Sécurité / tolérabilité AAV-MECP2 à dose unique dans le syndrome de Rett

Contexte de recherche:

Le syndrome de Rett (RTT) est un trouble neurodéveloppemental congénital qui affecte principalement les femmes. Ses manifestations cliniques typiques comprennent la cessation ou même la régression du développement neuronal de 6 à 18 mois après la naissance, la perte de compétences acquises telles que la cognition, la capacité du langage et la fonction de la main, souvent accompagnée de mouvements de main stéréotypés, de rythmes respiratoires anormaux, de convulsions et de troubles de l'anxiété. RTT est une maladie rare avec un taux d'incidence d'environ 1 / 10000-15000, qui devrait représenter plus de 10% de la déficience intellectuelle féminine. Cela a un grand impact sur les patients et leurs familles, avec de graves dommages à leur fonctionnement social et une très mauvaise qualité de vie.

Environ 90 à 95% des patients atteints de RTT typiques et 40 à 50% des patients atteints de RTT atypiques ont détecté des anomalies dans le gène codant pour la protéine de liaison au CPG de méthylation (MECP2), ainsi que des mutations ou des délétions dans le gène MECP2. Le gène MECP2 humain est situé à XQ28, et sa protéine de liaison au CPG méthylée en protéine codée est un membre de la famille du domaine de méthylation. Il s'agit d'un facteur inhibiteur de la transcription qui régule l'épissage de l'ARN et est un régulateur épigénétique clé dans le cerveau, affectant la fonction neuronale. Dans les expériences animales, il a été constaté que les souris déficientes en MECP2 ont montré une amélioration significative des symptômes de RTT après avoir reçu la supplémentation en protéine MECP2 par le biais de la technologie de génie génétique.

Ces dernières années, le succès de la thérapie génique dans les maladies neuromusculaires telles que l'atrophie musculaire spinale (SMA) a démontré la faisabilité de l'application de la technologie de thérapie génique dans le corps humain. Depuis 2021, Taysha et le neurogène ont mené des essais cliniques de thérapie génique pour le syndrome de Rett. Actuellement, 2 patients atteints de RTT adultes et 3 enfants ont terminé l'administration, démontrant un profil de sécurité favorable. Il n'y a eu aucun événement indésirable grave lié au traitement et aucun rapport de toxicité ou de symptômes de surexpression de MECP2.

Le professeur Qiu Zilong, chercheur principal à l'Institut de recherche de Songjiang de l'école de médecine de l'Université Shanghai Jiao Tong, a mené des recherches à long terme sur RTT. En 2012, il a été découvert que MECP2 régule la plasticité de l'homéostasie synaptique neuronale; En 2014, il a été découvert que MECP2 régule le traitement d'épissage des microARN; Établi le modèle animal transgénique de crabe transgénique mecp2 en 2016; En 2019, le mécanisme neuronal des souris MECP2 a été identifié et une thérapie d'intervention d'édition de gènes a été tentée; Établir une feuille de route de la technologie de thérapie génique de la gène MECP2 Mutant Mutant en 2022 et demandez un brevet d'invention. L'AAV-MECP2 développé indépendamment a considérablement prolongé la durée de vie des souris knockout MECP2 dans des expériences d'injection de ventricule latérales, et l'effet thérapeutique de l'AAV-MECP2 avec le promoteur CAG était significativement meilleur que les produits similaires. L'innocuité et l'efficacité de l'administration intrathécale chez le singe ont été testées pendant 8 mois, et la routine sanguine, la biochimie sanguine et les indicateurs de facteurs immunitaires ont tous montré une bonne sécurité.

En résumé, RTT est un trouble neurodéveloppemental grave qui fait du mal aux patients, et il n'y a actuellement pas de méthode de traitement efficace. L'essai clinique initié par nos chercheurs vise à évaluer la sécurité, la tolérabilité et l'efficacité préliminaire de l'AAV-MECP2 dans le traitement du syndrome de Rett par une seule injection intrathécale, qui a une valeur médicale et sociale importante. L'innocuité et l'efficacité de l'administration intrathécale ont été testées pendant 8 mois, et la routine sanguine, la biochimie sanguine et les indicateurs de facteurs immunitaires ont tous montré une bonne sécurité.

Aperçu de la recherche:

Conception globale de la recherche:

Une étude multicentrique, un seul bras et une étude de dose intrathécale unique de l'AAV-MECP2 initiée par les chercheurs vise à explorer deux doses cibles, avec trois sujets inscrits à chaque dose, pour évaluer la sécurité, la tolérabilité et l'efficacité préliminaire de l'injection intrathécale unique de AAV-MECP2 dans le traitement du RTT.

