Efeito do extrato de broto de brócolis na diferenciação de queratinócitos em pele normal

Dez voluntários adultos, incluindo participantes afro-americanos, caucasianos, homens e mulheres, serão recrutados entre pais de pacientes atendidos na clínica de dermatologia pediátrica. Cada participante receberá 7ml de extrato de broto de brócolis (BSE) em óleo de jojoba, contendo 3500 nmol de sulforafano (veja a preparação do extrato de broto de brócolis abaixo). 500 nmol de sulforafano serão aplicados todas as noites. Os participantes aplicarão a mistura BSE-óleo de jojoba em um círculo de 3 cm de diâmetro na parte superior do braço todas as noites por 7 noites consecutivas. O braço de controle terá apenas óleo de jojoba aplicado. Ambos os braços serão ocluídos com filme saran todas as noites. Após a sétima noite, os voluntários farão uma biópsia de 6mm de cada braço (2 no total), realizada por um residente de dermatologia. As biópsias serão limpas com álcool, anestesiadas com 0,5-1cc de lidocaína a 1% com epinefrina e fechadas com fio inabsorvível de náilon 4-0. O local da biópsia será coberto com vaselina e um curativo. A área será mantida coberta por 24 horas, após o que poderá ser lavada com água e sabão e depois recoberta com vaselina e um curativo. A sutura será removida 10-14 dias após o procedimento. Desde a visita inicial até a visita final para remoção da sutura, esperamos que a duração do teste seja de aproximadamente 1 mês. Os participantes serão instruídos a evitar a aplicação de qualquer medicamento tópico ou loções ou cremes de venda livre durante o estudo e também serão instruídos a se lavar com sabonete Dove no chuveiro. Eles também serão aconselhados a evitar uma dieta rica em plantas crucíferas, como brócolis, mostarda e raiz-forte. Os resultados da biópsia serão divididos ao meio. Uma metade para ser congelada para criosseccionamento e coloração por imunofluorescência e a outra metade para ser usada para extração de proteínas ou RNA para ensaios moleculares (reação em cadeia da polimerase em tempo real e/ou reação em cadeia da polimerase quantitativa para RNAs mensageiros selecionados e western blotting para antígenos de proteínas selecionados) . Os níveis de queratina 1, queratina 5, queratina 10, queratina 14, queratina 16, queratina 17 e Nrf2 serão estudados por imunofluorescência e PCR de RNA.