Однодозированная безопасность/переносимость AAV-MECP2 и эффективность при синдроме Ретта

ПРИМЕНЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Синдром Ретта (RTT) представляет собой врожденное заболевание нервно -развития, которое в основном поражает женщин. Его типичные клинические проявления включают прекращение или даже регрессию развития нейронного развития с 6-18 месяцев после рождения, потерю приобретенных навыков, таких как познание, языковые способности и функция рук, часто сопровождаемые стереотипными движениями рук, аномальными дыхательными ритмами, судорогами и расстройствами тревоги. RTT является редким заболеванием с уровнем заболеваемости около 1/10000-15000, что, по оценкам, учитывает более 10% интенсивности женщин. Это оказывает большое влияние на пациентов и их семьи, с тяжелым повреждением их социального функционирования и очень низким качеством жизни.

Приблизительно 90-95% типичных пациентов с RTT и 40-50% пациентов с атипичными RTT обнаружили аномалии в ген, кодирующем метилирование CpG, кодирующий ген, а также мутации или удаления в гене MeCP2. Ген MECP2 человека расположен в XQ28, а его кодированный белок метилированный CPG -связывающий белок 2 является членом семейства доменов метилирования. Это ингибирующий транскрипционный фактор, который регулирует сплайсинг РНК и является ключевым эпигенетическим регулятором в мозге, влияя на нейронную функцию. В экспериментах на животных было обнаружено, что мыши с дефицитом MECP2 показали значительное улучшение симптомов RTT после получения добавки белка MECP2 с помощью технологии генной инженерии.

В последние годы успех генной терапии при нервно -мышечных заболеваниях, таких как атрофия мышц позвоночника (SMA), продемонстрировал возможность применения технологии генной терапии в организме человека. С 2021 года Taysha и Neurogene провели клинические испытания генной терапии для синдрома RETT. В настоящее время 2 взрослых пациентов с RTT и 3 детей завершили администрацию, демонстрируя благоприятный профиль безопасности. Не было никаких серьезных побочных эффектов, связанных с лечением, и никаких сообщений о токсичности или симптомах сверхэкспрессии MECP2.

Профессор Цю Зилонг, старший исследователь из Научно-исследовательского института Songjiang Шанхайского медицины Медицинского факультета Университета Джао Тонга, проводит долгосрочные исследования по RTT. В 2012 году было обнаружено, что MECP2 регулирует пластичность нейронального синаптического гомеостаза; В 2014 году было обнаружено, что MECP2 регулирует обработку сплайсинга микроРНК; Установил модель трансгенного краба MECP2 в 2016 году; В 2019 году был идентифицирован нейронный механизм мышей MECP2, и была предпринята попытка вмешательственной терапии для редактирования генов; Установите дорожную карту генной терапии MECP2 мыши AAV в 2022 году и подайте заявку на патент на изобретение. На самостоятельно развились AAV-MECP2, значительно продлевая продолжительность жизни мышей, нокаутированных MECP2, в экспериментах по впрыскам в боковом желудочке, и терапевтический эффект AAV-MECP2 с промотором CAG был значительно лучше, чем аналогичные продукты. Безопасность и эффективность интратекального введения в обезьяне были протестированы в течение 8 месяцев, а рутина крови, биохимия крови и показатели иммунного фактора показали хорошую безопасность.

Таким образом, RTT является серьезным заболеванием нервно -развития, которое наносит большой вред пациентам, и в настоящее время нет эффективного метода лечения. Клиническое испытание, инициированное нашими исследователями, направлено на оценку безопасности, переносимости и предварительной эффективности AAV-MECP2 при лечении синдрома Ретта посредством единой интратекальной инъекции, которая имеет важную медицинскую и социальную ценность. Безопасность и эффективность интратекального введения были протестированы в течение 8 месяцев, а рутина крови, биохимию крови и показатели иммунного фактора показали хорошую безопасность.

Обзор исследования:

Общий дизайн исследования:

Многоцентровое исследование с одной рукой, одноквартичное исследование дозы AAV-MECP2, инициированное исследователями, направлено на изучение двух целевых доз, при этом три субъекта, включенные в каждую дозу, для оценки безопасности, переносимости и предварительной эффективности отдельной интратекальной инъекции AAV-MECP2 в лечении RTT.