Population d'étude:

Enfants âgés de 4 à 10 ans qui ont été diagnostiqués avec RTT par consultation au Département de neurologie / développement du comportement de Guangzhou Women and Children's Medical Center et du Child Health Department of Xiamen Children's Hospital.

Emplacement du test:

RECHERCHE Ward of Women and Children's Medical Center, Guangzhou Medical University

Critères de sortie à mi-chemin:

Les membres de la famille peuvent toujours se retirer de l'étude après avoir obtenu un consentement éclairé.

Critères de détachement / exclusion:

je. Le patient doit ajuster le médicament de traitement utilisé pendant la période d'étude;

Ii Au cours de l'étude, l'utilisation de médicaments / traitements qui sont interdits de l'étude sont nécessaires: pendant l'étude, les médicaments / traitements concomitants suivants sont interdits:

• Médicaments utilisés pour traiter les troubles musculaires ou les maladies neurodégénératives (à l'exclusion des médicaments antiépileptiques).
• Un médicament utilisé pour traiter le diabète.
• Les immunosuppresseurs (tels que les glucocorticoïdes, la cyclosporine, le tacrolimus, le méthotrexate, le cyclophosphamide, l'immunoglobuline intraveineuse, le rituximab, etc.) ont été lancés dans les 3 mois avant l'inscription.
• Pour ceux qui n'ont pas utilisé de médicaments antiépileptiques ou de plans de traitement de réadaptation avant l'inscription, ils ont utilisé des médicaments antiépileptiques ou mis en œuvre des plans de traitement de réadaptation après l'inscription.

iii. Impossible d'assister à un traitement à l'hôpital pendant une semaine selon le plan de médicaments établi; iv. Après la communication et la coordination du temps, l'évaluation du projet ne peut pas être terminée; v. Si des événements indésirables, des anomalies de laboratoire ou d'autres conditions médicales se produisent pendant la période d'étude et des mesures appropriées sont prises, les chercheurs pensent que la poursuite de l'essai peut augmenter le risque pour les sujets.

Nombre de participants et méthode de regroupement:

Il y avait 6 participants dans le groupe d'injection. Six sujets ont été inscrits à l'essai en séquence, un patient terminant l'administration et aucune dose significative limitant la toxicité (DLT) observée lors d'un suivi d'un mois. Ce dernier sujet a été inscrit au médicament d'essai.

Définition du DLT: L'un des événements suivants (classé selon NCI CTCAE V5.0) qui se produisent dans les 30 jours suivant l'administration et sont déterminés par le chercheur à être peut-être ou définitivement liés à AAV-MECP2 (voir 4.2 Événement indésirable Gravité): ≥ 3 grade 3 Événement indésirable; Les anomalies de laboratoire de niveau 3 persistent pendant ≥ 7 jours avec une intervention médicale nécessaire; Niveau 4 Anomalie du laboratoire.

Médicament expérimental:

Médicament expérimental: AAV-MECP2 ； Ingrédient actif: vecteur de thérapie du gène AAV recombinant contenant MECP2 entraîné par le promoteur spécifique au promoteur (CAG); Accessoires: 4-hydroxyéthylpipérazine acide éthanesulfonique, chlorure de potassium, chlorure de sodium, chlorure de calcium, glucose, poloxamère F68 et eau d'injection; Forme posologique: injection intrathécale; Apparence: liquide incolore et transparent; Spécification: bouteille de pénicilline emballée indépendamment, avec un titre de 2 × 1014 VG / ml et un volume de 0,5 ml; Itinéraire d'administration: injection intrathécale; Fréquence d'administration: 1 temps;

Étapes et méthodes de recherche:

1. Méthode d'intervention: AAV-MECP2, diluée avec une solution saline physiologique de 20 ml, deux doses exploratoires (dose 1, dose 2, détaillée ci-dessous), injection intrathécale unique;

   Dosage de médicament:

   Les règles d'exploration de dose ont évolué à partir de la conception traditionnelle "3 + 3". Les deux niveaux de dose prédéfinis pour cette étude sont: la dose 1 (7 × 1014vg / personne); Dose 2 (1,5 × 1015vg / personne).

   Les deux niveaux de dose prédéfinis dans cette étude sont le niveau de dose initial de dose 1 et un niveau de dose plus élevé de dose 2. Pendant le processus de recherche, il est possible d'explorer un niveau de dose inférieur à la dose 1 ou une dose intermédiaire entre la dose 1 et la dose 2 sur la base des données accumulées de sécurité et d'efficacité, sous réserve de l'approbation du SRC.

