En-dose AAV-Mecp2 Sikkerhet/tolerabilitet og effekt i Rett syndrom

Forskningsbakgrunn:

Rett syndrom (RTT) er en medfødt nevroutviklingsforstyrrelse som hovedsakelig rammer kvinner. Den typiske kliniske manifestasjonene inkluderer opphør eller til og med regresjon av nevral utvikling fra 6-18 måneder etter fødselen, tap av ervervede ferdigheter som kognisjon, språkvne og håndfunksjon, ofte ledsaget av stereotypede håndbevegelser, unormale luftveisrytmer, anfall og angstlidelser. RTT er en sjelden sykdom med en forekomst på omtrent 1/10000-15000, som er estimert til å utgjøre mer enn 10% av kvinnelig intellektuell funksjonshemming. Det har stor innvirkning på pasienter og deres familier, med alvorlig skade på deres sosiale funksjon og en veldig dårlig livskvalitet.

Omtrent 90-95% av typiske RTT-pasienter og 40-50% av atypiske RTT-pasienter har påvist abnormiteter i metylering av CpG-bindende protein 2 (MeCP2) kodende gen, så vel som mutasjoner eller slettinger i MeCP2-genet. Det humane MECP2 -genet er lokalisert ved XQ28, og det kodede proteinmetylerte CpG -bindingsproteinet 2 er medlem av metyleringsdomenfamilien. Det er en transkripsjonshemmende faktor som regulerer RNA -spleising og er en viktig epigenetisk regulator i hjernen, noe som påvirker nevral funksjon. I dyreforsøk ble det funnet at MECP2 -mangelfulle mus viste signifikant forbedring i RTT -symptomer etter å ha fått MeCP2 -proteintilskudd gjennom genteknologi.

De siste årene har suksessen med genterapi ved nevromuskulære sykdommer som spinal muskuløs atrofi (SMA) vist muligheten for å anvende genterapiteknologi i menneskekroppen. Siden 2021 har Taysha og neurogen utført kliniske studier av genterapi for Rett syndrom. For øyeblikket har 2 voksne RTT -pasienter og 3 barn fullført administrasjonen, og demonstrert en gunstig sikkerhetsprofil. Det har ikke vært noen alvorlige behandlingsrelaterte bivirkninger og ingen rapporter om MeCP2-overuttrykkstoksisitet eller symptomer.

Professor Qiu Zilong, seniorforsker ved Songjiang Research Institute of Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, har forsket på langvarig forskning på RTT. I 2012 ble det oppdaget at MeCP2 regulerer neuronal synaptisk homeostase -plastisitet; I 2014 ble det oppdaget at MeCP2 regulerer mikroRNA -skjøtebehandling; Etablert MeCP2 transgen krabbe spising av ape -dyremodell i 2016; I 2019 ble den nevrale mekanismen til MeCP2 -mus identifisert og genredigeringsintervensjonsterapi ble forsøkt; Etabler et Mecp2 -mutant mus AAV -genterapi -teknologi veikart i 2022 og søk om et oppfinnelsespatent. Den uavhengig utviklet AAV-MeCP2 forlenget levetiden til MECP2 knockout-mus i laterale ventrikkelinjeksjonseksperimenter, og den terapeutiske effekten av AAV-MeCP2 med CAG-promoter var betydelig bedre enn lignende produkter. Sikkerheten og effekten av intratekal administrering i ape er testet i 8 måneder, og blodrutine, biokjemi i blodet og immunfaktorindikatorene har alle vist god sikkerhet.

Oppsummert er RTT en alvorlig nevroutviklingsforstyrrelse som utgjør stor skade for pasienter, og det er foreløpig ingen effektiv behandlingsmetode. Den kliniske studien som er initiert av våre forskere har som mål å evaluere sikkerhet, toleranse og foreløpig effektivitet av AAV-MeCP2 i behandlingen av Rett-syndrom gjennom en enkelt intratekal injeksjon, som har viktig medisinsk og sosial verdi. Sikkerheten og effekten av intratekal administrering er testet i 8 måneder, og blodrutine, biokjemi i blodet og immunfaktorindikatorene har alle vist god sikkerhet.

Forskningsoversikt:

Generelt forskningsdesign:

En multisenter, enkeltarm, enkelt intratekal doseutforskningsstudie av AAV-MeCP2 initiert av forskere har som mål å utforske to måldoser, med tre personer påmeldt ved hver dose, for å evaluere sikkerhet, toleranse og foreløpig effekt av enkelt intratekal injeksjon av AAV-MECP2 i behandlingen av RTT.

