Allogene virusspezifische T-Zelllinien (VSTs)

Die Forscher bewerteten den klinischen Nutzen von Multivirus-VSTs bei Empfängern von Transplantaten von übereinstimmenden verwandten, übereinstimmenden nicht verwandten oder haploidentischen Spendern. Bis heute wurden 10 Multivirus-gerichtete VSTs in klinischer Qualität aus Spender-PBMCs generiert. Diese Linien waren polyklonal, umfassten sowohl CD4+ (57±5%) als auch CD8+ (35±5%) Zellen und behielten die Expression der Gedächtnismarker CD45RO+CD62L+ (58±8%). Ihre Spezifität war abhängig von der vorherigen viralen Exposition des Zellspenders; 7/8 der getesteten Linien zeigten Aktivität gegen Adv, 8/8 gegen CMV, 6/8 gegen EBV. Keine der Linien reagierte auf PHA-Blasten des Empfängers, was auf einen Mangel an alloreaktivem Potential in diesen schnell erzeugten Linien hindeutet.

Die Forscher verabreichten diese Multivirus-spezifischen, von Spendern stammenden VSTs 3 allogenen HSCT-Empfängern in einer Dosiseskalationsstudie, alle auf DL1 (5x106/m2). Es gab keine unmittelbaren Infusionstoxizitäten und keine akute GvHD de novo, was die In-vivo-Sicherheit dieser mVST belegt. Darüber hinaus wurde bei 1 Patienten mit refraktärer CMV eine antivirale Wirksamkeit beobachtet. Darüber hinaus haben sie in einem kürzlich veröffentlichten Artikel des Baylor College of Medicien (Anapoulous et al., STM 2014) VSTs behandelt, die mit einer ähnlichen Methodik hergestellt wurden, aber auf 5 statt auf 3 Viren mit Spezifität für das BK-Virus und HHV6 abzielten. In dieser Studie wurden 10 Patienten mit 4 auf DL1 (5x10e6/m2), 4 auf DL2 (1x10e7/m2) und 2 auf DL3 (2x10e7/m2) behandelt und sahen wiederum keine unmittelbaren Infusionstoxizitäten und keine de novo akute GvHD, was demonstriert die In-vivo-Sicherheit dieser mVST. Drei Patienten erhielten die Zellen als Virusprophylaxe (Tage 38–43 nach HSCT) und keiner entwickelte Virusinfektionen bis zu 3 Monate nach der Behandlung. Die anderen 7 Patienten erhielten die Zellen zur Behandlung einer oder mehrerer aktiver Infektionen zwischen den Tagen 59–139 nach HSCT. Basierend auf Viruslastmessungen bis Tag 42 nach der Infusion waren die VSTs erfolgreich bei der Kontrolle aktiver Infektionen mit CMV (1 vollständiges (CR) und 1 partielles Ansprechen (PR)), EBV (2 CRs, einschließlich eines Falles von offener PTLD); Adv (1 CR); HHV6 (1 CR); und BK (3 CR, 1 PR, 1 NR). Bemerkenswerterweise hatten 3 BK-Virus-Responder eine Gewebeerkrankung mit schwerer hämorrhagischer Zystitis, und alle zeigten eine deutliche Verbesserung oder ein Verschwinden der Hämaturie nach der Infusion. Ein Patient hatte anschließend eine Episode von vorübergehenden, aber schweren Blasenschmerzen in Verbindung mit einer Entzündung, die auf der Zytoskopie beobachtet wurde, zusammenfallend mit einem 6-log-Abfall der BK-Viruslast im Urin. Der einzige Non-Responder war ein Patient mit BK-Infektion, dessen Linie keine Aktivität für dieses Virus aufwies, was wahrscheinlich den Serostatus des Spenders widerspiegelt. Darüber hinaus reaktivierten 3 Patienten später andere Viren als die, gegen die sie ursprünglich behandelt wurden, aber alle heilten diese Infektionen bis zur 12. Woche, ohne dass zusätzliche Zellinfusionen erforderlich waren (CMV: 1CR; EBV: 1CR; BK: 1CR; HHV6: 1CR ). Schließlich erhielt 1 Patient Multivirus-spezifische VSTs im Rahmen eines Einzelpatientenprotokolls als Notfallbehandlung für weit verbreitete und massive Rituximab-resistente EBV-PTLD. Nach der VST-Behandlung kam es zu einem sofortigen Rückgang der EBV-Viruslast des Patienten mit vollständiger und anhaltender Auflösung der PTLD, zusammenfallend mit einem Anstieg der zirkulierenden EBV-spezifischen T-Zellen. Die durch die schnell expandierenden EBV-gerichteten T-Zellen vermittelte profunde Antitumoraktivität erzeugte jedoch auch ein transientes systemisches Entzündungsreaktionssyndrom, das mit Steroiden und Anti-TNFR-Antikörpern ohne langfristige Nebenwirkungen kontrolliert wurde.

Daher war die Infusion von Spender-abgeleiteten, Multivirus-spezifischen VSTs, die mit Pepmixen klinischer Qualität erzeugt und entweder prophylaktisch oder als Behandlung für eine oder mehrere Virusinfektionen infundiert wurden, sicher und wird mit dem Auftreten von Virus-reaktiven T-Zellen im peripheren Blut in Verbindung gebracht in der Lage, eine Infektion mit den oben genannten Viren zu kontrollieren.