Effect van Broccoli Sprout-extract op keratinocytdifferentiatie in normale huid

10 volwassen vrijwilligers, waaronder Afro-Amerikaanse, blanke, mannelijke en vrouwelijke deelnemers, zullen worden gerekruteerd uit ouders van patiënten die in de pediatrische dermatologiekliniek worden gezien. Elke deelnemer krijgt 7 ml extract van broccolispruiten (BSE) in jojoba-olie, met 3500 nmol sulforafaan (zie de bereiding van extract van broccolispruiten hieronder). Elke nacht wordt 500 nmol sulforafaan aangebracht. De deelnemers brengen het mengsel van BSE-jojoba-olie gedurende 7 opeenvolgende nachten elke nacht in een cirkel met een diameter van 3 cm op de bovenarm aan. Op de bedieningsarm wordt alleen jojoba-olie aangebracht. Beide armen worden elke nacht afgesloten met saran wrap. Na de zevende nacht zullen de vrijwilligers een biopsie van 6 mm laten nemen van elke arm (2 in totaal), uitgevoerd door een dermatologie-assistent. De biopsieën worden gereinigd met alcohol, verdoofd met 0,5-1 cc lidocaïne 1% met epinefrine en gesloten met een 4-0 nylon niet-resorbeerbare hechting. De biopsieplaats wordt bedekt met vaseline en een pleister. Het gebied wordt gedurende 24 uur afgedekt, waarna het kan worden gewassen met water en zeep en vervolgens kan worden hersteld met vaseline en een pleister. De hechting wordt 10-14 dagen na de ingreep verwijderd. Vanaf het eerste bezoek tot en met het laatste bezoek voor het verwijderen van hechtingen verwachten we dat de duur van de proef ongeveer 1 maand zal duren. De deelnemers zullen worden verteld om tijdens de duur van het onderzoek geen actuele medicatie of vrij verkrijgbare lotions of crèmes toe te passen en ze zullen ook worden verteld om zich onder de douche met Dove-zeep te wassen. Ze zullen ook worden geadviseerd om een ​​dieet met veel kruisbloemige planten zoals broccoli, mosterd en mierikswortel te vermijden. De biopsieresultaten worden elk in tweeën gedeeld. De ene helft moet worden ingevroren voor cryosectie en immunofluorescentiekleuring en de andere helft moet worden gebruikt voor eiwit- of RNA-extractie voor moleculaire assays (real-time polymerasekettingreactie en/of kwantitatieve polymerasekettingreactie voor geselecteerde messenger-RNA's en western-blotting voor geselecteerde eiwitantigenen) . De niveaus van keratine 1, keratine 5, keratine 10, keratine 14, keratine 16, keratine 17 en Nrf2 zullen worden bestudeerd met zowel immunofluorescentie als RNA-PCR.