ERASE – Auswirkungen von COVID-19 auf die Malariakontrolle (ERASE)

1. EINLEITUNG

1.1. Malaria-Epidemiologie und globale Trends Weltweit gab es im Jahr 2020 schätzungsweise 241 Millionen Malariafälle in 85 Malaria-Endemieländern, ein Anstieg gegenüber 227 Millionen im Jahr 2019, wobei der größte Teil dieses Anstiegs auf Länder in der afrikanischen Region der WHO zurückzuführen ist.

Obwohl Malaria immer noch eine große Bedrohung für die öffentliche Gesundheit darstellt, wurden in den letzten zwanzig Jahren enorme Fortschritte bei der Malariabekämpfung erzielt, wodurch schätzungsweise 1,5 Milliarden Fälle abgewendet und 7,6 Millionen Menschenleben gerettet wurden. Die Malaria-Sterblichkeit sank im Zeitraum von 2000 bis 2019 um 60 %, insbesondere in Afrika, wo politisches Engagement, ausgelöst durch die Abuja-Erklärung von 2000, der Schlüssel zum Erfolg war. Zusammen mit einer starken politischen Führung veranschaulichen diese Daten den potenziellen Nutzen öffentlicher Gesundheitsprogramme für die Kontrolle und Prävention von Malaria. Doch trotz der erstaunlichen Ergebnisse, die in den letzten zwei Jahrzehnten erzielt wurden, stellte die COVID-19-Pandemie im Jahr 2020 eine entscheidende Herausforderung im Kampf gegen die Krankheit dar und stellte ein großes Risiko für Länder mit niedrigem und mittlerem Einkommen (LMICs) dar. Tatsächlich wurde in den Ländern südlich der Sahara neben der erheblichen Gefahr, die direkt für die ohnehin fragilen Gesundheitssysteme besteht, auch die Malariabekämpfung durch Unterbrechungen der Lieferkette und durch individuelle Anpassungen bei der Entscheidungsfindung gefährdet. Tatsächlich hängt die Malariakontrolle stark von der individuellen Entscheidung ab, sich behandeln zu lassen, und frühzeitige Mitteilungen zur Reduzierung der SARS-CoV2-Übertragung rieten den Menschen, bei Fieber zu Hause zu bleiben. Geostatistischen Modellen zufolge könnten diese Faktoren im schlimmsten Fall zu einem geschätzten Anstieg der Malariafälle um 21 % und einer fast doppelt so hohen Zahl malariabedingter Todesfälle in den kommenden Jahren beitragen. Darüber hinaus ist die tatsächliche COVID-19-Belastung in Ländern südlich der Sahara unbekannt und wird Seroprävalenzstudien zufolge wahrscheinlich weitgehend unterschätzt. All diese Faktoren trugen laut dem jüngsten Welt-Malaria-Bericht der WHO dazu bei, dass sich der rückläufige Trend bei der Inzidenz von Malariafällen (59 Fälle pro 1.000 gefährdete Menschen im Jahr 2020 im Vergleich zu 56 im Jahr 2019) und bei den Malaria-Todesfällen umkehrte, die von 534.000 auf über 534.000 stiegen im Jahr 2019 auf 602.000 im Jahr 2020.

Weitere wesentliche Herausforderungen bei der Ausrottung der Malaria sind Arzneimittelresistenz, der Erwerb von Mutationen, die die Diagnose beeinträchtigen – insbesondere solche, die die Empfindlichkeit von Schnelldiagnosetests beeinträchtigen – sowie der Zugang zu Behandlung und die Bereitstellung von Malariapräventionsinstrumenten wie mit Insektiziden behandelten Moskitonetzen (ITN), Indoor Residual Sprühen (IRS), saisonale Malaria-Chemoprävention (SMC) und intermittierende vorbeugende Behandlung für schwangere Frauen (IPTp).