   Au niveau de la dose 1, trois sujets ont été inscrits en premier, puis pendant la période d'observation du DLT, le nombre de sujets qui a développé du DLT parmi les trois sujets a été observé. Sur la base du nombre de sujets observés comme ayant du DLT, décider de passer à la prochaine dose, de maintenir le groupe de dose actuel ou de diminuer à un groupe de dose plus faible.

   1. Si aucun des trois sujets inscrits à cette dose ne développe un DLT ou qu'un seul sujet développe un DLT, la dose peut être augmentée à un groupe de dose plus élevé ou que l'essai peut être arrêté (lorsqu'il s'agit déjà de la dose 2).
   2. Si 2 des 3 sujets inscrits à cette dose développent un DLT, l'administration à de nouveaux sujets sera suspendue jusqu'à ce que SRC prenne une décision; À ce stade, après une évaluation complète des données actuelles de sécurité et d'efficacité, SRC fournira l'une des trois résolutions suivantes: ① Réduire la dose à une dose plus faible et inscrire trois sujets imposables; ② Ajouter 3 sujets évaluables supplémentaires à la dose actuelle; ③ Arrêtez l'expérience.

   SRC signifie le comité d'examen de la sécurité, responsable de l'examen des données de sécurité des sujets, des chercheurs et des moniteurs médicaux en collaboration. Au cours du processus de recherche, SRC est responsable de la protection de la sécurité des sujets, et ses responsabilités sont les suivantes:

   Passez en revue les problèmes de sécurité de chaque participant; Examiner régulièrement les données de sécurité pendant que les sujets continuent de recevoir un traitement d'étude; Évaluer s'il est nécessaire d'élargir le nombre de sujets à chaque étape et s'il est possible de passer au stade de dose suivant, y compris l'escalade de dose ou la réduction de la dose; Gardez les données de recherche et les résultats confidentiels.

2. Gestion des médicaments:

Pour tous les produits d'intervention de recherche reçus, le chercheur ou le personnel désigné doit confirmer que les conditions de température appropriées sont maintenues pendant le transport, et toute incohérence a été signalée et résolu avant d'utiliser les produits d'intervention de recherche. Ce produit de recherche est emballé dans des bouteilles de pénicilline et transporté par glace sec. Après l'avoir reçu, le centre de recherche le stocke à -75 ± 15 ℃.

Seuls les sujets inscrits peuvent recevoir des interventions de recherche et seul le personnel du centre de recherche autorisé peut fournir ou administrer des interventions de recherche. Toutes les interventions de recherche doivent être stockées dans une zone sûre, contrôlée par l'environnement et surveillé (manuellement ou automatiquement) selon les conditions de stockage indiquées, et seuls les chercheurs et le personnel du centre de recherche autorisé ont accès à la région.

Le chercheur ou le gestionnaire de médicaments du centre de recherche doit compter et vérifier les produits d'intervention de recherche et conserver des enregistrements pertinents (c'est-à-dire recevoir et vérifier les dossiers et les dossiers d'élimination finale).

Évaluation de la recherche:

Le programme de recherche et son calendrier se trouvent dans le «calendrier de recherche». Ce tableau répertorie toutes les évaluations et utilise "x" pour représenter les évaluations effectuées à chaque visite. Si le sujet n'est pas en mesure d'aller au centre d'essai pour des raisons spéciales, le sujet ou son représentant légal peut contacter le personnel du centre d'essai par d'autres moyens alternatifs (tels que le téléphone ou la vidéo virtuelle). Les détails des événements indésirables et des médicaments concomitants doivent être collectés pendant la communication. Au cours de cette période, les participants peuvent ne pas être en mesure de participer aux tests de laboratoire et aux évaluations cliniques spécifiées lors de la visite de l'étude, mais toutes les informations pertinentes doivent être enregistrées en détail. Si les données de laboratoire des sujets sont collectées ou si des évaluations cliniques sont effectuées par des méthodes alternatives, des informations pertinentes doivent être enregistrées en détail.