Studiepopulasjon:

Barn i alderen 4-10 år som har fått diagnosen RTT gjennom konsultasjon ved nevrologi/atferdsutviklingsavdelingen for Guangzhou Women and Children's Medical Center og Child Health Department of Xiamen Children's Hospital.

Teststed:

Research Ward of Women and Children's Medical Center, Guangzhou Medical University

Avslutt kriterier midtveis:

Familiemedlemmer kan fortsatt trekke seg fra studien etter å ha fått informert samtykke.

Kriterier for løsrivelse/eksklusjon:

jeg. Pasienten må justere behandlingsmedisinen som ble brukt i løpet av studieperioden;

Ii. Under studien er bruk av medisiner/behandlinger som er forbudt fra studien, påkrevd: Under studien er følgende samtidig medisiner/behandlinger forbudt:

• Legemidler som brukes til å behandle muskelforstyrrelser eller nevrodegenerative sykdommer (unntatt antiepileptika).
• Et medikament som brukes til å behandle diabetes.
• Immunosuppressants (som glukokortikoider, cyklosporin, takrolimus, metotreksat, cyklofosfamid, intravenøst ​​immunoglobulin, rituximab, etc.) ble startet innen 3 måneder før påmelding.
• For de som ikke har brukt antiepileptika eller rehabiliteringsbehandlingsplaner før påmelding, har de brukt antiepileptika eller implementert rehabiliteringsbehandlingsplaner etter påmelding.

iii. Kan ikke delta på behandling på sykehuset i en uke i henhold til den etablerte medisineringsplanen; IV. Etter kommunikasjon og koordinering av tiden kan ikke prosjektevalueringen fullføres; v. Hvis noen bivirkninger, laboratorieavvik eller andre medisinske tilstander oppstår i løpet av studieperioden, og det iverksettes passende tiltak, mener forskerne at å fortsette forsøket kan øke risikoen for forsøkspersonene.

Antall deltakere og grupperingsmetode:

Det var 6 deltakere i injeksjonsgruppen. Seks forsøkspersoner ble registrert i forsøket i rekkefølge, med en pasient som fullførte administrasjonen og ingen signifikant doseringsbegrensende toksisitet (DLT) observert under en måned oppfølging. Det siste emnet ble registrert i prøvemedisinen.

DLT-definisjon: noen av følgende hendelser (gradert i henhold til NCI CTCAE v5.0) som oppstår innen 30 dager etter administrering og bestemmes av forskeren til å være muligens eller definitivt relatert til AAV-MeCP2 (se 4.2 Bivirkningens alvorlighetsgrad): ≥ grad 3 bivirkning; Nivå 3 Laboratorieavvik vedvarer i ≥ 7 dager med nødvendig medisinsk intervensjon; Nivå 4 Laboratorieavvik.

Eksperimentelt medikament:

Eksperimentell medisiner: AAV-MeCP2 ； Aktiv ingrediens: Rekombinant AAV-genterapitvektor som inneholder neuronspesifikk promoter (CAG) drevet MECP2; Tilbehør: 4-hydroksyetylpiperazin etanesulfonsyre, kaliumklorid, natriumklorid, kalsiumklorid, glukose, poloxamer F68 og injeksjonsvann; Doseringsform: intratekal injeksjon; Utseende: fargeløs og gjennomsiktig væske; Spesifikasjon: Uavhengig pakket penicillinflaske, med en titer på 2 × 1014 Vg/ml og et volum på 0,5 ml; Administrasjonsrute: Intratekal injeksjon; Administrasjonsfrekvens: 1 gang;

Forskningstrinn og metoder:

1. Intervensjonsmetode: AAV-MeCP2, fortynnet med 20 ml fysiologisk saltvann, to utforskende doser (dose 1, dose 2, detaljert nedenfor), enkelt intratekal injeksjon;

   Medikamentdosering:

   Reglene for doseutforskning har utviklet seg fra den tradisjonelle "3+3 -designen". De to forhåndsinnstilte dosenivåene for denne studien er: dose 1 (7 × 1014vg/person); Dose 2 (1,5 × 1015VG/person).

   De to forhåndsinnstilte dosenivåene i denne studien er det innledende dosenivået av dose 1 og et høyere doseringsnivå av dose 2. Under forskningsprosessen er det mulig å utforske et dosenivå under dose 1 eller en mellomliggende dose mellom dose 1 og dose 2 basert på akkumulert sikkerhet og effektdata, underlagt SRC-godkjenning.