Исследовательская популяция:

Дети в возрасте 4-10 лет, у которых был диагностирован RTT посредством консультаций в Департаменте неврологии/поведенческого развития в Гуанчжоу-медицинском центре, и в Департаменте здоровья детей в детской больнице Xiamen.

Место тестирования:

Исследовательский отдел женского и детского медицинского центра, Медицинский университет Гуанчжоу

Критерии выхода на полпути:

Члены семьи все еще могут выйти из исследования после получения информированного согласия.

Критерии отрешения/исключения:

я. Пациент должен корректировать лечение, используемое в течение периода исследования;

II Во время исследования требуется использование лекарств/лечения, которые запрещены в ходе исследования: во время исследования следующие сопутствующие препараты/лечение запрещено:

• Препараты, используемые для лечения мышечных расстройств или нейродегенеративных заболеваний (исключая противоэпилептические препараты).
• Препарат, используемый для лечения диабета.
• Иммуносупрессанты (такие как глюкокортикоиды, циклоспорин, такролимус, метотрексат, циклофосфамид, внутривенное иммуноглобулин, ритуксимаб и т. Д.) Были начаты в течение 3 месяцев до включения.
• Для тех, кто не использовал противоэпилептические препараты или планы реабилитационного лечения до зачисления, они использовали противоэпилептические препараты или внедрили планы реабилитационного лечения после зачисления.

iii. Невозможно посещать лечение в больнице в течение одной недели в соответствии с установленным планом лекарств; IV После общения и координации времени оценка проекта не может быть завершена; V. Если какие -либо нежелательные события, лабораторные аномалии или другие медицинские условия возникают в течение периода исследования, и принимаются соответствующие меры, исследователи считают, что продолжение испытания может увеличить риск для субъектов.

Количество участников и метод группировки:

В группе инъекций было 6 участников. Шесть субъектов были зарегистрированы в исследование в последовательности, когда один пациент заканчивал введение, и не было значительной дозы, ограничивающей токсичность (DLT), наблюдалось в течение одного месяца наблюдения. Последний субъект был зачислен в пробное лекарство.

Определение DLT: любое из следующих событий (оценивается в соответствии с NCI CTCAE V5.0), которые происходят в течение 30 дней после введения и определяются исследователем, возможно, или определенно связаны с AAV-MECP2 (см. 4.2 Тяжесть побочных событий): ≥ неблагоприятного события 3 степени; Лабораторные аномалии уровня 3 сохраняются в течение ≥ 7 дней с необходимым медицинским вмешательством; Уровень 4 Лабораторная аномалия.

Экспериментальный препарат:

Экспериментальное лекарство: AAV-MECP2 ； Активный ингредиент: рекомбинантный вектор генной терапии AAV, содержащий нейронный специфичный промотор (CAG) MECP2; Аксессуары: 4-гидроксиэтилпиперазиновый этатансульфокислот, хлорид калия, хлорид натрия, хлорид кальция, глюкоза, полоксамер F68 и инъекционная вода; Дозировка формы: интратекальная инъекция; Внешний вид: бесцветная и прозрачная жидкость; Спецификация: независимо упакованная бутылка пенициллина, с титром 2 × 1014 Vg/мл и объемом 0,5 мл; Административный маршрут: интратекальная инъекция; Административная частота: 1 раз;

Исследовательские шаги и методы:

1. Метод вмешательства: AAV-MECP2, разбавленный 20 мл физиологического раствора, две исследовательские дозы (доза 1, доза 2, подробно описанная ниже), отдельная интратекальная инъекция;

   Дозировка наркотиков:

   Правила разведки дозы развивались из традиционного «3+3 дизайна». Два доза дозах для этого исследования: доза 1 (7 × 1014VG/человек); Доза 2 (1,5 × 1015VG/человек).

   Два доза дозах в этом исследовании-это начальный уровень дозы дозы 1 и более высокий уровень дозы дозы 2. В процессе исследования можно исследовать уровень дозы ниже дозы 1 или промежуточную дозу между дозой 1 и дозой 2 на основе накопленных данных о безопасности и эффективности, в зависимости от одобрения SRC.

