Identifikation af B -regulatoriske celler ved flowcytometri

Allergenimmunoterapi (AIT) er en sygdomsmodificerende behandling af allergisk sygdom, der fremmer immunsystemtolerance, dvs. reducerer kliniske manifestationer af allergi og er den eneste kendte effektive behandling for at forhindre anafylaksi hos patienter, der tidligere har haft alvorlige reaktioner på insektvenomer. AIT inducerer en række immunsystemændringer for at lette denne proces, hvis mekanisme er produktionen af ​​en population af hvide blodlegemer kaldet B-regulerende celler (Bregs). Disse celler frigiver et kemikalie kaldet interleukin-10 (IL-10), som hæmmer (kontrollerer) den allergiske immunrespons. Succesen med AIT er vanskelig at etablere/overvåge under behandlingen. Ofte kan behandlingssucces kun etableres i slutningen af ​​en lang behandlingsperiode (typisk 3 år), og i øjeblikket er klinikere afhængige af patientsymptomer på eksponering for yderligere allergen. Derfor er der et krav om at identificere en markør (biomarkør), som kan testes for under behandling for at hjælpe klinikere med at etablere på et tidligere tidspunkt, hvis AIT viser succes, eller hvis der kræves en ændring af behandlingen. Denne forskning vil måle Breg- og IL-10-produktionen hos patienter før, på flere punkter under og efter afslutningen af ​​AIT for at fastslå, om der er et forhold mellem BREG/IL-10-koncentrationen og succes eller svigt i AIT til at kontrollere patientsymptomer på allergi. Håbet er, at Breg -måling kunne bruges i fremtiden som en biomarkør for AIT -effektivitet og derfor giver bevis for AIT -succes før end de nuværende protokoller eller etablering af fiasko i AIT og derfor fremskynde en ændring i behandlingen. Sidstnævnte vil sandsynligvis resultere i at spare tid med at forfølge en behandling, der ikke fungerer, men også for at forstå, når behandlingen allerede har nået optimal effektivitet og kan stoppes.

Overordnet mål:

At udvikle et flowcytometriassay til identifikation og kvantificering af humane B-regulatoriske celler for at muliggøre evaluering af deres potentielle rolle som en behandlingseffektivitetsbiomarkør i allergenspecifik immunterapi.

Primære mål:

1. Identifikation af en biomarkør, der definerer succes med allergenimmunoterapi
2. Udvikling af et nyt flowcytometriassay til at detektere og kvantificere B-regulerende celler i fuldblod/perifert blodmononukleær celle (PBMC) isolat
3. Bestem referenceintervaller for Breg-cellekvantificering i test- og kontrolgrupperne ved hjælp af konventionelle parametriske eller ikke-parametriske mål, afhængigt af egenskaberne ved de opnåede data

Sekundære mål:

1. Evaluering af ydelsen af ​​flowcytometri -metoderne i henhold til den sædvanlige laboratorieprotokol
2. Sammenligning af Breg -celle -kvantificering i kontrolgruppen verser testgruppen og testgruppen ved baseline -vers på AIT
3. Sammenligning af Breg -cellekvantificering hos patienter, der får subkutan og sublingual AIT
4. Sammenligning af allergenspecifikke blokerende antistoffer (allergenspecifikke IgG4) i testgruppen ved baseline og hos dem på AIT
5. Vurder korrelation af allergenspecifik blokering af antistofkvantificering med ændringer i fuldblod B-regulatoriske cellekoncentrationer