Mesures des résultats primaires: indicateurs de sécurité

1. Démographie / antécédents médicaux:

   je. Antécédents médicaux présents: y compris la base diagnostique, les symptômes connexes, les antécédents de développement, l'état de traitement des médicaments / récupération actuel et passé, etc. ii Antécédents d'autres maladies internes ou chirurgicales (en particulier les allergies médicamenteuses, les traumatismes vertébraux, etc.); iii. Anomalies de l'âge gestationnel et des examens prénatals; iv. Hospitalisations antérieures depuis la naissance, y compris la durée de l'hospitalisation, les raisons, le traitement reçu et la progression de la maladie; Si possible, fournissez des informations de codage ICD-10 pour chaque diagnostic d'hospitalisation; v. Antécédents familiaux

2. Examen physique:

   je. L'examen physique general, y compris l'examen neurologique, doit être effectué et enregistré lors de visites désignées, qui devraient inclure au moins le contenu suivant: tête / cou, yeux, oreilles, nez / gorge, système cardiovasculaire, poumons, abdomen, système musculo-squelettique, système nerveux central et peau.

   ii Signes vitaux, hauteur et poids: Avant de mesurer les signes vitaux, les sujets doivent reposer dans un environnement silencieux et non perturbé pendant au moins 3 minutes, puis mesurer dans une position semi-couchée, y compris la température corporelle, la pression artérielle systolique et diastolique, la fréquence respiratoire, le pouls et la saturation en oxygène sanguin.

   iii. Après l'injection intrathécale d'AAV-MECP2, se trouvent à plat pendant 6 heures avec l'oreiller enlevé et mesure et enregistre la pression artérielle, la fréquence respiratoire, le pouls et la saturation en oxygène toutes les 15 minutes (± 5 minutes); Ensuite, surveillez les indicateurs ci-dessus toutes les heures (± 15 minutes) jusqu'à 6 heures après l'injection intrathécale d'AAV-MECP2.

   iv. Pendant la période de dépistage, la hauteur doit être mesurée et le poids mesuré lors des visites désignées.

3. Investigations en laboratoire: i. Routine urinaire: gravité spécifique, valeur de pH, glucose, protéine, sang, corps cétone, bilirubine, urobilinogène, nitrite, leucocyte estérase (méthode du papier de test), examen microscopique (si les résultats du sang ou des protéines sont anormaux).

   ii Routine sanguine: nombre de globules rouges, hémoglobine, nombre de plaquettes, nombre de globules blancs et nombre de classification, hématocrite, volume corpusculaire moyen, concentration moyenne d'hémoglobine corpusculaire et nombre de réticulocytes; iii. Biochimie sanguine: aspartate aminotransférase (AST), alanine aminotransférase (ALT), gamma glutamyl transférase (GGT), alcaline phosphatase (ALP), bilirubine totale, bilirubine directe, protéine totale, créatinine, ua-nitroge, potassium, sodium, sodium et calcium.

   iv. Le spectre enzymatique myocardique: créatine kinase (CK), isoenzyme de la créatine kinase (CK-MB), hydroxybutyrate déshydrogénase (HBDH), lactate déshydrogénase (LDH) et trroponine I (hstni).

   V

   vi. Fonction immunitaire: Nombre de sous-population de lymphocytes sanguins périphériques:% CD3 、% CD4 、% CD8 、 CD4 / CD8 、% CD19 、% CD16CD56 ； Système de complément: activité totale du complément (CH50), activité et quantification C3, activité et quantification C4.

   vii. Les cytokines sériques comprennent: TNFα 、 IFN-γ 、 IL-10 、 IL-10.

4. Électrocardiogramme (ECG): un ECG à 12 plomb conventionnel est obtenu à l'aide d'un dispositif ECG qui peut calculer automatiquement la fréquence cardiaque et mesurer les intervalles PR, QR, QT et QTC.
5. Échocardiographie: Pendant la période de dépistage, un examen d'échocardiographie des couleurs transthoraciques sera prévu pour exclure les lésions cardiaques potentielles et le dysfonctionnement cardiaque. L'examen a été interprété et analysé par des médecins échographiques et des cardiologues du centre de recherche.
6. Radiographie thoracique: Pendant la période de dépistage, l'examen des rayons X thoraciques est principalement effectué pour exclure les infections pulmonaires qui se produisent fréquemment chez les patients. S'il est difficile de faire un diagnostic clair sur un film simple, avec le consentement du tuteur du sujet, un scan simple de tomodensitométrie thoracique supplémentaire peut être effectué.
7. IRM de tête: Pendant la période de dépistage, un scan simple de l'IRM à la tête est nécessaire pour détecter toute anomalie anatomique ou d'autres lésions du système nerveux central qui doivent être exclues. Deux scans IRM à tête prévus pendant la période de suivi ont été utilisés pour évaluer la toxicité associée à l'injection AAV-MECP2 et surveiller le développement du système nerveux central.