   На уровне дозы 1 сначала были зарегистрированы три субъекта, а затем в течение периода наблюдения DLT наблюдалось число субъектов, у которых развился DLT среди трех субъектов. Основываясь на количестве наблюдаемых субъектов, имеющих DLT, решайте, увеличить ли группу дозы, поддерживать текущую дозу или уменьшить до более низкой дозы.

   1. Если ни у одного из трех субъектов, зарегистрированных в этой дозе, не развивается DLT или только один субъект развивает DLT, доза может быть увеличена до более высокой дозы, или испытание может быть остановлено (когда это уже доза 2).
   2. Если 2 из 3 субъектов, зарегистрированных в этой дозе, разработают DLT, администрация к новым субъектам будет приостановлено до тех пор, пока SRC примет решение; На этом этапе после всесторонней оценки текущих данных о безопасности и эффективности SRC предоставит одно из следующих трех резолюций: ① Снижение дозы до более низкой дозы и зарегистрировать три оцениваемых субъекта; ② Добавить 3 дополнительных оцениваемых субъекта в текущую дозу; ③ Остановите эксперимент.

   SRC имеет комитет по рассмотрению безопасности, отвечающий за рассмотрение данных о безопасности субъектов, состоящих из исследователей и совместных медицинских мониторов. В ходе исследования SRC отвечает за защиту безопасности субъектов, и его обязанности следующие:

   Просмотреть вопросы безопасности каждого участника; Регулярно просматривать данные безопасности, в то время как субъекты продолжают получать учебную обработку; Оценить, необходимо ли расширить количество субъектов на каждом этапе и можно ли перейти к следующей стадии дозы, включая эскалацию дозы или снижение дозы; Сохраните данные исследования и результаты конфиденциальными.

2. Управление наркотиками:

Для всех полученных продуктов исследовательского вмешательства исследователь или назначенный персонал должен подтвердить, что соответствующие температурные условия сохраняются во время транспортировки, и были зарегистрированы и разрешены о любых несоответствиях и разрешаются перед использованием продуктов исследовательского вмешательства. Этот исследовательский продукт упакован в бутылки пенициллина и транспортируется сухой льдом. После получения его исследовательский центр хранит его на -75 ± 15 ℃.

Только зарегистрированные субъекты могут получать исследовательские вмешательства, и только уполномоченные сотрудники исследовательского центра могут предоставлять или проводить исследовательские вмешательства. Все исследовательские вмешательства должны храниться в безопасной, экологически контролируемой и контролируемой (вручную или автоматически) в соответствии с указанными условиями хранения, и только исследователи и уполномоченные сотрудники исследовательского центра имеют доступ к этой области.

Исследователь или менеджер по лекарственным средствам исследовательского центра должен учитывать и проверять продукты исследовательского вмешательства и вести соответствующие записи (т.е. Получение и проверку записей и окончательных записей об утилизации).

Оценка исследования:

Исследовательскую программу и ее расписание можно найти в «Графике исследований». В этой таблице перечислены все оценки и используют «x» для представления оценок, выполненных при каждом посещении. Если субъект не может перейти в пробный центр по особым причинам, субъект или его юридический представитель могут связаться с сотрудниками пробного центра с помощью других альтернативных средств (например, телефон или виртуальное видео). Детали нежелательных явлений и сопутствующих лекарств должны собираться во время общения. В течение этого периода участники могут не иметь возможности участвовать в лабораторных тестах и ​​клинических оценках, указанных во время посещения исследования, но вся соответствующая информация должна быть подробно рассмотрена. Если лабораторные данные субъектов собираются или клинические оценки проводятся с помощью альтернативных методов, следует подробно записывать соответствующую информацию.

