en ontwenningsregels tot de 9e week na de behandeling.

Bijna alle medicijnen die in het menselijk lichaam worden gebruikt, ongeacht de toedieningsroute, hebben antigeen-specifieke T-celreacties 2-4 weken na toediening waargenomen. De potentiële nadelige gevolgen van deze reactie zijn de klaring van immuun-gemedieerde getransduceerde cellen en het verlies van transgene expressie.

Om de immuunrespons van het lichaam op AAV -gentherapie -medicijnen te verlichten, moeten proefpersonen profylactische orale corticosteroïden nemen en 24 uur prednisolon gebruiken voordat hij injectie krijgt.

Tijdens het gebruik van glucocorticoïden moeten regelmatig leverfunctie -controles worden uitgevoerd om te bepalen of medicatie kan worden verminderd of gestopt op basis van leverfunctie -indicatoren. Als de GGT-, AST- of ALT -waarden ≥ 2 × uln zijn, moeten onderzoekers een overeenkomstige behandeling bieden op basis van de individuele situatie van de proefpersonen. Op basis van eerdere klinische ervaring met AAV-drugsgebruik, is de hoog-risico-periode voor rebound van leverenzym binnen 2 weken na hormoonreductie of stopzetting. Daarom moet de monitoring van de leverfunctie tijdens deze fase worden versterkt. Voor het bovengenoemde gebruik van prednisolon en reductieplan kunnen onderzoekers gepersonaliseerde aanpassingen aanbrengen op basis van de veiligheidsbeoordeling van de proefpersonen. Naast de leverfunctie, moeten de monitoringresultaten van perifere bloedantigeenspecifieke T-cellen ook in overweging worden genomen en kunnen andere immunosuppressieve middelen worden toegevoegd indien nodig. Als de gebruikte glucocorticoïden andere preparaten zijn dan prednisolon, moet het doserings- en ontwenningsplan worden geformuleerd op basis van de equivalente dosis prednisolon na conversie.

Geïnformeerde toestemming:

Kinderen jonger dan 8 jaar die deelnemen aan klinische proeven moeten een ondertekend geïnformeerde toestemmingsformulier van hun voogd verkrijgen en moeten worden geïnformeerd over relevante informatie over de klinische proef binnen de reikwijdte die de proefpersonen kunnen begrijpen. Wanneer het kind de mogelijkheid heeft om een ​​beslissing te nemen om in te stemmen om deel te nemen aan de klinische proef, moet ook zijn eigen toestemming worden verkregen; Kinderen ouder dan 8 jaar (waaronder 8 jaar oud) die deelnemen aan klinische proeven, als ze de mogelijkheid hebben om het geïnformeerde toestemmingsformulier te ondertekenen, moeten zowel zichzelf als hun voogden het geïnformeerde toestemmingsformulier ondertekenen. Als ze niet de mogelijkheid hebben om het geïnformeerde toestemmingsformulier te ondertekenen, moeten hun voogden het geïnformeerde toestemmingsformulier ondertekenen.

Nadere medische gebeurtenissen en andere behandelingen dan gelijktijdig:

Medicatie/medicijnen die optreden bij de ondertekening van het geïnformeerde toestemmingsformulier totdat de eerste administratie moet worden vastgelegd als medische geschiedenis/comorbiditeiten en behandelingsgeschiedenis in ECRF, en mogen niet worden geregistreerd op de AE ​​-pagina en gelijktijdige medicatie/behandelingspagina; Tenzij de letsel/schade wordt veroorzaakt door klinische laboratoriumonderzoeksprocedures, moet het worden geregistreerd als een AE op de AE ​​-pagina, en voor andere behandelingen anders dan gelijktijdige medicatie/geneesmiddelen voor deze AE, worden ze op de gelijktijdige medicatie/behandelingspagina dienovereenkomstig geregistreerd.

De specifieke technische route is gedetailleerd in het onderzoeksschema.

Verwachte bijwerkingen en behandelingsmethoden:

De risico's die gepaard gaan met deelnemers aan dit onderzoek omvatten voornamelijk risico's met betrekking tot procedures voor het toedienen van geneesmiddelen (schede punctie), risico's met betrekking tot het onderzoeksmedicijn AAV-MECP2 en risico's met betrekking tot profylactische immunosuppressie.

Risico's geassocieerd met schede injectie Punctie:

1) Punctie van de injectie van de schede wordt over het algemeen als veilig beschouwd, en de geselecteerde proefpersonen zullen een hoofdmagnetische resonantie -beeldvorming (MRI) -scan ondergaan vóór lumbale punctie om de mogelijkheid van intracraniële ruimte uit te sluiten die laesies bezetten (vooral in de achterste fossa) of verhoogde intracraniële druk. De mogelijke risico's van lumbale punctie omvatten het volgende: i. Hoofdpijn na lumbale punctie: patiënten die lumbale punctie ondergaan, ervaren hoofdpijn als gevolg van vloeistofinfiltratie in nabijgelegen weefsels na lekke band. Hoofdpijn begint meestal binnen een paar uur tot twee dagen na de operatie en kunnen gepaard gaan met misselijkheid, braken en duizeligheid. Hoofdpijn komt meestal voor tijdens het zitten of staan, en kunnen worden opgelucht wanneer ze liggen. Hoofdpijn na lumbale punctie kan enkele uren tot een week of langer duren.

