Jednoznaczna AAV-MECP2 Bezpieczeństwo/tolerancja i skuteczność w zespole Rett

Tło badawcze:

Zespół Rett (RTT) jest wrodzonym zaburzeniem neurorozwojowym, które dotyczy głównie kobiet. Jego typowe objawy kliniczne obejmują zaprzestanie, a nawet regresję rozwoju nerwowego od 6-18 miesięcy po urodzeniu, utratę nabytych umiejętności, takich jak poznanie, umiejętności językowe i funkcjonowanie ręki, często towarzyszy stereotypowe ruchy rąk, nieprawidłowe rytmy oddechowe, napady i zaburzenia lękowe. RTT jest rzadką chorobą o częstości występowania około 1/10000-15000, co szacuje się, że stanowi ponad 10% niepełnosprawności intelektualnej. Ma to duży wpływ na pacjentów i ich rodziny, z poważnym uszkodzeniem ich funkcjonowania społecznego i bardzo złej jakości życia.

Około 90–95% typowych pacjentów z RTT i 40–50% atypowych pacjentów z RTT wykryło nieprawidłowości w genie 2 białka wiążącego metylację CPG (MECP2), a także mutacje lub delecje w genie MECP2. Ludzki gen MECP2 znajduje się na XQ28, a jego kodowane białko metylowane białko wiążące CpG 2 jest członkiem rodziny domeny metylacji. Jest to czynnik hamujący transkrypcję, który reguluje składanie RNA i jest kluczowym regulatorem epigenetycznym w mózgu, wpływającym na funkcję nerwową. W eksperymentach na zwierzętach stwierdzono, że myszy z niedoborem MECP2 wykazały znaczną poprawę objawów RTT po otrzymaniu suplementacji białka MECP2 za pomocą technologii inżynierii genetycznej.

W ostatnich latach sukces terapii genowej w chorobach nerwowo -mięśniowych, takich jak zanik mięśni kręgosłupa (SMA), wykazał wykonalność stosowania technologii terapii genowej w ludzkim ciele. Od 2021 r. Taysha i neurogen przeprowadzają badania kliniczne terapii genowej zespołu Retta. Obecnie 2 dorosłych pacjentów z RTT i 3 dzieci zakończyło podawanie, wykazując korzystny profil bezpieczeństwa. Nie było poważnych zdarzeń niepożądanych związanych z leczeniem i żadnych doniesień o toksyczności lub objawów nadekspresji MECP2.

Profesor Qiu Zilong, starszy badacz w Songjiang Research Institute of Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, prowadził długoterminowe badania nad RTT. W 2012 r. Odkryto, że MECP2 reguluje neuronalną plastyczność homeostazy synaptycznej; W 2014 r. Odkryto, że MECP2 reguluje przetwarzanie splicingu mikroRNA; Ustanowiony model transgeniczny krab MECP2 jedzący małpę w 2016 r.; W 2019 r. Zidentyfikowano neuronowy mechanizm myszy MECP2 i podjęto próbę interwencji edytowania genów; Ustanowić mapę myszy MECP2 myszy AAV Technologii Technologii Technologii w 2022 r. I złożyć wniosek o patent na wynalazek. Niezależnie rozwinięty AAV-MECP2 znacznie przedłużył długość życia myszy z nokautem MECP2 w eksperymentach wstrzyknięcia komory bocznej, a działanie terapeutyczne AAV-MECP2 z promotorem CAG był znacznie lepszy niż podobne produkty. Bezpieczeństwo i skuteczność podawania dooponowego u małpy badano przez 8 miesięcy, a rutyna krwi, biochemia krwi i wskaźniki czynników immunologicznych wykazały dobre bezpieczeństwo.

Podsumowując, RTT jest poważnym zaburzeniem neurorozwojowym, które stanowi wielką szkodę pacjentom, a obecnie nie ma skutecznej metody leczenia. Badanie kliniczne zapoczątkowane przez naszych badaczy ma na celu ocenę bezpieczeństwa, tolerancji i wstępnej skuteczności AAV-MECP2 w leczeniu zespołu Retta poprzez pojedyncze wstrzyknięcie do doeksu, które ma ważną wartość medyczną i społeczną. Bezpieczeństwo i skuteczność podawania dooponowego badano przez 8 miesięcy, a rutyna krwi, biochemia krwi i wskaźniki czynników immunologicznych wykazały dobre bezpieczeństwo.

Przegląd badań:

Ogólny projekt badań:

Wieloośrodkowe, pojedyncze ramię, pojedyncze badanie eksploracji dawki dooponowej AAV-MECP2 zapoczątkowane przez naukowców ma na celu zbadanie dwóch docelowych dawek, z trzema osobami włączonymi do każdej dawki, w celu oceny bezpieczeństwa, tolerancji i wstępnej skuteczności pojedynczego wstrzyknięcia dochodowego AAV-MECP2 w leczeniu RTT.