Первичные показатели результата: индикаторы безопасности

1. Демография/история болезни:

   я. Настоящая история болезни: включая диагностическую основу, связанные с ним симптомы, историю развития, текущее и прошлое лечение/статус лечения и т. Д. II История других внутренних или хирургических заболеваний (особенно аллергия на наркотики, травма позвоночника и т. Д.); iii. Аномалии в гестационном возрасте и пренатальных исследованиях; IV Предыдущие госпитализации с рождения, включая продолжительность госпитализации, причинах, полученные лечения и прогрессирование заболевания; Если это возможно, предоставьте информацию о кодировании ICD-10 для каждого диагноза госпитализации; v. Семейная история

2. Физикальное обследование:

   я. Генеральное физическое обследование, включающее неврологическое обследование, должно быть проведено и регистрировано при назначенных посещениях, которые должны включать в себя, по крайней мере, следующее содержимое: голова/шея, глаза, уши, нос/горло, сердечно -сосудистая система, легкие, живот, мышечная система, центральная нервная система и кожа.

   II Жизненно важные признаки, высота и вес: перед измерением жизненно важных признаков субъекты должны отдыхать в тихой и нетронутой среде в течение не менее 3 минут, а затем измерять в полу на спине, включая температуру тела, систолическое и диастолическое артериальное давление, частоту дыхания, пульс и насыщение кислородом крови.

   iii. После интратекальной инъекции AAV-MECP2 лежите плоско в течение 6 часов с удалением подушки, а также измеряйте и регистрируют артериальное давление, частоту дыхания, пульс и насыщение кислородом каждые 15 минут (± 5 минут); После этого следите за вышеуказанными показателями каждый час (± 15 минут) до 6 часов после интратекальной инъекции AAV-MECP2.

   IV В течение периода скрининга необходимо измерить высоту и измеренный вес при назначенных посещениях.

3. Лабораторные расследования: я. Рутина мочи: удельный гравитация, значение pH, глюкоза, белок, кровь, кетоновые тела, билирубин, уробилиноген, нитрит, эстераза лейкоцитов (метод испытательной бумаги), микроскопическое исследование (если результаты испытаний крови или белка являются аномальными).

   II Рутина крови: количество эритроцитов, гемоглобин, количество тромбоцитов, количество лейкоцитов и количество классификации, гематокрит, средний корпускулярный объем, средняя концентрация корпускулярного гемоглобина и количество ретикулоцитов; iii. Биохимия крови: аспартат -аминотрансфераза (AST), аланин аминотрансфераза (ALT), гамма -глутамилтрансфераза (GGT), щелочная фосфатаза (ALP), общий билирубин, прямой билирубин, общий протеин, креатинин, азот моче

   IV Спектр миокардиального фермента: креатинкиназа (CK), изофермент креатинкиназы (CK-MB), гидроксибутиратдегидрогеназа (HBDH), лактатдегидрогеназа (LDH) и высокая чувствительность тропонин I (HSTNI).

   v. Функция коагуляции: активированное частичное время тромбопластина (APTT), время протромбина (PT), время тромбина (TT), фибриноген (FG, FIB) и D-димер.

   VI Иммунная функция: Количество субпопуляции лимфоцитов периферической крови:%CD3 、%CD4 、%CD8 、 CD4/CD8 、%CD19 、%CD16CD56 ； Система комплемента: общая активность комплемента (CH50), активность C3 и количественная оценка, активность C4 и количественная оценка.

   VII. Сывороточные цитокины включают в себя: TNFα 、 IFN-γ 、 IL-10 、 IL-10.

4. Электрокардиограмма (ЭКГ): обычная 12 свинцовых ЭКГ получается с использованием устройства ЭКГ, которое может автоматически рассчитать частоту сердечных сокращений и измерять интервалы PR, QRS, QT и QTC.
5. Эхокардиография: в течение периода скрининга будет планируется исключить потенциальные поражения сердца и сердечную дисфункцию. Экзамен был интерпретирован и проанализирован ультразвуковыми врачами и кардиологами в исследовательском центре.
6. Рентген грудной клетки: в течение периода скрининга рентгеновское обследование грудной клетки в основном проводится для исключения легочных инфекций, которые часто встречаются у пациентов. Если трудно поставить четкий диагноз на простой пленке, с согласия Guardian субъекта, можно выполнить дополнительное простые сканирования КТ в грудной клетке.
7. Глава МРТ: В течение периода проверки требуется сканирование простых МРТ головного МРТ для обнаружения любых анатомических нарушений или других поражений центральной нервной системы, которые необходимо исключить. Два головных МРТ-МРТ, запланированные в течение периода наблюдения, были использованы для оценки токсичности, связанной с инъекцией AAV-MECP2, и мониторинга развития центральной нервной системы.