   På dose 1 -nivå ble tre forsøkspersoner først påmeldt, og deretter i løpet av DLT -observasjonsperioden ble antallet forsøkspersoner som utviklet DLT blant de tre forsøkspersonene observert. Basert på antall personer som er observert å ha DLT, bestemmer du om du vil øke til neste dosegruppe, opprettholde den nåværende dosegruppen eller redusere til en lavere dosegruppe.

   1. Hvis ingen av de tre forsøkspersonene som er påmeldt denne dosen utvikler DLT eller bare ett individ utvikler DLT, kan dosen økes til en høyere dosegruppe eller forsøket kan stoppes (når den allerede er dose 2).
   2. Hvis 2 av de 3 forsøkspersonene som er registrert ved denne dosen utvikler DLT, vil administrasjonen til nye forsøkspersoner bli suspendert til SRC tar en beslutning; På dette tidspunktet, etter en omfattende evaluering av dagens sikkerhets- og effektivitetsdata, vil SRC gi en av følgende tre oppløsninger: ① Reduser dosen til en lavere dose og registrere tre vurderbare forsøkspersoner; ② Legg til 3 ekstra vurderbare personer til gjeldende dose; ③ Stopp eksperimentet.

   SRC står for Safety Review Committee, ansvarlig for å gjennomgå sikkerhetsdata for fag, sammensatt av forskere og samarbeide medisinske skjermer. Under forskningsprosessen er SRC ansvarlig for å beskytte sikkerheten til fagene, og dets ansvar er som følger:

   Gjennomgå sikkerhetsproblemene til hver deltaker; Gjennomgå regelmessig sikkerhetsdata mens forsøkspersonene fortsetter å motta studiebehandling; Evaluer om det er nødvendig å utvide antall forsøkspersoner i hvert trinn, og om det er mulig å gå videre til neste dosetrinn, inkludert dose opptrapping eller dosereduksjon; Hold forskningsdata og resultater konfidensielle.

2. Narkotikahåndtering:

For alle mottatte forskningsintervensjonsprodukter må forskeren eller utpekt personell bekrefte at passende temperaturforhold opprettholdes under transport, og eventuelle uoverensstemmelser er rapportert og løst før bruk av forskningsintervensjonsproduktene. Dette forskningsproduktet er pakket i penicillinflasker og transportert med tørris. Etter å ha mottatt det, lagrer forskningssenteret det på -75 ± 15 ℃.

Bare påmeldte fag kan motta forskningsinngrep, og bare autoriserte ansatte i forskningssenteret kan gi eller administrere forskningsintervensjoner. Alle forskningsintervensjoner må lagres i et trygt, miljøkontrollert og overvåket (manuelt eller automatisk) område i henhold til de angitte lagringsforholdene, og bare forskere og autoriserte ansatte i forskningssenteret har tilgang til området.

Forskeren eller narkotikasjefen for forskningssenteret skal telle og verifisere forskningsintervensjonsproduktene og opprettholde relevante poster (dvs. motta og verifisere poster og endelige avhendingsposter).

Forskningsevaluering:

Forskningsprogrammet og planen finner du i "forskningsplanen". Denne tabellen viser alle evalueringer og bruker "X" for å representere evalueringene som er utført ved hvert besøk. Hvis emnet ikke er i stand til å gå til prøvesenteret på grunn av spesielle årsaker, kan emnet eller deres juridiske representant kontakte personalet på prøvesenteret på andre alternative midler (for eksempel telefon eller virtuell video). Detaljer om bivirkninger og samtidig medisiner bør samles inn under kommunikasjonen. I løpet av denne perioden kan det hende at deltakerne ikke kan delta i laboratorietester og kliniske evalueringer som er spesifisert under studiebesøket, men all relevant informasjon bør registreres i detalj. Hvis laboratoriedata fra forsøkspersoner blir samlet inn eller kliniske evalueringer gjennomføres gjennom alternative metoder, bør relevant informasjon registreres i detalj.