Populacja badań:

Dzieci w wieku 4-10 lat, u których zdiagnozowano RTT poprzez konsultacje w Departamencie Neurologii/Rozwoju Behawioralnym w Guangzhou Women and Children's Medical Center oraz Departament Zdrowia Dzieci Xiamen Children's Hospital.

Lokalizacja testu:

Totem badawczy Women and Children's Medical Center, Guangzhou Medical University

Kryteria wyjścia w połowie:

Członkowie rodziny mogą nadal wycofać się z badania po uzyskaniu świadomej zgody.

Kryteria oddziału/wykluczenia:

I. Pacjent musi dostosować leki leczone stosowane w okresie badania;

Ii. Podczas badania wymagane jest stosowanie leków/metod leczenia, które są zabronione w badaniu: podczas badania zakazano następujących jednoczesnych leków/leków:

• Leki stosowane w leczeniu zaburzeń mięśni lub chorób neurodegeneracyjnych (z wyłączeniem leków przeciwpadaczkowych).
• Lek stosowany w leczeniu cukrzycy.
• Immunosupresy (takie jak glukokortykoidy, cyklosporyna, takrolimus, metotreksat, cyklofosfamid, dożylna immunoglobulina, rytuksymab itp.) Rozpoczęto w ciągu 3 miesięcy przed włączeniem.
• W przypadku osób, które nie stosowali leków przeciwpadaczkowych lub planów leczenia rehabilitacji przed zapisaniem się, stosowali leki przeciwpadaczkowe lub wdrożyli plany leczenia rehabilitacji po zapisaniu się.

iii. Nie można uczestniczyć w leczeniu w szpitalu przez tydzień zgodnie z ustalonym planem leków; iv. Po komunikacji i koordynacji czasu oceny projektu nie można zakończyć; v. Jeśli w okresie badania wystąpią jakiekolwiek zdarzenia niepożądane, nieprawidłowości laboratoryjne lub inne schorzenia, a naukowcy uważają, że kontynuacja badania może zwiększyć ryzyko dla osób.

Liczba uczestników i metoda grupowania:

W grupie iniekcyjnej było 6 uczestników. Sześciu osób zostało włączonych do sekwencji, a jeden pacjent zakończył podawanie i nie zaobserwowano znaczącej toksyczności ograniczającej dawkę (DLT) podczas miesięcznego okresu obserwacji. Ten ostatni podmiot został zapisany do leku próbnego.

Definicja DLT: Każde z poniższych zdarzeń (oceniane według NCI CTCAE v5.0), które występują w ciągu 30 dni po podaniu i są określane przez badacza jako prawdopodobnie lub zdecydowanie związane z AAV-MECP2 (patrz 4.2 Negencja zdarzenia niepożądanego): ≥ zdarzenie niepożądane stopnia 3; Poziom 3 Nieprawidłowości laboratoryjne utrzymują się przez ≥ 7 dni z niezbędną interwencją medyczną; Poziom 4 Nieprawidłowość laboratoryjna.

Lek eksperymentalny:

Leki eksperymentalne: AAV-MECP2 ； Składnik aktywny: rekombinowany wektor terapii genowej AAV zawierający promotor specyficzny dla neuronów (CAG) MECP2; Akcesoria: 4-hydroksyetylopiperazyna kwas etanezulfonowy, chlorek potasu, chlorek sodu, chlorek wapnia, glukoza, poloksamer F68 i woda iniekcyjna; Forma dawkowania: wstrzyknięcie dooponowe; Wygląd: bezbarwny i przezroczysty płyn; Specyfikacja: Niezależnie zapakowana butelka penicyliny o miano 2 × 1014 Vg/ml i objętości 0,5 ml; Trasa podawania: wstrzyknięcie dooponowe; Częstotliwość administracji: 1 czas;

Kroki i metody badań:

1. Metoda interwencyjna: AAV-MECP2, rozcieńczona 20ml fizjologicznym solą fizjologiczną, dwiema dawkami eksploracyjnymi (dawka 1, dawka 2, szczegółowo poniżej), pojedyncze wstrzyknięcie dochodów;

   Dawkowanie narkotyków:

   Reguły badań dawki ewoluowały z tradycyjnego „projektu 3+3”. Dwa poziomy dawki przed ustalonymi w tym badaniu to: dawka 1 (7 × 1014Vg/osoba); Dawka 2 (1,5 × 1015Vg/osoba).

   Dwa poziomy dawki przed ustawionymi w tym badaniu są początkowym poziomem dawki dawki 1 i wyższy poziom dawki 2. Podczas procesu badawczego możliwe jest zbadanie poziomu dawki poniżej dawki 1 lub dawki pośredniej między dawką 1 a dawką 2 w oparciu o zgromadzone dane bezpieczeństwa i skuteczności, z zastrzeżeniem zatwierdzenia SRC.