Mesures des résultats secondaires: évaluation de l'efficacité

1. La gravité d'échelle des impressions mondiales cliniques spécifiques à RTT (CGI-S) et l'amélioration des échelles des impressions mondiales cliniques (CGI-I);
2. Questionnaire d'évaluation de la gravité RETT (RSSS);
3. Questionnaire sur le comportement du syndrome de Rett (RSBQ);
4. Évaluation révisée du comportement moteur (R-MBA);
5. Échelle de fonction de la main du syndrome Rett (RSHFS);
6. Questionnaire sur les habitudes de sommeil des enfants;
7. Rett Parenting Stress Questionnaire;
8. Griffiths Échelle d'évaluation du développement - Version chinoise (GDS-C): seul l'âge de développement relatif est utilisé comme évaluation de validité. Si l'âge a plus de 8 ans et que la capacité a moins de 6 ans, l'évaluation GDS-C est toujours utilisée;
9. Échelle d'observation du comportement de diagnostic de l'autisme (ADOS);
10. Échelle d'évaluation du comportement adaptatif pour les enfants de 0 à 6 ans (deuxième édition) - Formulaire d'évaluation des parents;
11. Échelle de comportement aberrant (ABC);

12. Records d'épilepsie: Au cours de l'étude, les tuteurs de sujets devaient enregistrer la survenue de crises, y compris toutes les dates avec et sans crises, y compris la présentation, la durée, la fréquence et la date de crise. Emportez-le avec vous à chaque visite de suivi pour les chercheurs afin d'évaluer la fréquence et la durée des crises d'épilepsie.

    La fréquence des crises d'épilepsie sera définie à l'aide de variables ordonnées avec cinq catégories: augmentation, pas de changement, rémission 75%, rémission 50% et aucune crise.

13. Preuve vidéo: de courts enregistrements vidéo seront faits du processus d'évaluation des sujets pendant la période de référence, de la période d'hospitalisation des médicaments et 1, 3, 6 et 12 mois après l'injection. Si un comportement anormal se produit à d'autres moments, les chercheurs peuvent également décider d'ajouter des preuves vidéo. Les parents / tuteurs légaux peuvent également fournir des vidéos à domicile avec des fonctions d'affichage améliorées. Une fois l'enregistrement terminé, l'équipe de recherche téléchargera immédiatement la vidéo sur un ordinateur ou un ordinateur portable chiffré et supprimera le fichier vidéo de la carte de stockage de la caméra. Toute vidéo reçue par la partie coopérante sera considérée comme des données de recherche confidentielles. L'équipe de recherche et les partenaires seront chargés de protéger les informations d'identité des sujets et de leurs parents / tuteurs dans l'enregistrement vidéo.
14. Électroencéphalogramme (EEG);
15. Bracelet portable: enregistrements d'enregistrement des conditions de sommeil;
16. Facteur de différenciation de la croissance 11 (GDF11) dans le liquide céphalo-rachidien et le sang: une protéine sécrétée du facteur de croissance transformant - superfamille β (TGF - β), principalement exprimée dans les tissus cérébraux et régulateur négatif de la neurogenèse pendant le développement et l'adulte. Les mutations du GDF11 peuvent entraîner des anomalies de développement impliquant les systèmes craniofaciaux, vertébraux et nerveux. Des preuves récentes suggèrent que le gène GDF11 est l'un des gènes cibles régulés par MECP2: MECP2 régule à la baisse l'expression de GDF11 en induisant la méthylation des histones de l'amplificateur GDF11. Chez les souris RTT, l'expression de GDF11 a diminué; Au contraire, chez les souris MDS, l'expression de GDF11 a augmenté.

Des études antérieures ont montré que le GDF11 est sécrété par le tissu cérébral et peut être détecté dans le sang. Par conséquent, cette expérience explorera les changements dans les niveaux de GDF11 dans le sang avant et après le traitement.

Évaluation de l'immunogénicité:

Afin d'évaluer les réponses immunitaires humorales et cellulaires induites par la capside AAV9 après l'administration, le sang périphérique a été prélevé pour la détection des anticorps anti-AAV9 (méthode ELISA) et le sang total Elispot). Des échantillons de sang immunogène ont été envoyés à des laboratoires tiers désignés pour les tests.

Administration orale prophylactique de prednisolone:

Administré par voie orale 24 heures avant le traitement, et entretenu selon les règles de dosage et de retrait jusqu'à la 9e semaine après le traitement.