Primære utfallsmål: Sikkerhetsindikatorer

1. Demografi/medisinsk historie:

   jeg. Nåværende medisinsk historie: inkludert diagnostisk basis, relaterte symptomer, utviklingshistorie, nåværende og tidligere medisiner/utvinningsbehandlingsstatus, etc; ii. Historien om andre interne eller kirurgiske sykdommer (spesielt medikamentallergier, ryggraden, etc.); iii. Abnormiteter i svangerskapsalder og fødselsundersøkelser; IV. Tidligere sykehusinnleggelser siden fødselen, inkludert varighet av sykehusinnleggelse, årsaker, mottatt behandling og sykdomsprogresjon; Hvis du er mulig, gir du ICD-10-kodingsinformasjon for hver sykehusinnleggelsesdiagnose; v. Familiehistorie

2. Fysisk undersøkelse:

   jeg. Generell fysisk undersøkelse inkludert nevrologisk undersøkelse må utføres og registreres ved utpekte besøk, som skal omfatte minst følgende innhold: hode/nakke, øyne, ører, nese/hals, kardiovaskulært system, lunger, mage, muskel- og skjelettsystem, sentralnervesystem og hud.

   ii. Vitale tegn, høyde og vekt: Før du måler vitale tegn, bør forsøkspersoner hvile i et stille og uforstyrret miljø i minst 3 minutter, og deretter måle i en semi -liggende stilling, inkludert kroppstemperatur, systolisk og diastolisk blodtrykk, respirasjonsfrekvens, puls og blodoksygenmetting.

   iii. Etter intratekal injeksjon av AAV-MeCP2 ligger flat i 6 timer med puten fjernet, og måler og registrerer blodtrykk, luftveis, puls og oksygenmetning hvert 15. minutt (± 5 minutt); Etterpå må du overvåke indikatorene ovenfor hver time (± 15 minutter) til 6 timer etter intratekal injeksjon av AAV-MeCP2.

   IV. I løpet av screeningsperioden må høyden måles og vekt måles ved utpekte besøk.

3. Laboratorieundersøkelser ： i. Urinrutine: Spesifikk tyngdekraft, pH -verdi, glukose, protein, blod, ketonlegemer, bilirubin, urobilinogen, nitritt, leukocyttesterase (testpapirmetode), mikroskopisk undersøkelse (hvis blod eller proteintestresultater er unormalt).

   ii. Blodrutine: antall røde blodlegemer, hemoglobin, blodplatetall, antall hvite blodlegemer og klassifiseringstall, hematokrit, gjennomsnittlig korpuskulært volum, gjennomsnittlig korpuskulær hemoglobinkonsentrasjon og retikulocyttantall; iii. Blodbiokjemi: aspartataminotransferase (AST), alaninaminotransferase (ALT), gamma glutamyltransferase (GGT), alkalisk fosfatase og ALP), total bilirubin, direkte bilirubin, total protein, kreatin.

   IV. Det myokardiale enzymspekteret: kreatinkinase (CK), kreatinkinaseisoenzym (CK-MB), hydroksybutyratdehydrogenase (HBDH), laktatdehydrogenase (LDH) og høysensitivitet trroponin i (Hstnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnntnnnnnnnnntnnnnnntnnnnnntnnnnntnnnntnnntnnntnnntnnntnnntnntnnndnhydrogenase (LDH) og high-sensitiviteten).

   v. Koagulasjonsfunksjonen: aktivert delvis tromboplastin tid (APTT), protrombin tid (PT), trombin tid (TT), fibrinogen (FG, FIB) og D-dimer.

   vi. Immunfunksjon: Perifert blodlymfocytt subpopulasjonstall:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Komplementsystem: Total komplementaktivitet (CH50), C3 -aktivitet og kvantifisering, C4 -aktivitet og kvantifisering.

   vii. Serumcytokiner inkluderer: TNFa 、 IFN-y 、 IL-10 、 IL-10.

4. Elektrokardiogram (EKG): En konvensjonell 12 bly EKG oppnås ved bruk av en EKG -enhet som automatisk kan beregne hjertefrekvens og måle PR, QRS, QT og QTC -intervaller.
5. Ekkokardiografi: I løpet av screeningsperioden vil en transthorakisk farge ekkokardiografiundersøkelse planlegges å utelukke potensielle hjertelesjoner og hjertedysfunksjon. Undersøkelsen ble tolket og analysert av ultralydleger og kardiologer ved forskningssenteret.
6. Røntgen av brystet: I løpet av screeningsperioden blir røntgenundersøkelse av brystet hovedsakelig utført for å ekskludere lungeinfeksjoner som ofte forekommer hos pasienter. Hvis det er vanskelig å stille en klar diagnose på vanlig film, med samtykke fra motivets verge, kan en ekstra CT -skanning av brystet utføres.
7. MR -hode: I løpet av screeningperioden er det nødvendig med en MR -skanning for å oppdage anatomiske avvik eller andre sentralnervesystemlesjoner som må utelukkes. To MR-skanninger planlagt i løpet av oppfølgingsperioden ble brukt til å evaluere toksisiteten forbundet med AAV-MeCP2-injeksjon og overvåke utvikling av sentralnervesystemet.

