Identifisering av B -regulatoriske celler ved flytcytometri

Allergenimmunoterapi (AIT) er en sykdomsmodifiserende behandling for allergisk sykdom som fremmer immunsystemtoleranse, dvs. reduserer kliniske manifestasjoner av allergi og er den eneste kjente effektive behandlingen for å forhindre anafylaksi hos pasienter som tidligere har hatt alvorlige reaksjoner på insektvenomer. AIT induserer en rekke endringer i immunsystemet for å lette denne prosessen, hvor en mekanisme er produksjon av en populasjon av hvite blodlegemer som kalles B-regulerende celler (bregs). Disse cellene frigjør et kjemikalie kalt interleukin-10 (IL-10) som hemmer (kontroller) den allergiske immunresponsen. Suksessen til AIT er vanskelig å etablere/overvåke under behandlingen. Ofte kan behandlingssuksess bare etableres ved slutten av en lang behandlingsperiode (vanligvis 3 år), og for tiden er klinikere avhengige av pasientsymptomer på eksponering for ytterligere allergen. Derfor er det et krav å identifisere en markør (biomarkør) som kan testes for under behandlingen for å hjelpe klinikere med å etablere seg på et tidligere tidspunkt, hvis AIT viser suksess eller hvis en endring i behandlingen er nødvendig. Denne forskningen vil måle Breg- og IL-10-produksjonen hos pasienter før, på flere punkter under, og etter fullføring av AIT, for å fastslå om det er et forhold mellom Breg/IL-10-konsentrasjonen og suksessen eller fiaskoen til AIT i å kontrollere pasientsymptomer på allergi. Håpet er at bregmåling kan brukes i fremtiden som en biomarkør for AIT -effekt, og derfor gir bevis på AIT -suksess raskere enn nåværende protokoller, eller etablerer svikt i AIT og derfor fremskyndte en endring i behandlingen. Sistnevnte vil sannsynligvis resultere i å spare tid på å forfølge en behandling som ikke fungerer, men også for å forstå når behandlingen allerede har nådd optimal effektivitet og kan stoppes.

Generelt mål:

For å utvikle en flowcytometri-analyse for identifisering og kvantifisering av humane B-regulerende celler for å tillate evaluering av deres potensielle rolle som en behandlingseffektivitetsbiomarkør i allergenspesifikk immunterapi.

Primære mål:

1. Identifisering av en biomarkør som definerer suksessen med allergenimmunoterapi
2. Utvikling av en ny flytcytometri-analyse for å oppdage og kvantifisere B-regulerende celler i helblod/perifert blodmononukleær celle (PBMC) isolat
3. Bestem referanseintervallene for kvantifisering av bregceller i test- og kontrollgruppene ved bruk av konvensjonelle parametriske eller ikke-parametriske tiltak, avhengig av egenskapene til de oppnådde dataene

Sekundære mål:

1. Evaluering av ytelsen til flytcytometri -metodene som vanlig laboratorieprotokoll
2. Sammenligning av Breg Cell -kvantifisering i kontrollgruppen Vers testgruppen, og testgruppen ved baselinevers på AIT
3. Sammenligning av kvantifisering av bregceller hos pasienter som får subkutan og sublingual AIT
4. Sammenligning av allergenspesifikke blokkerende antistoffer (allergenspesifikk IgG4) i testgruppen ved baseline og hos de på AIT
5. Vurdere korrelasjon av allergenspesifikk blokkering av antistoffkvantifisering med endringer i helblod B-regulatoriske cellekonsentrasjoner