1.3 FORSCHUNGSFRAGEN

1. Wie wirkte sich die COVID-19-Pandemie auf die Malariaversorgung und die Einstellung zur Malariaprävention bei schwangeren Frauen in den Distrikten Oyam und Kole aus?
2. Wie hoch ist die Prävalenz klinischer Resistenzen gegen SP und Artemisinin in den Distrikten Oyam und Kole?
3. Wie wirkten sich die COVID-19-Pandemie und die Malariaresistenz auf malariabedingte Ergebnisse bei schwangeren Frauen aus?

1.4 ZIELE 1.4.1 Hauptziel Das allgemeine Ziel der Studie besteht darin, die Auswirkungen der Malariaresistenz und der COVID-19-Pandemie auf die Prävention, Diagnose und Behandlung von Malaria bei schwangeren Frauen in Norduganda zu bewerten.

1.4.2 Spezifische Ziele

1. Bewerten Sie die Auswirkungen der COVID-19-Pandemie auf Malariapräventions- und -kontrollpraktiken für schwangere Frauen im Hinblick auf: i) Zugang zu Schwangerschaftsvorsorgebesuchen, ii) Verabreichung von IPTp, iii) Verhalten bei der Suche nach medizinischer Versorgung bei Fieber, iv) Gesundheitsdienstleister Einhaltung nationaler und internationaler Richtlinien, v) Bereitstellung und Verwendung von mit Insektiziden behandelten Netzen und Sprühen von Resten in Innenräumen in den Distrikten Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
2. Bewerten Sie die Inzidenz symptomatischer und schwerer Malaria in der Studienkohorte im Bezirk Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
3. Bewerten Sie die Determinanten der Malariaprävention und -kontrolle bei schwangeren Frauen in den Distrikten Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
4. Bewerten Sie die Inzidenz malariabedingter unerwünschter Folgen für Mutter und Fötus (mütterliche Anämie, Müttersterblichkeit, Abtreibung, niedriges Geburtsgewicht, Frühgeburt, perinatale Mortalität, plazentare Malaria) in den Distrikten Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
5. Bewerten Sie die Vorstellungen und das Wissen über SARS-CoV2-Infektion und Malaria bei schwangeren Frauen im Bezirk Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
6. Bewerten Sie die Prävalenz einer asymptomatischen P. falciparum-Infektion in der Studienkohorte im Bezirk Oyam und Kole für den Zeitraum März 2022 bis Juni 2023.
7. Bewerten Sie den Status zirkulierender dhfr- und dhps-Haplotypen durch die Beschreibung von Polymorphismen in den dhfr- und dhps-Genen von P. falciparum und schätzen Sie die Prävalenz kombinierter dhfr/dhps-mutierter Haplotypen im Zusammenhang mit Pyrimethamin- und Sulfadoxin-Resistenz in der Studienkohorte und in einer Population von Patienten mit diagnostizierter Pyrimethamin- und Sulfadoxin-Resistenz Malaria im Bezirk Oyam und Kole für den Zeitraum Juni 2022 bis Mai 2024.

8. Bewerten Sie das Auftreten und die lokale Ausbreitung der Artemisinin-Resistenz mithilfe der Analyse von Polymorphismen im P. falciparum-Kelch-13-Gen in der Studienkohorte und in einer Population von Patienten, bei denen Malaria in den Distrikten Oyam und Kole für den Zeitraum Juni 2022 bis Mai 2024 diagnostiziert wurde .