Меры вторичного результата: оценка эффективности

1. RTT-специфические клинические глобальные впечатления от масштабной масштабной масштабы (CGI-S) и улучшение масштабных масштабов клинических впечатлений (CGI-I);
2. Анкета оценки тяжести RETT (RSSS);
3. Анкета поведения синдрома Ретта (RSBQ);
4. Пересмотренная оценка двигательного поведения (R-MBA);
5. Шкала функции ручного синдрома Ретта (RSHFS);
6. Анкета детских привычек сна;
7. Вопросник по воспитанию воспитания детей;
8. Шкала рейтинга развития Griffiths - китайская версия (GDS -C): только относительный возраст развития используется в качестве оценки достоверности. Если возраст старше 8 лет, а способность до 6 лет, оценка GDS-C все еще используется;
9. Шкала наблюдения по поведению диагностики аутизма (ADO);
10. Шкала оценки адаптивного поведения для детей в возрасте от 0 до 6 лет (второе издание) - форма оценки родителей;
11. Аберрантная шкала поведения (ABC);

12. Записи эпилепсии: во время исследования опекуны субъекта должны были записывать возникновение судорог, включая все даты с приступами и без него, включая презентацию, продолжительность, частоту и дату судорог. Носите его с собой при каждом последующем посещении для исследователей, чтобы оценить частоту и продолжительность эпилептических приступов.

    Частота эпилептических приступов будет определена с использованием упорядоченных переменных с пятью категориями: увеличение, без изменений, 75% ремиссии, 50% ремиссии и без приступов.

13. Видео -доказательства: будут сделаны короткие видеозаписи о процессе оценки субъектов в течение базового периода, периода госпитализации лекарств и 1, 3, 6 и 12 месяцев после инъекции. Если ненормальное поведение происходит в другое время, исследователи также могут принять решение добавить видео -доказательства. Родители/законные опекуны также могут предоставить домашние видео с улучшенными функциями отображения. После завершения записи исследовательская группа немедленно загрузит видео на зашифрованный компьютер или ноутбук и удалит видеофайл с карты хранения камеры. Любое видео, полученное сотрудничающей стороной, будет считаться конфиденциальными данными исследований. Исследовательская группа и партнеры будут нести ответственность за защиту информации об идентичности предметов и их родителей/опекунов при записи видео.
14. Электроэнцефалограмма (ЭЭГ);
15. Носимый браслет: рекордные условия сна;
16. Фактор дифференцировки роста 11 (GDF11) в спинномозговой жидкости и крови: секретируемый белок трансформирующего фактора роста - β (TGF - β) суперсемейство, в основном экспрессируемое в тканях мозга и отрицательно регулируя нейрогенез во время развития и взрослой жизни. Мутации в GDF11 могут привести к нарушениям развития, связанных с черепно -лицевой, спинной и нервной системой. Недавние данные свидетельствуют о том, что ген GDF11 является одним из генов -мишеней, регулируемых MECP2: MECP2 подавляет экспрессию GDF11, индуцируя метилирование гистона усилителя GDF11. У мышей RTT экспрессия GDF11 снизилась; Напротив, у мышей MDS экспрессия GDF11 увеличилась.

Предыдущие исследования показали, что GDF11 секретируется тканью головного мозга и может быть обнаружен в крови. Следовательно, этот эксперимент будет изучать изменения уровней GDF11 в крови до и после лечения.

Оценка иммуногенности:

In order to evaluate the humoral and cellular immune responses induced by AAV9 capsid after administration, peripheral blood was collected for anti-AAV9 antibody detection (ELISA method), and whole blood was collected for AAV antigen-specific T cell quantitative detection (IFN - γ enzyme-linked immunosorbent assay) on isolated peripheral blood mononuclear cells, IFN-γ Elispot). Иммуногенные образцы крови были отправлены в обозначенные сторонние лаборатории для тестирования.

Профилактическое пероральное введение преднизолона:

Вводится перорально за 24 часа до лечения и поддерживается в соответствии с правилами дозировки и отмены до 9 -й недели после лечения.

