Wirkung von Brokkolisprossenextrakt auf die Keratinozytendifferenzierung in normaler Haut

10 erwachsene Freiwillige, darunter afroamerikanische, kaukasische, männliche und weibliche Teilnehmer, werden aus Eltern von Patienten rekrutiert, die in der Klinik für Kinderdermatologie gesehen wurden. Jeder Teilnehmer erhält 7 ml Brokkolisprossenextrakt (BSE) in Jojobaöl, das 3500 nmol Sulforaphan enthält (siehe Zubereitung des Brokkolisprossenextrakts unten). Jede Nacht werden 500 nmol Sulforaphan aufgetragen. Die Teilnehmer tragen die BSE-Jojobaöl-Mischung über einen Kreis von 3 cm Durchmesser jede Nacht für 7 aufeinanderfolgende Nächte auf dem Oberarm auf. Auf den Querlenker wird nur Jojobaöl aufgetragen. Beide Arme werden jede Nacht mit Frischhaltefolie verschlossen. Nach der siebten Nacht wird den Freiwilligen eine 6-mm-Biopsie von jedem Arm (insgesamt 2) von einem Facharzt für Dermatologie durchgeführt. Die Biopsien werden mit Alkohol gereinigt, mit 0,5–1 ml 1 %igem Lidocain mit Epinephrin betäubt und mit einer nicht resorbierbaren 4–0-Nylonnaht verschlossen. Die Biopsiestelle wird mit Vaseline und einem Pflaster abgedeckt. Der Bereich wird 24 Stunden lang bedeckt gehalten, danach kann er mit Seife und Wasser gewaschen und dann mit Vaseline und einem Pflaster wiederhergestellt werden. Die Naht wird 10-14 Tage nach dem Eingriff entfernt. Wir gehen davon aus, dass die Dauer der Studie vom ersten Besuch bis zum letzten Besuch zur Nahtentfernung etwa 1 Monat dauern wird. Den Teilnehmern wird gesagt, dass sie für die Dauer der Studie keine topischen Medikamente oder rezeptfreie Lotionen oder Cremes auftragen sollen, und sie werden auch angewiesen, sich unter der Dusche mit Dove-Seife zu waschen. Es wird ihnen auch geraten, eine Ernährung zu vermeiden, die reich an Kreuzblütlern wie Brokkoli, Senf und Meerrettich ist. Die Biopsieergebnisse werden jeweils halbiert. Eine Hälfte zum Einfrieren für Kryoschnitte und Immunfluoreszenzfärbung und die andere Hälfte zur Verwendung für die Protein- oder RNA-Extraktion für molekulare Assays (Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion und/oder quantitative Polymerase-Kettenreaktion für ausgewählte Boten-RNAs und Western-Blotting für ausgewählte Proteinantigene). . Die Konzentrationen von Keratin 1, Keratin 5, Keratin 10, Keratin 14, Keratin 16, Keratin 17 und Nrf2 werden sowohl mit Immunfluoreszenz als auch mit RNA-PCR untersucht.