Sekundære utfallsmål: Evaluering av effektivitet

1. RTT spesifikke kliniske globale inntrykk skala alvorlighetsgrad (CGI-S) og kliniske globale inntrykk skalaforbedring (CGI-I);
2. Rett Severity Assessment Questionnaire (RSSS);
3. Rett Syndrome Behavior Questionnaire (RSBQ);
4. Revised Motor Behavior Assessment (R-MBA);
5. Rett Syndrome Hand Function Scale (RSHFS);
6. Barns søvnvaner spørreskjema;
7. Rett Parenting Stress Questionnaire;
8. Griffiths utviklingsvurderingsskala - Kinesisk versjon (GDS -C): Bare relativ utviklingsalder brukes som gyldighetsevaluering. Hvis alderen er over 8 år og evnen er under 6 år gammel, brukes fortsatt GDS-C-evaluering;
9. Autism Diagnosis Behaviour Observation Scale (ADOS);
10. Adaptiv atferdsvurderingsskala for barn i alderen 0-6 år (andre utgave) - Foreldres vurderingsskjema;
11. Avvikende atferdsskala (ABC);

12. Epilepsiregistreringer: Under studien ble det pålagt emner foresatte for å registrere forekomsten av anfall, inkludert alle datoer med og uten anfall, inkludert presentasjon, varighet, frekvens og dato for anfall. Ta det med deg ved hvert oppfølgingsbesøk for forskere for å vurdere frekvensen og varigheten av epileptiske anfall.

    Hyppigheten av epileptiske anfall vil bli definert ved hjelp av bestilte variabler med fem kategorier: økning, ingen endring, 75% remisjon, 50% remisjon og ingen anfall.

13. Videobevis: Korte videoopptak vil bli gjort av evalueringsprosessen til forsøkspersonene i løpet av grunnlinjeperioden, sykehusinnleggelsesperioden og 1, 3, 6 og 12 måneder etter injeksjon. Hvis unormal atferd oppstår andre ganger, kan forskere også bestemme seg for å legge til videobevis. Foreldre/foresatte kan også tilby hjemmevideoer med forbedrede skjermfunksjoner. Etter at innspillingen er fullført, vil forskerteamet umiddelbart laste opp videoen til en kryptert datamaskin eller en bærbar PC og slette videofilen fra Camera Storage -kortet. Enhver video mottatt av den samarbeidende parten vil bli betraktet som konfidensielle forskningsdata. Forskerteamet og partnerne vil være ansvarlig for å beskytte identitetsinformasjonen til fagene og deres foreldre/foresatte i videoopptaket.
14. Elektroencephalogram (EEG);
15. Bærbart armbånd: Registrer søvnforhold;
16. Vekstdifferensieringsfaktor 11 (GDF11) i cerebrospinalvæske og blod: et utskilt protein av den transformerende vekstfaktoren - β (TGF - β) superfamilie, hovedsakelig uttrykt i hjernevev og negativt regulerende neurogenese under utvikling og voksen alder. Mutasjoner i GDF11 kan føre til utviklingsavvik som involverer kraniofacial-, ryggmargs- og nervesystemer. Nyere bevis tyder på at GDF11 -genet er et av målgenene regulert av MeCP2: MeCP2 nedregulerer uttrykket av GDF11 ved å indusere histonmetylering av GDF11 -enhancer. I RTT -mus reduserte ekspresjonen av GDF11; Tvert imot, i MDS -mus økte uttrykket av GDF11.

Tidligere studier har vist at GDF11 skilles ut av hjernevev og kan oppdages i blodet. Derfor vil dette eksperimentet utforske endringene i GDF11 -nivåer i blodet før og etter behandling.

Immunogenisitetsvurdering:

In order to evaluate the humoral and cellular immune responses induced by AAV9 capsid after administration, peripheral blood was collected for anti-AAV9 antibody detection (ELISA method), and whole blood was collected for AAV antigen-specific T cell quantitative detection (IFN - γ enzyme-linked immunosorbent assay) on isolated peripheral blood mononuclear cells, IFN-γ Elispot). Immunogene blodprøver ble sendt til utpekte tredjepartslaboratorier for testing.