   Na poziomie dawki 1 najpierw zapisano trzech pacjentów, a następnie w okresie obserwacji DLT zaobserwowano liczbę osób, które rozwinęły się DLT wśród trzech osób. W oparciu o liczbę osób obserwowanych jako DLT, zdecyduj, czy zwiększyć do następnej grupy dawki, utrzymać bieżącą grupę dawki, czy zmniejszyć się do grupy do niższej dawki.

   1. Jeśli żaden z trzech osób zapisanych do tej dawki nie rozwija DLT lub tylko jeden podmiot nie rozwija DLT, dawkę można zwiększyć do grupy wyższej dawki lub próba można zatrzymać (gdy jest już dawka 2).
   2. Jeżeli 2 z 3 osób zapisanych do tej dawki rozwinie się DLT, administracja nowych pacjentów zostanie zawieszona, dopóki SRC nie podejmie decyzji; W tym momencie, po kompleksowej oceny obecnych danych bezpieczeństwa i skuteczności, SRC zapewni jedną z następujących trzech rozdzielczości: ① Zmniejsz dawkę do niższej dawki i zapisuje trzy oceniane osoby; ② Dodaj 3 dodatkowe osoby, które można ocenić do obecnej dawki; ③ Zatrzymaj eksperyment.

   SRC oznacza komitet ds. Przeglądu bezpieczeństwa, odpowiedzialny za przegląd danych bezpieczeństwa przedmiotów, składających się z badaczy i współpracy monitorów medycznych. Podczas procesu badawczego SRC jest odpowiedzialny za ochronę bezpieczeństwa pacjentów, a jego obowiązki są następujące:

   Przejrzyj problemy bezpieczeństwa każdego uczestnika; Regularnie przeglądaj dane bezpieczeństwa, podczas gdy badani nadal otrzymują leczenie na studiach; Oceń, czy konieczne jest zwiększenie liczby pacjentów na każdym etapie i czy możliwe jest przejście do następnego etapu dawki, w tym eskalacji dawki lub redukcji dawki; Utrzymuj dane badań i wyniki poufne.

2. Zarządzanie narkotykami:

Dla wszystkich otrzymanych produktów interwencyjnych badawczy badacz lub wyznaczony personel muszą potwierdzić, że podczas transportu utrzymywane są odpowiednie warunki temperatury, a wszelkie niespójności zostały zgłoszone i rozwiązane przed zastosowaniem produktów interwencyjnych badawczych. Ten produkt badawczy jest pakowany w butelki penicylinowe i transportowany przez suchy lód. Po otrzymaniu go centrum badawcze przechowuje go na poziomie -75 ± 15 ℃.

Tylko zarejestrowani przedmioty mogą otrzymać interwencje badawcze, a tylko upoważnieni pracownicy centrum badawczego mogą prowadzić lub administrować interwencjami badawczymi. Wszystkie interwencje badawcze muszą być przechowywane w bezpiecznym, kontrolowanym środowisku i monitorowanym (ręcznym lub automatycznym) obszarze zgodnie ze wskazanymi warunkami przechowywania, a tylko badacze i upoważnieni pracownicy centrum badawczego mają dostęp do tego obszaru.

Badacz lub kierownik ds. Narkotyków w Centrum Badawczym liczy i weryfikuje produkty interwencyjne badawcze i utrzyma odpowiednie zapisy (tj. odbieranie i weryfikowanie dokumentacji oraz dokumentacji ostatecznego usuwania).

Ocena badań:

Program badawczy i jego harmonogram można znaleźć w „harmonogramie badań”. W tej tabeli zawiera wszystkie oceny i wykorzystuje „X” do przedstawienia ocen przeprowadzonych podczas każdej wizyty. Jeżeli podmiot nie jest w stanie udać się do centrum próbnego ze szczególnych powodów, podmiot lub ich przedstawiciel prawny może skontaktować się z personelem Centrum Trial za pomocą innych alternatywnych środków (takich jak telefon lub wirtualne wideo). Szczegóły zdarzeń niepożądanych i jednoczesnych leków należy gromadzić podczas komunikacji. W tym okresie uczestnicy mogą nie być w stanie uczestniczyć w testach laboratoryjnych i ocen klinicznych określonych podczas wizyty w badaniu, ale wszystkie istotne informacje powinny być szczegółowo zarejestrowane. Jeśli zbierane są dane laboratoryjne osób lub oceny kliniczne są przeprowadzane za pomocą alternatywnych metod, należy szczegółowo rejestrować odpowiednie informacje.