II. Ongemak of pijn in de rug: er kan pijn of tederheid zijn in de onderrug. De pijn kan zich naar de achterkant van het been verspreiden.

iii. Bloeden: bloedingen in de buurt van de lekkingsplaats, of in zeldzame gevallen kan dit voorkomen in de epidurale ruimte.

De toediening van medicijnen in deze studie werd uitgevoerd door gekwalificeerde artsen in de ziekenhuiszuiveringsruimte. Vóór injectie werd het injectiegebied gedesinfecteerd en bedekt met doek. Na injectie werden desinfectie- en compressie hemostase uitgevoerd en de patiënt werd 6 uur bedlegerig met het kussen verwijderd. Na de operatie zullen de proefpersonen nauwlettend worden gevolgd om ervoor te zorgen dat mogelijke complicaties tijdig worden gedetecteerd en behandeld.

Risico's geassocieerd met AAV-MECP2:

Het onderwerp kan allergische reacties op AAV-MECP2 ervaren. Vanwege de immuunrespons geïnduceerd door intrathecale injectie van AAV, zijn proefpersonen meestal niet in staat om andere gentherapieën te ontvangen die worden geleverd door AAV -vectoren van hetzelfde serotype.

Momenteel zijn er drie klinische onderzoeken (NCT05317780, NCT05419492 en NCT04833970) geregistreerd op de ClinicalTrials.gov Website voor het toedienen van AAV -medicijnen aan de laterale ventrikel voor ziekten van het centrale zenuwstelsel, maar klinische gegevens van veiligheid of werkzaamheid zijn nog niet bekendgemaakt. AVXS-101 is de intrathecale versie van de SMA-gentherapie Zolgensma. Een fase 1 dosis escalatiestudie uitgevoerd bij proefpersonen van 6-60 maanden toonde aan dat AVXS-101 veilig was en goed werd getolereerd wanneer intrathecaal werd toegediend bij een maximale dosis van 2,4 x 1014 VG/persoon, met slechts één proefpersoon met verhoogde transaminase-niveaus zonder verhoogde bilirubine; Eén onderwerp ondervond trombocytopenie (tel onder 75 × 109/l), die spontaan oploste zonder interventie.

De volgende vat de ernstige bijwerkingen (gebeurtenissen) samen die zijn gerapporteerd in AAV -geneesmiddelen die op de markt zijn gebracht of in klinische onderzoeken:

1. Hepatotoxiciteit. Gerapporteerd over intraveneuze injectie van AAV-medicijnen voor de behandeling van SMA, Duchenne spierdystrofie (DMD) en X-gekoppelde myopathie (XLMTM). Het optreden van hepatotoxiciteit is significant gecorreleerd met de dosering van het toegediende medicijn en ernstige gevallen van hepatotoxiciteit worden alleen gezien bij proefpersonen die AAV -doses ontvangen> 5 × 1013VG. Behalve de levertoxiciteit bij XLMTM, die wordt beschouwd als gerelateerd aan de onderliggende leverziekte van de patiënt, wordt het gepubliceerde mechanisme van andere gevallen van levertoxiciteit beschouwd als levercelletsel gemedieerd door CD8+T -cellen die gericht zijn op AAV.
2. Trombotische microvasculaire aandoeningen. Gerapporteerd bij de behandeling van SMA en DMD met intraveneuze injectie van AAV-medicijnen, is het optreden van deze gebeurtenis ook dosisafhankelijk en alle gevallen waren proefpersonen die AAV-doses ontvingen ≥ 5 x 1013VG. Vanwege de aanwezigheid van laboratoriumbewijs van complementactivering in veel van deze gevallen, wordt geacht dat hun optreden verband houdt met de activering van het complementsysteem door antigeen -antilichaamcomplexen gericht op AAV.
3. Myocarditis en myositis. Alleen gerapporteerd over intraveneuze injectie van AAV -medicijnen in DMD. Gebaseerd op het specifieke DMD -genmutatiepatroon, begintijd en respons op immunosuppressieve therapie aanwezig in het geval, wordt gespeculeerd dat de essentie van dergelijke toxische gebeurtenissen de immuunrespons van het lichaam is op het genetisch gemodificeerde product "mini -anti -spieratrofie -eiwit".
4. Dorsale wortel ganglion (DRG) toxiciteit. De toxiciteit van DRG met klinische manifestaties (abnormale hand- en voetsensatie) is alleen gemeld bij één patiënt met familiale laterale sclerose (ALS). Deze zaak ontving een intrathecale dosis van 4,2 x 1014 VG AAV -medicijn. De toxiciteit van DRG gerapporteerd in andere studies werd per ongeluk ontdekt tijdens de autopsie van AAV -medicijnen, en de proefpersonen hadden geen relevante klinische manifestaties vóór hun dood.
5. Abnormale MR -signalen van de hersenen. Een klinische studie werd gerapporteerd over de behandeling van late infantiele Batten -ziekte (CLN2 -ziekte) door bilaterale hersenparenchymale injectie van AAV -geneesmiddelen onder stereotaxische lokalisatie. Binnen 48 uur na injectie vertoonde het hoofdbrein van de persoon de MR van het onderwerp T2 hyperintensiteiten, diffusie-gewogen hyperintensiteiten en diffusie beperkte signalen gelokaliseerd op de injectieplaats. Daaropvolgende MR-follow-up toonde aan dat alle proefpersonen nieuwe T2-signaalgebieden ontwikkelden. De onderzoekers vonden geen klinische gevolgen geassocieerd met abnormale MR -signalen. Er wordt gespeculeerd dat de abnormale MR -signalen die vroeg na toediening verschijnen, gerelateerd zijn aan het aanhoudende weefseloedeem/ontsteking veroorzaakt door de hoogste concentratie van AAV -geneesmiddelen rond de tip van de injectiekatheter, terwijl de T2 -hoge signalen die later lijken, moeilijk zijn om te bepalen of ze verband houden met ziekteprogressie, AAV -geneesmiddelen of injectieprocedures.