   2.0 METHODE UND MATERIALIEN 2.1 STUDIENDESIGN: Hierbei handelt es sich um eine auf Gesundheitseinrichtungen basierende prospektive Beobachtungsstudie, bei der quantitative Methoden der Datenerfassung zum Einsatz kommen. Zur Erhebung der Daten werden halbstrukturierte Fragebögen verwaltet. Die Daten werden prospektiv gesammelt, nachdem sich eine Kohorte schwangerer Frauen bis zur Entbindung einer Schwangerschaftsvorsorgeuntersuchung unterzogen hat. Außerdem wird eine Teilpopulation nicht schwangerer Personen mit diagnostizierter Malaria für die Resistenzerkennung rekrutiert. Die gesammelten Daten werden die Einstellung zur Malariaprävention während der COVID-19-Pandemie untersuchen, im Hinblick auf den Zugang zu Schwangerschaftsvorsorgebesuchen, die Verabreichung von IPTp, das Verhalten bei der Suche nach medizinischer Versorgung bei Fieber, die Verwendung von mit Insektiziden behandelten Netzen und das Besprühen von Innenräumen mit Rückständen, die Ideenfindung und vieles mehr Kenntnisse in Bezug auf SARS-CoV2-Infektion und Malaria.

   2.2 STUDIENAUFBAU Die Studie wird im Krankenhaus Aber und in ausgewählten Gesundheitseinrichtungen in den Distrikten Oyam und Kole in der Region Lango durchgeführt. Sowohl das Krankenhaus als auch die Bezirksgesundheitszentren werden von der NGO Doctors with Africa CUAMM verwaltet.

   Das St. John's Hospital Aber ist ein privates, gemeinnütziges Gemeinschaftskrankenhaus im Besitz der römisch-katholischen Diözese Lira und vom Uganda Catholic Medical Bureau akkreditiert. Das Krankenhaus wird von den Schwestern Mariens, der Mutter der Kirche, einer Ordensgemeinschaft, verwaltet. Das Krankenhaus verfügt über eine Kapazität von 220 Betten. Das Aber Hospital verzeichnet jährlich 27.827 Kontakte in der Ambulanz, 6.800 Aufnahmen mit einer Bettenauslastung von etwa 40 % und durchschnittlich 1.700 Müttergeburten pro Jahr mit einer Kaiserschnittrate von 21 %.

   Der Bezirk Oyam liegt im nördlichen Teil Ugandas. Die Gesamtbevölkerung beträgt 366.200 Menschen. Es grenzt an die Bezirke Gulu im Norden, Kiryandongo im Südwesten, Nwoya im Westen, Apac im Süden und Kole im Osten. Der Bezirk besteht aus 12 Unterbezirken, d.h. Stadtrat von Loro, Minakulu, Aber, Acaba, Ngai, Iceme, Otwal, Abok, Myene, Aleka, Kamdini und Oyam. Der Kole-Distrikt grenzt im Osten an den Lira-Distrikt, im Süden an den Apac-Distrikt und im Westen und Norden an den Oyam-Distrikt. Kole, die Bezirkshauptstadt, liegt etwa 28 Straßenkilometer nordwestlich von Lira, der größten Stadt der Subregion. Der Bezirk Kole ist in die folgenden Unterbezirke unterteilt: Aboke, Akalo, Alito, Ayer, Bala, Okwerodot, Stadtrat von Ayer.

   2.3 PROBENAHMEVERFAHREN UND SCHÄTZUNG DER PROBENGRÖSSE 2.3.1 Schätzung der Probengröße Widerstandserkennung

   Bedenkt, dass:

   • Die erwartete Prävalenz von Parasitämie bei asymptomatischen schwangeren Frauen beträgt 5 %
   • Die erwartete Prävalenz von Parasitämie bei schwangeren Frauen mit Fieber beträgt 13 %.
   • Im Jahr 2019 betrug die Prävalenz von P. falciparum, das mit Resistenzen verbundene Genpolymorphismen trägt, 20 % für Artemisinin-Derivate und 16 % für SP.

   Um den Anteil positiver Ergebnisse für P. falciparum mit einer absoluten Genauigkeit von 2 % bei einer Trennschärfe von 80 % und einem Signifikanzniveau von 5 % (zweiseitig) abzuschätzen, sind mindestens 800 schwangere Frauen erforderlich, was einen Wert von 10 berücksichtigt % Verlust bis zur Nachverfolgung. Die Forscher müssen 1200–1400 Frauen mit unbekanntem parasitologischem Status rekrutieren, um etwa 20 Resistenzen zu erkennen, selbst wenn man einen steigenden Trend berücksichtigt.