Pierwotne miary wyniku: wskaźniki bezpieczeństwa

1. Demografia/historia medyczna:

   I. Obecna historia medyczna: w tym podstawy diagnostyczne, powiązane objawy, historia rozwoju, obecne i przeszłe leczenie/stan leczenia itp.; ii. Historia innych chorób wewnętrznych lub chirurgicznych (zwłaszcza alergie na leki, uraz kręgosłupa itp.); iii. Nieprawidłowości w wieku ciążowym i badaniach prenatalnych; iv. Wcześniejsze hospitalizacje od urodzenia, w tym czas trwania hospitalizacji, powody, otrzymane leczenie i postęp choroby; Jeśli to możliwe, podaj informacje o kodowaniu ICD-10 dla każdej diagnozy hospitalizacji; v. Historia rodziny

2. Badanie fizyczne:

   I. Generalne badanie fizykalne obejmujące badanie neurologiczne należy przeprowadzić i zarejestrować podczas wyznaczonych wizyt, które powinny obejmować przynajmniej następującą zawartość: głowa/szyja, oczy, nos/gardło, układ sercowo -naczyniowy, płuca, brzuch, układ mięśniowo -szkieletowy, ośrodkowy układ nerwowy i skórę.

   ii. Znaki życiowe, wysokość i waga: Przed pomiarem objawów życiowych badani powinni spoczywać w cichym i niezakłóconym środowisku przez co najmniej 3 minuty, a następnie mierzyć w pozycji półprzewodnikowej, w tym temperaturę ciała, skurczowe i rozkurczowe ciśnienie krwi, szybkość oddechu, impuls i nasycenie tlenu we krwi.

   iii. Po dochodowym wstrzyknięciu AAV-MECP2 leż się płasko przez 6 godzin z usuniętą poduszką oraz mierz i rejestruj ciśnienie krwi, szybkość oddechu, nasycenie impulsu i tlenu co 15 minut (± 5 minut); Następnie monitoruj powyższe wskaźniki co godzinę (± 15 minut) do 6 godzin po dochodowym wstrzyknięciu AAV-MECP2.

   iv. W okresie badań przesiewowych należy zmierzyć wysokość i masy mierzona podczas wyznaczonych wizyt.

3. Badania laboratoryjne ： I. Rutyna moczu: grawitacja właściwa, wartość pH, glukoza, białko, krew, ciała ketonowe, bilirubina, urrobilinogen, azotyn, esteraza leukocytów (metoda papieru testowego), badanie mikroskopowe (jeśli wyniki testu krwi lub białka są nieprawidłowe).

   ii. Rutyna krwi: liczba czerwonych krwinek, hemoglobina, liczba płytek krwi, liczba białych krwinek i liczba klasyfikacji, hematokryt, średnia objętość korpusowa, średnie stężenie hemoglobiny korpusowej i liczba retikulocytów; iii. Biochemia krwi: aminotransferaza asparaganowa (AST), aminotransferaza alanina (ALT), transferaza glutamylowa gamma (GGT), fosfataza alkaliczna (ALP), całkowitą bilirubinę, bezpośrednią bilirubinę, całkowitą białko, kretininę, kretyninę, kretyninę, afilanem moczowy, potasium, sodu i wapnia.

   iv. Widmo enzymów mięśnia sercowego: kinaza kreatynowa (CK), izoenzym kinazy kreatynowej (CK-MB), dehydrogenaza hydroksybutyryanu (HBDH), dehydrogenaza mleczanowa (LDH) i wysokowydajność troponiny I (HSTNI).

   v. Funkcja koagulacji: aktywowany czas tromboplastyny ​​(APTT), czas protrombiny (PT), czas trombiny (TT), fibrynogen (FG, FIB) i D-dimer.

   vi. Funkcja immunologiczna: Liczba subpopulacji limfocytów krwi obwodowej:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Układ dopełniacza: Całkowita aktywność dopełniacza (CH50), aktywność C3 i kwantyfikacja, aktywność C4 i kwantyfikacja.

   VII. Cytokiny w surowicy obejmują: TNFα 、 IFN-γ 、 IL-10 、 IL-10.

4. Elektrokardiogram (EKG): Konwencjonalny 12 EKG ołowiu uzyskuje się przy użyciu urządzenia EKG, które może automatycznie obliczyć częstotliwość serca i mierzyć interwały PR, QRS, QT i QTC.
5. Echokardiografia: W okresie badania przesiewowego przeprowadzone przez nadtakowe badanie echokardiografii koloru zostanie zaplanowane w celu wykluczenia potencjalnych zmian sercowych i dysfunkcji serca. Badanie zostało zinterpretowane i przeanalizowane przez lekarzy ultradźwiękowych i kardiologów w Centrum Badawczym.
6. Prześwietlenie klatki piersiowej: W okresie badania przesiewowym badanie rentgenowskie klatki piersiowej jest prowadzone głównie w celu wykluczenia infekcji płucnych, które często występują u pacjentów. Jeśli trudno jest postawić wyraźną diagnozę zwykłego filmu, za zgodą opiekuna pacjenta, można wykonać dodatkowy skan CT klatki piersiowej.
7. Głowa MRI: W okresie badań przesiewowych konieczne jest wykrycie nieprawidłowości anatomicznych lub innych zmian w ośrodkowym układzie nerwowym, które należy wykluczyć. Dwa skany MRI na głowie zaplanowane w okresie obserwacji zastosowano do oceny toksyczności związanej z iniekcją AAV-MECP2 i monitorowaniem rozwoju ośrodkowego układu nerwowego.

