Efecto del extracto de brotes de brócoli en la diferenciación de queratinocitos en piel normal

Se reclutarán 10 voluntarios adultos, incluidos participantes afroamericanos, caucásicos, hombres y mujeres, de padres de pacientes atendidos en la clínica de dermatología pediátrica. Cada participante recibirá 7 ml de extracto de brotes de brócoli (BSE) en aceite de jojoba, que contiene 3500 nmol de sulforafano (consulte la preparación del extracto de brotes de brócoli a continuación). Se aplicarán 500 nmol de sulforafano cada noche. Los participantes se aplicarán la mezcla BSE-aceite de jojoba sobre un círculo de 3 cm de diámetro en la parte superior del brazo todas las noches durante 7 noches consecutivas. El brazo de control solo tendrá aplicado aceite de jojoba. Ambos brazos se ocluirán con una envoltura de saran todas las noches. Después de la séptima noche, a los voluntarios se les tomará una biopsia de 6 mm de cada brazo (2 en total), realizada por un residente de dermatología. Las biopsias se limpiarán con alcohol, se insensibilizarán con 0,5-1 cc de lidocaína al 1 % con epinefrina y se cerrarán con una sutura no absorbible de nylon 4-0. El sitio de la biopsia se cubrirá con vaselina y una tirita. La zona se mantendrá tapada durante 24 horas, tras las cuales se podrá lavar con agua y jabón y luego recuperar con vaselina y una tirita. La sutura se retirará 10-14 días después del procedimiento. Desde la visita inicial hasta la visita final para la extracción de las suturas, esperamos que la duración de la prueba dure aproximadamente 1 mes. Se les indicará a los participantes que eviten aplicar cualquier medicamento tópico o lociones o cremas de venta libre durante la duración del estudio y también se les indicará que se laven con jabón Dove en la ducha. También se les aconsejará que eviten una dieta rica en plantas crucíferas como el brócoli, la mostaza y el rábano picante. Los resultados de la biopsia se dividirán por la mitad. Una mitad para congelar para crioseccionado y tinción de inmunofluorescencia y la otra mitad para ser utilizada para la extracción de proteínas o ARN para ensayos moleculares (reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y/o reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa para ARN mensajeros seleccionados y transferencia Western para antígenos proteicos seleccionados) . Los niveles de queratina 1, queratina 5, queratina 10, queratina 14, queratina 16, queratina 17 y Nrf2 se estudiarán tanto con inmunofluorescencia como con ARN PCR.