Profylaktisk oral administrering av prednisolon:

Administrert oralt 24 timer før behandling, og opprettholdt i henhold til doserings- og tilbaketrekningsregler til den 9. uken etter behandling.

Nesten alle genterapi medisiner som brukes i menneskekroppen, uavhengig av administrasjonsveien, har observert antigenspesifikke T-celleresponser 2-4 uker etter administrering. De potensielle bivirkningene av denne reaksjonen er klaring av immunmedierte transduserte celler og tap av transgene uttrykk.

For å lindre immunresponsen fra kroppen på AAV -genterapi medisiner, må forsøkspersoner ta profylaktiske orale kortikosteroider og bruke prednisolon 24 timer før du mottar injeksjon.

Under bruk av glukokortikoider, bør regelmessige leverfunksjonskontroll utføres for å bestemme om medisiner kan reduseres eller stoppes basert på leverfunksjonsindikatorer. Hvis GGT-, AST- eller ALT -verdiene er ≥ 2 × ULN, må forskere gi tilsvarende behandling basert på fagets individuelle situasjon. Basert på tidligere klinisk erfaring med AAV-medikamentbruk, er høyrisikoperioden for leverenzym rebound innen 2 uker etter hormonreduksjon eller seponering. Derfor bør overvåking av leverfunksjonen styrkes i løpet av dette stadiet. For ovennevnte prednisolonbruk og reduksjonsplan kan forskere gjøre personlige justeringer basert på sikkerhetsvurderingen av forsøkspersonene. I tillegg til leverfunksjon, kan overvåking av resultater av perifere blodantigenspesifikke T-celler også måtte vurderes, og andre immunsuppressive midler kan tilsettes om nødvendig. Hvis glukokortikoidene som brukes er andre preparater enn prednisolon, bør doseringen og tilbaketrekningsplanen formuleres basert på den ekvivalente dosen av prednisolon etter konvertering.

Informert samtykke:

Barn under 8 år som deltar i kliniske studier, bør få et signert informert samtykkeskjema fra deres verge, og bør informeres om relevant informasjon om den kliniske studien innenfor omfanget som forsøkspersonene kan forstå. Når barnet har muligheten til å ta en beslutning om å gå med på å delta i den kliniske studien, bør deres eget samtykke også fås; Barn over 8 år (inkludert 8 år) som deltar i kliniske studier, hvis de har muligheten til å signere det informerte samtykkeskjemaet, bør både seg selv og deres foresatte signere det informerte samtykkeskjemaet. Hvis de ikke har muligheten til å signere det informerte samtykkeskjemaet, bør deres foresatte signere det informerte samtykkeskjemaet.

Uønskede medisinske hendelser og andre behandlinger enn samtidig:

Medisiner/medisiner som oppstår fra signering av det informerte samtykkeskjemaet til den første administrasjonen skal registreres som medisinsk historie/komorbiditeter og behandlingshistorie i ECRF, og skal ikke registreres på AE -siden og samtidig medisiner/behandlingsside; Med mindre skaden/skaden er forårsaket av prosedyrer for klinisk laboratorieundersøkelse, skal den registreres som en AE på AE -siden, og for andre behandlinger enn samtidig medisiner/medikamenter for denne AE, skal de registreres på samtidig medisin/behandlingsside deretter.

Den spesifikke tekniske ruten er detaljert i forskningsplanen.

Forventet bivirkninger og behandlingsmetoder:

Risikoen forbundet med deltakere i denne studien inkluderer hovedsakelig risiko relatert til prosedyrer for medikamentadministrasjon (skjedepunktering), risikoer relatert til undersøkelsesmedisin AAV-MeCP2 og risikoer relatert til profylaktisk immunsuppresjon.

Risiko forbundet med punktering av skjedeinjeksjon:

1) Skjedeinjeksjonspunktering anses generelt som trygt, og de utvalgte forsøkspersonene vil gjennomgå en magnetisk resonansavbildning (MRI) -skanning før lumbal punktering for å utelukke muligheten for intrakraniell rom som okkuperer lesjoner (spesielt i den bakre fossa) eller økt intrakranialt trykk. Den mulige risikoen for korsryggen inkluderer følgende: i. Hodepine etter lumbal punktering: pasienter som gjennomgår lumbal punktering opplever hodepine på grunn av flytende infiltrasjon i nærliggende vev etter punktering. Hodepine starter vanligvis i løpet av få timer til to dager etter operasjonen og kan være ledsaget av kvalme, oppkast og svimmelhet. Hodepine oppstår vanligvis mens du sitter eller står, og kan lettes når du ligger. Hodepine etter lumbale punktering kan vare i flere timer til en uke eller lenger.

ii. Ubehag eller smerter i ryggen: det kan være smerter eller ømhet i korsryggen. Smertene kan spre seg til baksiden av beinet.

iii. Blødning: Blødning i nærheten av punkteringsstedet, eller i sjeldne tilfeller, kan det forekomme i epiduralrommet.