Presque tous les médicaments de thérapie génique utilisés dans le corps humain, quelle que soit la voie d'administration, ont observé des réponses des cellules T spécifiques de l'antigène 2 à 4 semaines après l'administration. Les conséquences indésirables potentielles de cette réaction sont la clairance des cellules transduites à médiation immunitaire et la perte d'expression transgénique.

Afin de soulager la réponse immunitaire du corps aux médicaments de thérapie génique AAV, les sujets doivent prendre des corticostéroïdes oraux prophylactiques et utiliser la prednisolone 24 heures avant de recevoir l'injection.

Lors de l'utilisation de glucocorticoïdes, des vérifications régulières de la fonction hépatique doivent être effectuées pour déterminer si les médicaments peuvent être réduits ou arrêtés en fonction des indicateurs de fonction hépatique. Si les valeurs GGT, AST ou ALT sont ≥ 2 × ULN, les chercheurs doivent fournir un traitement correspondant en fonction de la situation individuelle des sujets. Sur la base de l'expérience clinique précédente avec la consommation de médicaments AAV, la période à haut risque pour le rebond des enzymes hépatiques est dans les 2 semaines suivant la réduction ou l'arrêt hormonal. Par conséquent, la surveillance de la fonction hépatique doit être renforcée au cours de cette étape. Pour le plan d'utilisation et de réduction de la prednisolone susmentionnée ci-dessus, les chercheurs peuvent effectuer des ajustements personnalisés en fonction de l'évaluation de la sécurité des sujets. En plus de la fonction hépatique, la surveillance des résultats des lymphocytes T spécifiques de l'antigène sanguin périphérique peut également devoir être pris en considération, et d'autres agents immunosuppresseurs peuvent être ajoutés si nécessaire. Si les glucocorticoïdes utilisés sont des préparations autres que la prednisolone, la dose et le plan de retrait doivent être formulés sur la base de la dose équivalente de prednisolone après conversion.

Consentement éclairé:

Les enfants de moins de 8 ans à participer à des essais cliniques doivent obtenir un formulaire de consentement éclairé signé de leur tuteur et devraient être informés des informations pertinentes sur l'essai clinique dans le cadre que les sujets peuvent comprendre. Lorsque l'enfant a la capacité de prendre la décision d'accepter de participer à l'essai clinique, son propre consentement devrait également être obtenu; Les enfants de plus de 8 ans (dont 8 ans) participant à des essais cliniques, s'ils ont la capacité de signer le formulaire de consentement éclairé, eux-mêmes et leurs tuteurs devraient signer le formulaire de consentement éclairé. S'ils n'ont pas la capacité de signer le formulaire de consentement éclairé, leurs tuteurs doivent signer le formulaire de consentement éclairé.

Événements et traitements médicaux défavorables autres que concomitants:

Médicaments / médicaments qui se produisent à partir de la signature du formulaire de consentement éclairé jusqu'à ce que la première administration soit enregistré comme antécédents / comorbidités médicales et antécédents de traitement dans l'ECRF, et ne doit pas être enregistré sur la page AE et la page de médicaments / traitement concomitants; À moins que les blessures / dommages ne soient causés par les procédures d'examen de laboratoire cliniques, il doit être enregistré comme un AE sur la page AE, et pour d'autres traitements autres que les médicaments / médicaments concomitants pour cet AE, ils doivent être enregistrés sur la page de médicaments / traitement concomitants en conséquence.

La voie technique spécifique est détaillée dans le calendrier de recherche.

Réactions indésirables et méthodes de traitement attendues:

Les risques associés aux participants à cette étude comprennent principalement les risques liés aux procédures d'administration du médicament (ponction de la gaine), les risques liés au médicament étudiant AAV-MECP2 et les risques liés à l'immunosuppression prophylactique.

Risques associés à la perforation de l'injection de gaine:

1) La ponction par injection de gaine est généralement considérée comme sûre, et les sujets sélectionnés subiront une imagerie par résonance magnétique (IRM) avant la ponction lombaire pour exclure la possibilité d'espace intracrânien occupant des lésions (en particulier dans la fossa postérieure) ou une pression intracrânienne accrue. Les risques possibles de ponction lombaire comprennent les éléments suivants: i. Maux de tête après perforation lombaire: les patients subissant une ponction lombaire éprouvent des maux de tête en raison de l'infiltration des liquides dans les tissus à proximité après la ponction. Les maux de tête commencent généralement dans quelques heures à deux jours après la chirurgie et peuvent être accompagnés de nausées, de vomissements et d'étourdissements. Les maux de tête se produisent généralement en position assise ou debout et peuvent être soulagés lorsqu'ils sont allongés. Les maux de tête après perforation lombaire peuvent durer plusieurs heures à une semaine ou plus.

ii Inconfort ou douleur dans le dos: il peut y avoir de la douleur ou de la sensibilité dans le bas du dos. La douleur peut se propager à l'arrière de la jambe.

iii. Saignement: saignement près du site de ponction, ou dans de rares cas, il peut se produire dans l'espace péridural.