Wtórne miary wyniku: ocena skuteczności

1. RTT specyficzne dla globalnego wrażeń klinicznych Wagi skali (CGI-S) i kliniczna globalna poprawa skali wrażeń (CGI-I);
2. Kwestionariusz oceny dotkliwości rett (RSSS);
3. Kwestionariusz zachowania zespołu Rett (RSBQ);
4. Zmieniona ocena zachowania ruchowego (R-MBA);
5. Skala funkcji ręcznego zespołu Rett (RSHFS);
6. Kwestionariusz nawyków snu dla dzieci;
7. Rett Parenting Stres Kwestionariusz;
8. Skala oceny rozwoju Griffiths - Wersja chińska (GDS -C): tylko względny wiek rozwojowy jest wykorzystywany jako ocena ważności. Jeśli wiek ma ponad 8 lat, a zdolność ma mniej niż 6 lat, nadal stosuje się ocenę GDS-C;
9. Skala obserwacyjna diagnozy autyzmu (ADOS);
10. Skala oceny zachowania adaptacyjnego dla dzieci w wieku 0-6 (wydanie drugie) - formularz oceny rodziców;
11. Nieprawidłowa skala zachowania (ABC);

12. Rekordy padaczki: Podczas badania uczestnicy strażnicy byli zobowiązani do rejestrowania występowania napadów, w tym wszystkich dat z napadami i bez napadów, w tym prezentacji, czasu trwania, częstotliwości i daty napadów. Noś go ze sobą podczas każdej wizyty kontrolnej dla naukowców, aby ocenić częstotliwość i czas trwania napadów padaczkowych.

    Częstotliwość napadów padaczkowych zostanie zdefiniowana przy użyciu uporządkowanych zmiennych z pięcioma kategoriami: wzrost, bez zmiany, 75% remisji, 50% remisji i braku napadów.

13. Dowody wideo: Krótkie nagrania wideo zostaną wykonane z procesu oceny pacjentów w okresie wyjściowym, okresu hospitalizacji leków oraz 1, 3, 6 i 12 miesięcy po wstrzyknięciu. Jeśli w innym czasie wystąpi nieprawidłowe zachowanie, naukowcy mogą również zdecydować o dodaniu dowodów wideo. Rodzice/opiekunowie prawni mogą również dostarczać domowe filmy z ulepszonymi funkcjami wyświetlania. Po zakończeniu nagrywania zespół badawczy natychmiast prześle film do zaszyfrowanego komputera lub laptopa i usunie plik wideo z karty pamięci kamery. Wszelkie wideo otrzymane przez stronę współpracującą zostanie uznane za poufne dane badawcze. Zespół badawczy i partnerzy będą odpowiedzialni za ochronę informacji tożsamości podmiotów i ich rodziców/opiekunów w nagraniu wideo.
14. Elektroencefalogram (EEG);
15. Opaska na rękę: rekordowe warunki snu;
16. Współczynnik różnicowania wzrostu 11 (GDF11) w płynie mózgowo -rdzeniowym: wydzielone białko transformującego czynnika wzrostu - nadrodziny β (TGF - β), wyrażane głównie w tkance mózgowej i negatywnie regulując neurogenezę podczas rozwoju i dorosłości. Mutacje w GDF11 mogą prowadzić do nieprawidłowości rozwojowych obejmujących układ czaszkowy, kręgosłupa i nerwowy. Ostatnie dowody sugerują, że gen GDF11 jest jednym z docelowych genów regulowanych przez MECP2: MECP2 reguluje ekspresję GDF11 poprzez indukowanie metylacji histonu wzmacniacza GDF11. U myszy RTT ekspresja GDF11 zmniejszyła się; Przeciwnie, u myszy MDS wzrosła ekspresja GDF11.

Poprzednie badania wykazały, że GDF11 jest wydzielany przez tkankę mózgową i można je wykryć we krwi. Dlatego ten eksperyment zbada zmiany poziomów GDF11 we krwi przed i po leczeniu.

Ocena immunogenności:

W celu oceny humoralnej i komórkowej odpowiedzi immunologicznej indukowanej przez kapsyd AAV9 Po podaniu, pobrano krew obwodową do wykrywania przeciwciał anty-AAV9 (metoda ELISA) i pobrano całą krew dla komórków przeciwpełnosobowych AAV, komórki Twantowe I IFN-γ enzymatyczne) Elispot). Immunogenne próbki krwi wysłano do wyznaczonych laboratoriów stron trzecich do testowania.

Profilaktyczne doustne podawanie prednizolonu:

Podawane doustnie 24 godziny przed leczeniem i utrzymywane zgodnie z przepisami dotyczącymi dawkowania i odstawienia do 9 tydzień po leczeniu.