Почти все лекарства от генной терапии, используемые в организме человека, независимо от пути введения, наблюдали антиген-специфические ответы Т-клеток через 2-4 недели после введения. Потенциальными неблагоприятными последствиями этой реакции являются клиренс иммуноопосредованных трансдуцированных клеток и потеря трансгенной экспрессии.

Чтобы облегчить иммунный ответ организма на лекарства генной терапии AAV, субъекты должны принимать профилактические пероральные кортикостероиды и использовать преднизолон за 24 часа до получения инъекции.

Во время использования глюкокортикоидов следует проводить регулярные проверки функции печени, чтобы определить, можно ли уменьшить или остановить лекарство на основе показателей функции печени. Если значения GGT, AST или ALT составляют ≥ 2 × ULN, исследователи должны обеспечить соответствующее лечение на основе индивидуальной ситуации субъектов. Основываясь на предыдущем клиническом опыте работы с употреблением лекарств AAV, период высокого риска для восстановления фермента печени находится в пределах 2 недель после снижения гормонов или прекращения. Следовательно, мониторинг функции печени должен быть укреплен на этом этапе. Для вышеупомянутого плана использования и сокращения преднизолона исследователи могут вносить персонализированные коррективы на основе оценки безопасности субъектов. В дополнение к функции печени также необходимо учитывать результаты результатов периферических антиген-специфических Т-клеток в периферической крови, и при необходимости можно добавить другие иммуносупрессивные агенты. Если используемые глюкокортикоиды представляют собой препараты, отличные от преднизолона, дозировка и план отмены должны быть сформулированы на основе эквивалентной дозы преднизолона после конверсии.

Информированное согласие:

Дети в возрасте до 8 лет, участвующие в клинических испытаниях, должны получить подписанную форму информированного согласия от своего опекуна, и должны быть проинформированы о соответствующей информации о клиническом испытании в рамках сфера, которые субъекты могут понять. Когда ребенок имеет возможность принять решение согласиться участвовать в клиническом испытании, их собственное согласие также должно быть получено; Дети старше 8 лет (в том числе 8 лет), участвующие в клинических испытаниях, если у них есть возможность подписать форму информированного согласия, как сами, и их опекуны должны подписать форму информированного согласия. Если у них нет возможности подписать форму информированного согласия, их опекуны должны подписать форму информированного согласия.

Неблагоприятные медицинские события и методы лечения, кроме сопутствующего:

лекарства/лекарства, которые происходят в результате подписания формы информированного согласия до тех пор, пока первая администрация не будет зарегистрирована как история болезни/сопутствующие заболевания и история лечения в ECRF, и не должно быть записано на странице AE и сопутствующей странице лекарств/лечения; Если травма/повреждение не вызвано клиническими лабораторными процедурами обследования, он должен быть зарегистрирован как AE на странице AE, а для других методов лечения, кроме сопутствующих лекарств/лекарств для этого AE, они должны быть записаны на странице сопутствующего лекарства/лечения соответственно.

Конкретный технический маршрут подробно описан в графике исследований.

Ожидаемые побочные реакции и методы лечения:

Риски, связанные с участниками этого исследования в основном, включают риски, связанные с процедурами введения лекарств (пункция оболочки), риски, связанные с исследовательским препаратом AAV-MECP2, и риски, связанные с профилактической иммуносупрессией.

Риски, связанные с проколами инъекции оболочки:

1) Прокола инъекции оболочки, как правило, считается безопасной, и выбранные субъекты будут подвергаться сканированию магнитной резонансной томографии (МРТ) головного резонанса (МРТ) перед поясничной пункцией, чтобы исключить возможность внутрипранового пространства, занимающего поражения (особенно в задней ямке) или повышенное внутрикраниальное давление. Возможные риски поясничного пункта включают следующее: i. Головная боль после люмбальной пункции: пациенты, перенесшие поясничный пункс, испытывают головные боли из -за инфильтрации жидкости в близлежащие ткани после пункции. Головные боли обычно начинаются через несколько часов до двух дней после операции и могут сопровождаться тошнотой, рвотой и головокружением. Головные боли обычно возникают при сидящем или стоящем, и могут быть облегчены при леже. Головные боли после поясничного пункта могут длиться от нескольких часов до недели или дольше.