L'administration de médicaments dans cette étude a été réalisée par des médecins qualifiés dans la salle de traitement de l'hôpital. Avant l'injection, la zone d'injection a été désinfectée et recouverte de tissu. Après l'injection, la désinfection et l'hémostase de compression ont été effectuées, et le patient a été cloué au lit pendant 6 heures avec l'oreiller enlevé. Après la chirurgie, les sujets seront étroitement surveillés pour s'assurer que toutes les complications possibles sont détectées et traitées en temps opportun.

Risques associés à AAV-MECP2:

Le sujet peut subir des réactions allergiques à AAV-MECP2. En raison de la réponse immunitaire induite par l'injection intrathécale de l'AAV, les sujets sont généralement incapables de recevoir d'autres thérapies génétiques délivrées par des vecteurs AAV du même sérotype.

À l'heure actuelle, il y a trois essais cliniques (NCT05317780, NCT05419492 et NCT04833970) enregistrés sur ClinicalTrials.gov Site Web pour administrer des médicaments AAV au ventricule latéral pour les maladies du système nerveux central, mais les données cliniques de sécurité ou d'efficacité n'ont pas encore été divulguées. AVXS-101 est la version intrathécale de la thérapie génique SMA Zolgensma. Une étude d'escalade de dose de phase 1 menée chez des sujets âgés de 6 à 60 mois a montré que l'AVX-101 était sûr et bien toléré lors de l'administration intrathécale à une dose maximale de 2,4 × 1014 VG / personne, avec un seul sujet présentant des niveaux de transaminase élevés sans bilirubine élevée; Un sujet a connu une thrombocytopénie (nombre inférieur à 75 × 109 / L), qui a résolu spontanément sans intervention.

Ce qui suit résume les réactions indésirables graves (événements) rapportées dans les médicaments AAV qui ont été commercialisés ou dans les essais cliniques:

1. Hépatotoxicité. Ont rapporté une injection intraveineuse de médicaments AAV pour le traitement du SMA, de la dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) et de la myopathie liée à l'X (XLMTM). La survenue d'hépatotoxicité est significativement corrélée avec la posologie du médicament administré, et de graves cas d'hépatotoxicité ne sont observés que chez les sujets recevant des doses AAV> 5 × 1013VG. À l'exception de la toxicité du foie dans XLMTM, qui est considérée comme liée à la maladie hépatique sous-jacente du patient, le mécanisme publié d'autres cas de toxicité hépatique est considéré comme des lésions des cellules hépatiques médiées par les cellules T CD8 + ciblant l'AAV.
2. Maladie microvasculaire thrombotique. Signalé dans le traitement de SMA et DMD avec injection intraveineuse de médicaments AAV, la survenue de cet événement est également dépendante de la dose, et tous les cas étaient des sujets qui ont reçu des doses d'AAV ≥ 5 × 1013VG. En raison de la présence de preuves de laboratoire de l'activation du complément dans bon nombre de ces cas, il est considéré que leur occurrence est liée à l'activation du système de complément par des complexes d'anticorps antigènes ciblant l'AAV.
3. Myocardite et myosite. Rapporté uniquement sur l'injection intraveineuse de médicaments AAV dans la DMD. Sur la base du modèle de mutation du gène DMD spécifique, du temps d'apparition et de la réponse à la thérapie immunosuppressive présente dans le cas, il est supposé que l'essence de ces événements toxiques est la réponse immunitaire du corps au produit génétiquement modifié "Mini anti-protéine d'atrophie musculaire".
4. Toxicité du ganglion de la racine dorsale (DRG). La toxicité du DRG avec des manifestations cliniques (sensation anormale des mains et des pieds) n'a été signalée que chez un patient atteint de sclérose latérale familiale (SLA). Ce cas a reçu une dose intrathécale de 4,2 × 1014 VG de médicament AAV. La toxicité des DRG rapportées dans d'autres études a été découverte accidentellement lors de l'autopsie des sujets de médicament AAV, et les sujets n'ont eu aucune manifestation clinique pertinente avant leur mort.
5. Signaux MR du cerveau anormaux. Un essai clinique a été signalé sur le traitement de la maladie de la basse infantile tardive (maladie CLN2) par injection parenchymateuse cérébrale bilatérale de médicaments AAV sous localisation stéréotaxique. Dans les 48 heures suivant l'injection, le cerveau de tête du sujet MR a montré des hyperintensités T2, des hyperintensités pondérées en fonction de la diffusion et des signaux limités de diffusion localisés sur le site d'injection. Le suivi par la RM ultérieur a montré que tous les sujets ont développé de nouvelles zones de signal élevé T2. Les chercheurs n'ont trouvé aucune séquelle clinique associée à des signaux RM anormaux. Il est supposé que les signaux RM anormaux qui apparaissent tôt après l'administration sont liés à l'œdème / inflammation tissulaire soutenu causé par la plus forte concentration de médicaments AAV autour de la pointe du cathéter d'injection, tandis que les signaux élevés T2 qui apparaissent plus tard sont difficiles à déterminer s'ils sont liés à la progression de la maladie, aux médicaments AAV ou aux procédures d'injection.

