Serumspiegel von Lipopolysaccharid-bindendem Protein (LBP) und Atherosklerose bei Hämodialysepatienten

Studiendesign und Population

Patientenpopulation

Um in die Studie aufgenommen zu werden, müssen die Patienten mindestens 20 Jahre alt sein und sich seit mindestens 3 Monaten in ambulanter Hämodialyse (HD) befinden. Patienten werden ausgeschlossen, wenn sie eine akute Infektion oder bösartige Erkrankung hatten. Insgesamt 360 HD-Langzeitpatienten werden nach dem Zufallsprinzip eingeladen und erklärten sich bereit, an der Studie teilzunehmen. Die Krankenakte wird für jeden Probanden von einem an der Studie beteiligten Arzt gründlich überprüft. Informationen wie die zugrunde liegende Nierenerkrankung, die Vorgeschichte von Herz-Kreislauf-Erkrankungen und andere komorbide Erkrankungen werden abstrahiert.

Studienparameter

Prädialyse-Blutproben werden an einem Tag unter der Woche entnommen. Innerhalb von 30 min nach der Entnahme wird das verbleibende Blut bei 3.000 g für 10 min zentrifugiert, sofort aliquotiert und bis zur weiteren Analyse bei -70 °C eingefroren. Gesamtcholesterin im Serum wird durch die Reaktion von Cholesterinesterase/Cholesterinoxidase/Peroxidase unter Verwendung von Hitachi 747 (Hitachi, Bohemia, NY, USA) gemessen. HDL-Cholesterin wird nach Fällung mit Polyethylenglykol bei Raumtemperatur quantifiziert. Serumglukosekonzentrationen werden durch das Glukoseoxidaseverfahren gemessen. Low-Density-Lipoprotein-Cholesterin wird nach der Friedewald-Formel berechnet. Die Gesamtserumtriglyceride werden durch die Reaktion von Glycerol/Phosphat/Oxidase und Peroxidase gemessen. Die Serumspiegel des hochempfindlichen C-reaktiven Proteins (hsCRP) werden unter Verwendung eines Behring Nephelometer II (Dade Behring, Tokyo, Japan) gemessen. Die Plasmaspiegel von Interleukin-6 (IL-6) und löslichem CD14 (sCD14) werden durch einen im Handel erhältlichen enzymgebundenen Immunadsorptionstest (ELISA) (Quantikine HS Immunoassay Kit, R&D System, Minneapolis, MN) gemessen. Die Konzentrationen von Interleukin-6 (IL-10) und Tumornekrosefaktor-alpha (TNF-α) werden gleichzeitig mit dem Multiplex® (R&D Systems, Minnesota, MN, USA) bestimmt. Die LBP-Serumspiegel werden mit einem kommerziellen enzymgebundenen Immunosorbent-Assay (HK315-02, HyCult Biotech Inc., Uden, Niederlande) gemäß den Anweisungen des Herstellers gemessen. Die Intra- und Inter-Assay-Koeffizienten der LBP-Variation sind < 5 bzw. < 10 %. Außerdem wird Serum von 40 normalen Kontrollsubjekten für die Variation zwischen den Assays verwendet. Sowohl die Intra- als auch die Interassay-Variationskoeffizienten waren < 8,0 %. Alle Proben werden doppelt gemessen und der Mittelwert wird in μg/ml angegeben

Der Fettanteil wird mit bioelektrischer Impedanzspektroskopie gemessen

Die Ganzkörper-Messung der bioelektrischen Impedanzspektroskopie (BIS) mit einem Körperanalysegerät (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Deutschland) wird bei jedem der in die Studie aufgenommenen Teilnehmer wie zuvor beschrieben durchgeführt [28]. Kurz gesagt, die Messungen wurden am Tag vor der Dialyse durchgeführt, wobei der Patient 10 Minuten lang ruhig, auf dem Rücken liegend und entspannt im Dialysebett lag. Vier Elektroden wurden an Hand und Fuß des Patienten auf der kontralateralen Seite ihrer arteriovenösen Fistel angebracht. Das Grundprinzip dieser Maschine ist die Verwendung der Bioimpedanz-Spektroskopie, die den Flüssigkeitsgehalt des Körpers bestimmt, indem die seriellen Werte der elektrischen Impedanz gemessen werden, indem kleine elektrische Ströme im Mikroampere-Bereich bei 50 verschiedenen Frequenzen zwischen 5 und 1000 kHz angelegt werden. Diese Impedanzdaten werden verwendet, um die Menge an Gesamtkörperwasser, intrazellulärem Wasser und extrazellulärem Wasser durch ein spezielles Flüssigkeitsmodell und Informationen über andere Körperzusammensetzungen, wie Fettgewebe oder mageres Gewebe, durch ein physiologisches Körperzusammensetzungsmodell zu erhalten [29]. Die wichtigsten Schätzungen der durch BCM-BIS gemessenen Körperzusammensetzung lauten wie folgt: (1) Magergewebemasse (LTM – hauptsächlich Muskeln), Fettmasse (FAT) und Fettgewebemasse (ATM – hauptsächlich Fett mit seiner relevanten Hydratation)

Messung der arteriellen Steifigkeit

Die Arteriensteifigkeit wird durch Messen von PWV im Herz-Femur-Segment unter Verwendung eines automatischen Wellenformanalysators bewertet.