Administrering av medisiner i denne studien ble utført av kvalifiserte leger i sykehusets behandlingsrom. Før injeksjonen ble injeksjonsområdet desinfisert og dekket med klut. Etter injeksjon ble desinfeksjon og kompresjon hemostase utført, og pasienten ble sengeliggende i 6 timer med puten fjernet. Etter operasjonen vil forsøkspersonene bli nøye overvåket for å sikre at eventuelle komplikasjoner blir oppdaget og behandlet på en riktig måte.

Risiko forbundet med AAV-Mecp2:

Emnet kan oppleve allergiske reaksjoner på AAV-MeCP2. På grunn av immunresponsen indusert ved intratekal injeksjon av AAV, er forsøkspersoner vanligvis ikke i stand til å motta andre genterapi levert av AAV -vektorer av samme serotype.

For tiden er det tre kliniske studier (NCT05317780, NCT05419492 og NCT04833970) registrert på ClinicalTrials.gov Nettsted for å administrere AAV -medisiner til lateral ventrikkel for sykdommer i sentralnervesystemet, men kliniske data fra sikkerhet eller effekt er ennå ikke avslørt. AVXS-101 er den intratekale versjonen av SMA-genterapi Zolgensma. En fase 1-dose-opptrappingsstudie utført i personer i alderen 6-60 måneder viste at AVXS-101 var trygg og godt tolerert når den ble administrert intratekalt med en maksimal dose på 2,4 × 1014 VG/person, med bare ett individ som opplever forhøyede transaminasenivåer uten forhøyet biliBin; Ett fag opplevde trombocytopeni (tell under 75 × 109/l), som løste spontant uten inngrep.

Følgende oppsummerer de alvorlige bivirkningene (hendelser) rapportert i AAV -medisiner som er blitt markedsført eller i kliniske studier:

1. Hepatotoksisitet. Rapportert om intravenøs injeksjon av AAV-medisiner for behandling av SMA, Duchenne muskeldystrofi (DMD) og X-koblet myopati (XLMTM). Forekomsten av hepatotoksisitet er betydelig korrelert med doseringen av medikamentet som administreres, og alvorlige tilfeller av hepatotoksisitet sees bare hos personer som får AAV -doser> 5 × 1013VG. Bortsett fra levertoksisiteten i XLMTM, som anses å være relatert til pasientens underliggende leversykdom, anses den publiserte mekanismen til andre levertoksisitetstilfeller for å være levercelleskade mediert av CD8+T -celler som er målrettet mot AAV.
2. Trombotisk mikrovaskulær sykdom. Rapportert i behandlingen av SMA og DMD med intravenøs injeksjon av AAV-medisiner, er forekomsten av denne hendelsen også doseavhengig, og alle tilfeller var personer som fikk AAV-doser ≥ 5 × 1013VG. På grunn av tilstedeværelsen av laboratoriebevis for komplementaktivering i mange av disse tilfellene, anses det at deres forekomst er relatert til aktivering av komplementsystemet ved antigenantistoffkomplekser rettet mot AAV.
3. Myokarditt og myositis. Bare rapportert om intravenøs injeksjon av AAV -medisiner i DMD. Basert på det spesifikke DMD -genmutasjonsmønsteret, begynnelsestid og respons på immunsuppressiv terapi som er til stede i saken, spekuleres det i at essensen av slike toksiske hendelser er immunresponsen til kroppen til det genetisk modifiserte produktet "Mini Anti Muskel atrofiprotein".
4. Ryggrot ganglion (DRG) toksisitet. Toksisiteten til DRG med kliniske manifestasjoner (unormal hånd- og fotfølelse) er bare rapportert hos en pasient med familiær lateral sklerose (ALS). Denne saken fikk en intratekal dose på 4,2 × 1014 VG AAV -medikament. Toksisiteten til DRG rapportert i andre studier ble tilfeldigvis oppdaget under obduksjon av AAV -medikamentpersoner, og forsøkspersonene hadde ingen relevante kliniske manifestasjoner før deres død.
5. Unormal hjerne MR -signaler. En klinisk studie ble rapportert om behandling av sen infantil batten sykdom (CLN2 -sykdom) ved bilateral hjerneparenkymal injeksjon av AAV -medisiner under stereotaksisk lokalisering. I løpet av 48 timer etter injeksjonen viste motivets hodehjerne T2-hyperintensiteter, diffusjonsvektede hyperintensiteter og diffusjonsbegrensede signaler lokalisert til injeksjonsstedet. Etterfølgende MR-oppfølging viste at alle forsøkspersoner utviklet nye T2 høye signalområder. Forskerne fant ingen kliniske følger assosiert med unormale MR -signaler. Det spekuleres i at de unormale MR -signalene som vises tidlig etter administrering er relatert til vedvarende vevødem/betennelse forårsaket av den høyeste konsentrasjonen av AAV -medisiner rundt injeksjonskateterspissen, mens T2 høye signaler som vises senere er vanskelige å avgjøre om de er relatert til sykdomsprogresjon, AAV -medisiner eller injeksjonsprosedyrer.