Studies naar patiëntenmonsters (1 jaar na toediening) en niet-menselijke primaten (1 maand na injectie) hebben aangetoond dat de kans op AAV-integratie in het genoom laag is. Op basis van het veiligheidsrecord van AAV in klinische onderzoeken, is de huidige consensus op het gebied van gentherapie dat AAV een lage genetische toxiciteit bij mensen heeft.

Voorlopige preklinische veiligheidsevaluaties van AAV-MECP2 bij gehumaniseerde RTT-muizen en krab etende makaken toonden aan dat AAV-MECP2 geen schade aan lever- of nierfunctie, zenuwbeschadiging, immuuntoxiciteit of histopathologische veranderingen in belangrijke organen bij dieren veroorzaakte en de algemene toestand van de dieren goed was. Daarom duiden de bestaande gegevens van AAV-MECP2 niet aan duidelijke klinische risico's. De meest voorkomende bijwerkingen die worden verwacht voor proefpersonen die AAV-MECP2 ontvangen, kan graad 1/2 verhoging van leverenzymen zijn.

Risico's geassocieerd met preventieve immunosuppressie:

Dit protocol bepaalt dat vanaf een dag vóór AAV-MECP2-toediening, orale toediening van 1 mg/kg prednisolon of equivalente dosis andere glucocorticoïden moet worden gestart en de dosering ten minste 30 dagen moet worden gehandhaafd voordat ze langzaam verminderen. Het doel van het gebruik van glucocorticoïden is om de aangeboren en verworven immuunresponsen geïnduceerd door AAV -vectoren te onderdrukken en immuunreacties te verminderen die schadelijk zijn voor veiligheid en werkzaamheid. Bij het gebruik van hormonen zullen bijwerkingen, inclusief opportunistische infecties, worden gecontroleerd in de proefpersonen.

Corticosteroids (such as methylprednisolone and prednisone) have several clear side effects, including hypertension, tachycardia, congestive heart failure, changes in serum electrolytes, hyperglycemia, pain, elevated urea nitrogen and creatinine, osteoporosis and ischemic necrosis, decreased anti infective ability, dizziness, tremors, emotional instability, Slapeloosheid, misselijkheid, braken, gewichtstoename, verhoogde intraoculaire druk en de inductie van staar.

Tijdens het gebruik van hormonen zullen onderzoekers de bovengenoemde bijwerkingen nauwlettend volgen, met name opportunistische infecties die bij de proefpersonen kunnen optreden.

Statistische analyse Deze studie is een vroege dosis exploratiestudie met het hoofddoel van het evalueren van de veiligheid, daarom is geen formele berekening van de steekproefgrootte uitgevoerd.

De veiligheid en verdraagbaarheid van de behandeling worden geëvalueerd op basis van de frequentie en ernst van bijwerkingen die binnen een jaar na toediening plaatsvinden. Het aandeel onderwerpen met een AE, elke SAE, elke AE gerelateerd aan het onderzoeksgeneesmiddel, en elke ≥ graad 3 AE zal statistisch worden geanalyseerd als geheel en door systeemorganisatie (SOC) en voorkeurstermijn (PT), respectievelijk. De incidentie van bijwerkingen in verschillende dosiscohorten zal ook statistisch afzonderlijk worden geanalyseerd.

Vanwege de kleine steekproefomvang en de mogelijkheid van variërende effectiviteitsindicatoren bij proefpersonen in verschillende ziektefasen, zijn alle werkzaamheidsanalyses in deze studie beschrijvend en omvatten geen conerentiële statistieken.