II Дискомфорт или боль в спине: может быть боль или нежность в нижней части спины. Боль может распространяться на заднюю часть ноги.

iii. Кровотечение: кровотечение вблизи места прокола, или в редких случаях это может произойти в эпидуральном пространстве.

Введение лекарств в этом исследовании было проведено квалифицированными врачами в больничной лечении. Перед инъекцией площадь инъекции была дезинфицирована и покрыта тканью. После инъекции проводили гемостаз дезинфекции и сжатия, и пациент был прикован к постели в течение 6 часов с удаленной подушкой. После операции субъекты будут тесно контролироваться, чтобы обеспечить своевременное обнаружение и лечение любых возможных осложнений.

Риски, связанные с AAV-MECP2:

Субъект может испытывать аллергические реакции на AAV-MECP2. Из -за иммунного ответа, вызванного интратекальной инъекцией AAV, субъекты обычно не могут получать другие генные терапии, доставленные векторами AAV того же серотипа.

В настоящее время существует три клинических испытания (NCT05317780, NCT05419492 и NCT04833970), зарегистрированные на Clinicaltrials.gov Веб -сайт для введения лекарств AAV в боковой желудочек для заболеваний центральной нервной системы, но клинические данные безопасности или эффективности еще не раскрыты. AVXS-101 является интратекальной версией генной терапии SMA Zolgensma. Исследование эскалации дозы фазы 1, проведенное у субъектов в возрасте от 6 до 60 месяцев, показало, что AVXS-101 был безопасным и хорошо переносимым при введении интратекально при максимальной дозе 2,4 × 1014 VG/человека, причем только один субъект испытывает повышенные уровни трансаминазы без повышенного билирубина; Один субъект испытал тромбоцитопению (подсчитано ниже 75 × 109/л), которая спонтанно разрешалась без вмешательства.

В следующем обобщено серьезные побочные реакции (события), зарегистрированные в препаратах AAV, которые были проданы или в клинических испытаниях:

1. Гепатотоксичность. Сообщалось о внутривенной инъекции препаратов AAV для лечения SMA, мышечной дистрофии Дюшенна (DMD) и X-связанной миопатии (XLMTM). Появление гепатотоксичности в значительной степени коррелирует с дозировкой вводящего препарата, а тяжелые случаи гепатотоксичности наблюдаются только у субъектов, получающих дозы AAV> 5 × 1013VG. За исключением токсичности печени в XLMTM, которая считается связанной с лежащей в основе заболевания печени пациента, опубликованный механизм других случаев токсичности печени считается повреждением клеток печени, опосредованным CD8+T -клетками, нацеленными на AAV.
2. Тромботические микрососудистые заболевания. Сообщается при лечении SMA и DMD с внутривенной инъекцией лекарств AAV, возникновение этого события также зависит от дозы, и все случаи были субъектами, которые получали дозы AAV ≥ 5 × 1013VG. Из -за наличия лабораторных доказательств активации комплемента во многих из этих случаев считается, что их возникновение связано с активацией системы комплемента комплексами антигенов, направленными на AAV.
3. Миокардит и миозит. Сообщалось только о внутривенной инъекции препаратов AAV в DMD. Основываясь на специфической паттерне мутации гена DMD, времени начала и реакции на иммуносупрессивную терапию, присутствующую в случае, предполагается, что сущность таких токсичных событий является иммунный ответ организма на генетически модифицированный продукт «Мини -белок атрофии атрофии».
4. Токсичность дорсального корня (DRG). Токсичность DRG с клиническими проявлениями (аномальное ощущение рук и ног) была зарегистрирована только у одного пациента с семейным боковым склерозом (ALS). Этот случай получил интратекальную дозу 4,2 × 1014 VG препарата AAV. Токсичность DRG, о которой сообщалось в других исследованиях, была случайно обнаружена во время вскрытия субъектов AAV, и у субъектов не было соответствующих клинических проявлений до их смерти.
5. Ненормальный мозг МР сигнализирует. Было сообщено клиническое исследование о лечении поздней детской болезни Баттена (болезнь CLN2) двусторонней инъекцией паренхимы головного мозга в лекарственных средствах AAV при стереотаксической локализации. В течение 48 часов после инъекции МР головы субъекта показал гиперинтенсивность Т2, диффузионные гиперинтенсивности и диффузионные ограниченные сигналы, локализованные в месте инъекции. Последующее наблюдение МР показало, что все субъекты разработали новые высокие области T2. Исследователи не обнаружили никаких клинических последствий, связанных с аномальными МС -сигналами. Предполагается, что аномальные МС -сигналы, которые появляются на ранней стадии после введения, связаны с устойчивым отек/воспалением тканей, вызванной самой высокой концентрацией препаратов AAV вокруг кончика инъекционного катетера, в то время как высокие сигналы T2, которые, по -видимому, трудно определить, связаны ли они с прогрессированием заболевания, препаратами AAV или процедурами инъекции.