Prawie wszystkie leki terapii genowej stosowane w ludzkim ciele, niezależnie od drogi podania, zaobserwowały odpowiedzi specyficzne dla antygenu 2-4 tygodnie po podaniu. Potencjalnymi niepożądanymi konsekwencjami tej reakcji są klirens transdukowanych komórek za pośrednictwem odporności i utrata ekspresji transgenicznej.

Aby złagodzić odpowiedź immunologiczną organizmu na leki terapii genowej AAV, osoby muszą przyjmować profilaktyczne doustne kortykosteroidy i stosować prednisolon 24 godziny przed wstrzyknięciem.

Podczas stosowania glukokortykoidów należy przeprowadzić regularne kontrole funkcji wątroby w celu ustalenia, czy leki można zmniejszyć, czy zatrzymać na podstawie wskaźników funkcji wątroby. Jeśli wartości GGT, AST lub ALT wynoszą ≥ 2 × ULN, naukowcy muszą zapewnić odpowiednie leczenie w oparciu o indywidualną sytuację osób. W oparciu o wcześniejsze doświadczenie kliniczne z zażywaniem narkotyków AAV okres wysokiego ryzyka dla odbicia enzymu wątroby wynosi w ciągu 2 tygodni od redukcji lub przerwania hormonów. Dlatego monitorowanie funkcji wątroby należy wzmocnić na tym etapie. W przypadku wyżej wymienionego planu stosowania i redukcji prednisolonu naukowcy mogą dokonać spersonalizowanych korekt w oparciu o ocenę bezpieczeństwa badanych. Oprócz funkcji wątroby można również wziąć pod uwagę wyniki monitorowania obwodowych komórek T specyficznych dla antygenu krwi, a w razie potrzeby można dodać inne środki immunosupresyjne. Jeśli zastosowane glukokortykoidy są preparatami innych niż prednizolon, plan dawki i odstawienia należy sformułować na podstawie równoważnej dawki prednisolonu po konwersji.

Świadoma zgoda:

Dzieci w wieku poniżej 8 lat uczestniczących w badaniach klinicznych powinny uzyskać podpisany formularz świadomej zgody od swojego opiekuna i powinny być informowane o odpowiednich informacjach o badaniu klinicznym w zakresie, które badani mogą zrozumieć. Gdy dziecko ma zdolność do podjęcia decyzji o zgodzie uczestnictwa w badaniu klinicznym, należy również uzyskać własną zgodę; Dzieci w wieku powyżej 8 lat (w tym 8 lat) uczestniczących w badaniach klinicznych, jeśli mają możliwość podpisania formularza świadomej zgody, zarówno oni, jak i ich strażnicy powinni podpisać formularz świadomej zgody. Jeśli nie mają możliwości podpisania formularza świadomej zgody, ich opiekunowie powinni podpisać formularz świadomej zgody.

Niekorzystne zdarzenia medyczne i zabiegi inne niż jednocześnie:

Leki/leki występujące w wyniku podpisania formularza świadomej zgody do czasu pierwszego podawania zostaną zarejestrowane jako historia medyczna/współistniejące i historia leczenia w ECRF i nie powinny być rejestrowane na stronie AE i towarzyszące leku; O ile uszkodzenie/uszkodzenie nie jest spowodowane procedurami klinicznego badania laboratoryjnego, należy je rejestrować jako AE na stronie AE oraz w przypadku innych leczenia innych niż jednoczesne leki/leki dla tego AE, należy je odpowiednio zarejestrować na stronie leku/leczenia.

Konkretna droga techniczna jest szczegółowo opisana w harmonogramie badań.

Oczekiwane reakcje niepożądane i metody leczenia:

Ryzyko związane z uczestnikami tego badania obejmują głównie ryzyko związane z procedurami podawania leków (nakłucie osłony), ryzyko związane z badanym lekiem AAV-MECP2 oraz ryzyko związane z profilaktyczną immunosupresją.

Ryzyko związane z nakłuciem wtrysku osłony:

1) Kłucie wtrysku osłony jest ogólnie uważane za bezpieczne, a wybrani pacjenci przejdą skanowanie rezonansu magnetycznego (MRI) przed nakłucie lędźwiowym, aby wykluczyć możliwość zajęcia przestrzeni wewnątrzczaszkowej (szczególnie w tylnej części dolnej) lub zwiększonej ciśnienia wewnątrzczaszkowego. Możliwe ryzyko nakłucia lędźwiowego obejmuje: Ból głowy po nakłuciu lędźwiowej: pacjenci poddawani nakłucie lędźwiowym doświadczają bólu głowy z powodu infiltracji płynów do pobliskich tkanek po nakłucie. Bóle głowy zwykle zaczynają się w ciągu kilku godzin do dwóch dni po operacji i mogą im towarzyszyć nudności, wymioty i zawroty głowy. Bóle głowy zwykle występują podczas siedzenia lub stojącego i można je uwolnić podczas leżenia. Bóle głowy po nakłuciu lędźwiowej mogą trwać kilka godzin do tygodnia lub dłużej.

ii. Dyskomfort lub ból z tyłu: w dolnej części pleców może występować ból lub tkliwość. Ból może rozprzestrzeniać się na tył nogi.

iii. Krwawienie: krwawienie w pobliżu miejsca nakłucia lub w rzadkich przypadkach może wystąpić w przestrzeni zewnątrzoponowej.