Studier på pasientprøver (1 år etter administrering) og ikke-menneskelige primater (1 måned etter injeksjon) har vist at sannsynligheten for AAV-integrasjon i genomet er lav. Basert på sikkerhetsregisteret for AAV i kliniske studier, er den nåværende konsensus innen genterapi at AAV har lav genetisk toksisitet hos mennesker.

Foreløpige prekliniske sikkerhetsevalueringer av AAV-MeCP2 i humaniserte RTT-mus og krabbe spiste makaker viste at AAV-MeCP2 ikke forårsaket lever- eller nyrefunksjonsskader, nerveskader, immuntoksisitet eller histopatologiske endringer i viktige organer hos dyr, og dyrens generelle tilstand var god. Derfor indikerer ikke de eksisterende dataene fra AAV-MeCP2 klar kliniske risikoer. Den vanligste bivirkningen som forventes for personer som mottar AAV-MeCP2, kan være grad 1/2 høyde av leverenzymer.

Risiko forbundet med forebyggende immunsuppresjon:

Denne protokollen bestemmer at fra en dag før AAV-MeCP2-administrering, oral administrering av 1 mg/kg prednisolon eller ekvivalent dose av andre glukokortikoider, bør startes, og doseringen bør opprettholdes i minst 30 dager før sakte reduserer. Hensikten med å bruke glukokortikoider er å undertrykke de medfødte og ervervede immunresponsene indusert av AAV -vektorer, og redusere immunreaksjoner som er skadelig for sikkerhet og effekt. Når du bruker hormoner, vil bivirkninger relatert til hormoner, inkludert opportunistiske infeksjoner, bli overvåket i forsøkspersonene.

Kortikosteroider (som metylprednisolon og prednison) har flere klare bivirkninger, inkludert hypertensjon, takykardi, kongestiv hjertesvikt, endringer i serumelektrolytter, hyperglykemi, smerter, økt nitrogen og kreatinin, ilositet, treman, essensisk nekroose, ilosert ilosedisk, il -kreatin, ilosedisk nitrogen, Søvnløshet, kvalme, oppkast, vektøkning, forhøyet intraokulært trykk og induksjon av grå stær.

Under bruk av hormoner vil forskere nøye overvåke de ovennevnte bivirkningene, spesielt opportunistiske infeksjoner som kan oppstå hos forsøkspersonene.

Statistisk analyse Denne studien er en tidlig doseutforskningsstudie med hovedmålet for å evaluere sikkerhet, derfor ble det ikke utført noen formell beregning av prøvestørrelse.

Sikkerheten og toleransen av behandlingen blir evaluert basert på frekvensen og alvorlighetsgraden av bivirkninger som oppstår innen ett år etter administrering. Andelen personer med hvilken som helst AE, hvilken som helst SAE, hvilken som helst AE relatert til undersøkelsesmedisinen, og eventuell ≥ grad 3 AE vil bli statistisk analysert som en helhet og av System Organ -klasser (SOC) og foretrukket betegnelse (PT). Forekomsten av bivirkninger i forskjellige dosekohorter vil også statistisk analysert separat.

På grunn av den lille prøvestørrelsen og muligheten for varierende effektivitetsindikatorer blant forsøkspersoner i forskjellige sykdomsstadier, er alle effektanalyser i denne studien beskrivende og involverer ikke inferensiell statistikk.