Исследования образцов пациентов (через 1 год после введения) и нечеловеческих приматов (через 1 месяц после инъекции) показали, что вероятность интеграции AAV в геном низкая. Основываясь на записи безопасности AAV в клинических испытаниях, текущий консенсус в области генной терапии заключается в том, что AAV имеет низкую генетическую токсичность у людей.

Предварительные доклинические оценки безопасности AAV-MECP2 у гуманизированных мышей RTT и крабов, употребляющих макаки, ​​показали, что AAV-MECP2 не вызывал повреждения функции печени или почек, повреждение нерва, иммунная токсичность или гистопатологические изменения в важных органах у животных, а общее состояние животных было хорошим. Следовательно, существующие данные AAV-MECP2 не указывают на четкие клинические риски. Наиболее распространенным побочным событием, ожидаемом для субъектов, получающих AAV-MECP2, может быть повышение ферментов печени на 1/2 степени.

Риски, связанные с профилактической иммуносупрессией:

Этот протокол предусматривает, что начиная с одного дня до введения AAV-MECP2, должно быть начато пероральное введение 1 мг/кг преднизолона или эквивалентная доза других глюкокортикоидов, и дозировка должна поддерживаться в течение как минимум 30 дней до медленного восстановления. Цель использования глюкокортикоидов состоит в том, чтобы подавить врожденные и приобретенные иммунные ответы, вызванные векторами AAV, и уменьшить иммунные реакции, которые вредны для безопасности и эффективности. При использовании гормонов, побочные эффекты, связанные с гормонами, включая оппортунистические инфекции, будут контролироваться у субъектов.

Кортикостероиды (такие как метилпреднизолон и преднизон) имеют несколько прозрачных побочных эффектов, включая гипертонию, тахикардию, застойную сердечную недостаточность, изменения в сывороточных электролитах, гипергликемию, боль, повышенную азот мочевины и креатинин, остеопороз и ишемический нехваток, снижение антифекционной способности, демонстрация, трюка, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоциональная эмоциональность, трюка, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоция, эмоциональная эмоция, эмоциональная эмоция, эмоциональная эмоциональная. Тошнота, рвота, увеличение веса, повышенное внутриглазное давление и индукция катаракты.

Во время использования гормонов исследователи будут внимательно следить за вышеупомянутыми побочными эффектами, особенно оппортунистическими инфекциями, которые могут возникнуть у субъектов.

Статистический анализ Это исследование представляет собой исследование ранней дозы с основной целью оценки безопасности, поэтому не было проведено формального расчета размера выборки.

Безопасность и переносимость лечения оцениваются на основе частоты и тяжести побочных эффектов, возникающих в течение одного года после введения. Доля субъектов с любым AE, любым SAE, любым AE, связанным с исследовательским препаратом, и любым ≥ AE 3 AE, будет статистически проанализирована в целом и с помощью классов системного органа (SOC) и предпочтительного термина (PT) соответственно. Частота нежелательных явлений в различных когортах дозы также будет статистически проанализирована отдельно.

Из -за небольшого размера выборки и возможности различных показателей эффективности среди субъектов на разных стадиях заболевания все анализы эффективности в этом исследовании являются описательными и не включают выводную статистику.