Podawanie leków w tym badaniu przeprowadzono wykwalifikowanych lekarzy w szpitalnym pokoju leczenia. Przed wstrzyknięciem obszar wstrzyknięcia został zdezynfekowany i pokryty szmatką. Po wstrzyknięciu wykonano hemostazę dezynfekcji i kompresji, a pacjent przykuł łóżko przez 6 godzin z usuniętą poduszką. Po operacji osoby będą ściśle monitorowani, aby zapewnić, że wszelkie możliwe powikłania zostaną wykryte i leczone w odpowiednim czasie.

Ryzyko związane z AAV-MECP2:

Podmiot może doświadczać reakcji alergicznych na AAV-MECP2. Ze względu na odpowiedź immunologiczną wywołaną przez dooponowe wstrzyknięcie AAV, badani zwykle nie są w stanie otrzymać innych terapii genowych dostarczanych przez wektory AAV tego samego serotypu.

Obecnie istnieją trzy badania kliniczne (NCT05317780, NCT05419492 i NCT04833970) zarejestrowane na ClinicalTrials.gov.gov.gov.govs Witryna do podawania leków AAV do komory bocznej w przypadku chorób ośrodkowego układu nerwowego, ale dane kliniczne bezpieczeństwa lub skuteczności nie zostały jeszcze ujawnione. AVXS-101 to dooponowa wersja terapii genowej SMA Zolgensma. Badanie eskalacji dawki fazy 1 przeprowadzone u osób w wieku 6-60 miesięcy wykazało, że AVXS-101 był bezpieczny i dobrze tolerowany, gdy podawano do montażu przy maksymalnej dawce 2,4 × 1014 Vg/osobę, przy czym tylko jeden podmiot doświadcza podwyższonego poziomu transaminazy bez podwyższonej bilirubiny; Jeden podmiot doświadczył trombocytopenii (liczba poniżej 75 × 109/l), która rozstrzygnęła spontanicznie bez interwencji.

Poniżej podsumowuje poważne działania niepożądane (zdarzenia) zgłoszone w lekach AAV, które zostały sprzedawane lub w badaniach klinicznych:

1. Hepatotoksyczność. Zgłoszono o dożylnym wstrzyknięciu leków AAV do leczenia SMA, dystrofii mięśniowej Duchenne (DMD) i miopatii połączonej X (XLMTM). Występowanie hepatotoksyczności jest istotnie skorelowane z dawką podawanego leku, a ciężkie przypadki hepatotoksyczności obserwuje się tylko u osób otrzymujących dawki AAV> 5 × 1013VG. Z wyjątkiem toksyczności wątroby w XLMTM, który jest uważany za związany z leżącą u podstaw choroby wątroby pacjenta, opublikowany mechanizm innych przypadków toksyczności wątroby jest uważany za uszkodzenie komórek wątroby za pośrednictwem komórek T CD8+ukierunkowanych na AAV.
2. Zakrzepowa choroba mikronaczyniowa. Zgłoszone w leczeniu SMA i DMD z dożylnym wstrzyknięciem leków AAV, występowanie tego zdarzenia jest również zależne od dawki, a wszystkie przypadki byli osobami, które otrzymali dawki AAV ≥ 5 × 1013Vg. Ze względu na obecność laboratoryjnych dowodów aktywacji dopełniacza w wielu z tych przypadków uważa się, że ich występowanie jest związane z aktywacją układu dopełniacza przez kompleksy przeciwciał antygenowych ukierunkowanych na AAV.
3. Zapalenie mięśnia sercowego i zapalenie mięśni. Zgłoszono tylko o dożylnym wstrzyknięciu leków AAV w DMD. W oparciu o specyficzny wzór mutacji genu DMD, czas początku i odpowiedź na terapię immunosupresyjną obecną w przypadku, spekuluje się, że istotą takich toksycznych zdarzeń jest odpowiedź immunologiczna ciała na genetycznie zmodyfikowany produkt „mini białko przeciwprzepięciowe przeciw mięśniom”.
4. Toksyczność zwoju korzenia grzbietowego (DRG). Toksyczność DRG z objawami klinicznymi (nieprawidłowe uczucie dłoni i stopy) odnotowano tylko u jednego pacjenta z rodzinnym stwardnieniem bocznym (ALS). Ta sprawa otrzymała dawkę dooponową 4,2 × 1014 Vg leku AAV. Toksyczność DRG zgłoszona w innych badaniach została przypadkowo odkryta podczas sekcji zwłok leków AAV, a osoby nie mieli istotnych objawów klinicznych przed ich śmiercią.
5. Nieprawidłowe sygnały MR mózgu. Zgłoszono badanie kliniczne na temat leczenia późnej choroby battenu niemowlęcego (choroba CLN2) przez obustronne wstrzyknięcie miąższowe mózgu leków AAV w ramach stereotaktycznej lokalizacji. W ciągu 48 godzin po wstrzyknięciu mózg głowy MR badanego wykazywał hiperintensywności T2, hiperintensywności ważonych dyfuzyjnymi i dyfuzyjne sygnały zlokalizowane w miejscu wstrzyknięcia. Późniejsza obserwacja MR wykazała, że ​​wszyscy pacjenci opracowali nowe obszary wysokiego sygnału T2. Naukowcy nie znaleźli żadnych następstw klinicznych związanych z nieprawidłowymi sygnałami MR. Spekuluje się, że nieprawidłowe sygnały MR, które pojawiają się wcześnie po podaniu, są związane z trwałym obrzękiem tkanki/stanu zapalnym spowodowanym najwyższym stężeniem leków AAV wokół końcówki cewnika wtryskowego, podczas gdy wysokie sygnały T2, które później pojawiają się później, są trudne do ustalenia, czy są one powiązane z postępem choroby, lekami AAV lub procedurami wstrzyknięcia.