Des études sur les échantillons de patients (1 an après l'administration) et les primates non humains (1 mois après l'injection) ont montré que la probabilité d'intégration d'AAV dans le génome est faible. Sur la base du dossier de sécurité de l'AAV dans les essais cliniques, le consensus actuel dans le domaine de la thérapie génique est que l'AAV a une faible toxicité génétique chez l'homme.

Les évaluations préliminaires de la sécurité préclinique de AAV-MECP2 chez les souris RTT humanisées et les macaques mangeant du crabe ont montré que l'AAV-MECP2 n'avait pas causé de dommages aux fonctions hépatiques ou rénaux, les lésions nerveuses, la toxicité immunitaire ou les changements histopathologiques dans les organes importants chez les animaux, et l'état général des animaux. Par conséquent, les données existantes de AAV-MECP2 n'indiquent pas les risques cliniques clairs. L'événement indésirable le plus courant prévu pour les sujets recevant AAV-MECP2 peut être une élévation de grade 1/2 des enzymes hépatiques.

Risques associés à l'immunosuppression préventive:

Ce protocole stipule que à partir d'un jour avant l'administration AAV-MECP2, l'administration orale de 1 mg / kg de prednisolone ou une dose équivalente d'autres glucocorticoïdes doit être démarrée, et la posologie doit être maintenue pendant au moins 30 jours avant de réduire lentement. Le but d'utiliser des glucocorticoïdes est de supprimer les réponses immunitaires innées et acquises induites par les vecteurs AAV et de réduire les réactions immunitaires qui sont préjudiciables à la sécurité et à l'efficacité. Lorsque vous utilisez des hormones, les événements indésirables liés aux hormones, y compris les infections opportunistes, seront surveillés chez les sujets.

Corticosteroids (such as methylprednisolone and prednisone) have several clear side effects, including hypertension, tachycardia, congestive heart failure, changes in serum electrolytes, hyperglycemia, pain, elevated urea nitrogen and creatinine, osteoporosis and ischemic necrosis, decreased anti infective ability, dizziness, tremors, emotional instability, Insomnie, nausées, vomissements, prise de poids, pression intraoculaire élevée et induction de cataractes.

Pendant l'utilisation des hormones, les chercheurs surveilleront de près les événements indésirables mentionnés ci-dessus, en particulier les infections opportunistes qui peuvent survenir chez les sujets.

Analyse statistique Cette étude est une étude de dose précoce avec l'objectif principal de l'évaluation de la sécurité, donc aucun calcul formel de la taille de l'échantillon n'a été effectué.

L'innocuité et la tolérabilité du traitement sont évaluées en fonction de la fréquence et de la gravité des événements indésirables se produisant dans l'année suivant l'administration. La proportion de sujets ayant un AE, tout SAE, tout AE lié au médicament d'enquête et à tout AE ≥ Grade 3 sera analysé statistiquement dans son ensemble et par les classes d'organes système (SOC) et le terme préféré (PT), respectivement. L'incidence des événements indésirables dans différentes cohortes de dose sera également analysée statistiquement séparément.

En raison de la petite taille de l'échantillon et de la possibilité d'indicateurs d'efficacité variables entre les sujets à différents stades de la maladie, toutes les analyses d'efficacité de cette étude sont descriptives et n'impliquent pas de statistiques inférentielles.