Badania próbek pacjentów (1 rok po podaniu) i naczelnych innych niż ludzkie (1 miesiąc po wstrzyknięciu) wykazały, że prawdopodobieństwo integracji AAV z genomem jest niskie. W oparciu o zapis bezpieczeństwa AAV w badaniach klinicznych obecny konsensus w dziedzinie terapii genowej jest taki, że AAV ma niską toksyczność genetyczną u ludzi.

Wstępne przedkliniczne oceny bezpieczeństwa AAV-MECP2 u myszy humanizowanych RTT i kraba macque z jedzenia kraba wykazały, że AAV-MECP2 nie powodowało uszkodzenia czynności wątroby lub nerek, uszkodzeń nerwów, toksyczności immunologicznej lub zmian histopatologicznych u ważnych organów u zwierząt, a ogólny stan zwierząt. Dlatego istniejące dane AAV-MECP2 nie wskazują na wyraźne ryzyko kliniczne. Najczęstszym zdarzeniem niepożądanym oczekiwanym dla osób otrzymujących AAV-MECP2 może być wysokość enzymów wątroby 1/2.

Ryzyko związane z zapobiegawczą immunosupresją:

Ten protokół określa, że ​​od jednego dnia przed podaniem AAV-MECP2 należy uruchomić doustne podawanie prednisolonu 1 mg/kg lub równoważną dawkę innych glukokortykoidów, a dawkę należy utrzymywać przez co najmniej 30 dni przed powolnym zmniejszeniem. Celem stosowania glukokortykoidów jest tłumienie wrodzonych i nabytych odpowiedzi immunologicznych indukowanych przez wektory AAV oraz zmniejszenie reakcji immunologicznych, które są szkodliwe dla bezpieczeństwa i skuteczności. Podczas stosowania hormonów zdarzenia niepożądane związane z hormonami, w tym infekcje oportunistyczne, będą monitorowane u pacjentów.

Kortykosteroidy (takie jak metylopredolon i prednizon) mają kilka wyraźnych skutków ubocznych, w tym nadciśnienie, tachykardia, zastoczątą niewydolność serca, zmiany w elektrolicie w surowicy, hiperglikemia, ból, podwyższony azot mocznikowy i kreatynina, osteopor i osteoporoza i niedokrwienna martwica. Nudności, wymioty, przyrost masy ciała, podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe i indukcja zaćmy.

Podczas korzystania z hormonów badacze będą ściśle monitorować wyżej wymienione zdarzenia niepożądane, zwłaszcza infekcje oportunistyczne, które mogą wystąpić u osób.

Analiza statystyczna To badanie jest badaniem wczesnego badania dawki z głównym celem oceny bezpieczeństwa, a zatem nie przeprowadzono formalnego obliczania wielkości próby.

Bezpieczeństwo i tolerancja leczenia ocenia się na podstawie częstotliwości i nasilenia zdarzeń niepożądanych występujących w ciągu jednego roku po podaniu. Odsetek pacjentów z dowolnym AE, dowolnym SAE, dowolnym AE związanym z lekiem badawczym i dowolnym ≥ klasy 3 AE będzie statystycznie analizowany jako odpowiednio jako całość i przez klasy narządów systemowych (SOC) i preferowany termin (PT). Częstość występowania zdarzeń niepożądanych w różnych kohortach dawki będzie również statystycznie analizowana osobno.

Ze względu na niewielką wielkość próby i możliwość różnych wskaźników skuteczności wśród osób na różnych etapach chorób, wszystkie analizy skuteczności w tym badaniu są opisowe i nie obejmują statystyki wnioskowania.