   Um das Erreichen der Mindeststichprobengröße zu unterstützen, muss der Forscher eine Teilpopulation nicht schwangerer, mikroskopisch bestätigter Malariapatienten aus dem Aber Hospital rekrutieren. Diese zusätzliche Rekrutierung erfolgt durch fortlaufende Rekrutierung bis zum Erreichen der Mindestprobengröße von 300 mikroskopisch bestätigten, mit P. falciparum infizierten Proben.

   Kohorte schwangerer Frauen Die Studienpopulation wird vom 1. Mai 2022 bis zum 30. Juni 2023 durch aufeinanderfolgende Stichproben rekrutiert.

   2.3.2 Probenahmeverfahren

   Die Gesundheitseinrichtungen werden durch gezielte Stichprobenauswahl ausgewählt. Die Probenahme erfolgt anhand folgender Kriterien:

   • Laborkapazität
   • Anwesenheit eines erfahrenen Mikroskopikers
   • Besuchsvolumen in der Schwangerschaftsvorsorge von mindestens 50 Besuchen pro Monat
   • Servicequalität gemäß regelmäßiger CUAMM-Bewertung

   2.3.3 Auswahl der Teilnehmer Teilnehmer, die zu den ausgewählten Gesundheitseinrichtungen kommen und die Zulassungskriterien erfüllen, werden in die Studie einbezogen. Die fortlaufende Einschreibung der Teilnehmer erfolgt bis zum Erreichen der für die Studie erforderlichen Mindeststichprobengröße.

   2.7 STUDIENVERFAHREN UND ZEITPLAN

   2.7.1 Studienverfahren Mikroskopie Dicke und dünne Blutausstriche werden mit 2 % Giemsa gefärbt und von erfahrenen Labortechnologen ausgelesen. Die Parasitendichte wird berechnet, indem die Anzahl der asexuellen Parasiten pro 200 Leukozyten gezählt wird (oder pro 500 Leukozyten, wenn die Zahl <10 asexuelle Parasiten/200 Leukozyten beträgt), wobei eine Leukozytenzahl von 8.000/µl angenommen wird. Ein Blutausstrich gilt als negativ, wenn bei der Untersuchung von 100 Hochleistungsfeldern keine asexuellen Parasiten festgestellt werden. Gametozytenämie wird auch anhand dicker Abstriche bestimmt. Zur Identifizierung der Parasitenart werden dünne Ausstriche verwendet.

   Molekulare Diagnose und Bestätigung der Plasmodium-Art Die Blutproben der Patienten werden bei der Aufnahme in die Gesundheitseinrichtung mit Filterpapier (Whatman 3 MM) entnommen. Die getrockneten Blutflecken (DBSs) werden durch einen Fingerstich (drei Tropfen Blut pro Teilnehmer) auf Filterpapieren gesammelt, die getrocknet und in Plastiktüten mit Trockenmittel aufbewahrt und vor der Entnahme in Kisten an einem kühlen, trockenen Ort bei Raumtemperatur gelagert werden zur molekularen Diagnostik und Arzneimittelresistenzanalyse an die ISS übertragen.

   Versand der Blutproben Die gesammelten Blutproben werden zur erweiterten Polymorphismusanalyse nach Italien verschickt. Während des Versands werden alle Proben an einem trockenen, kühlen Ort bei Raumtemperatur an das italienische Nationalinstitut für Gesundheit (Istituto Superiore di Sanità, ISS) gelagert.

   Erweiterte Analyse des Polymorphismus Die gesamte genomische DNA wird gemäß der Empfehlung des Herstellers mit den PureLink Genomic DNA Kits von Invitrogen aus Filterblots (3MM Whatman) extrahiert. Die Parasitenidentifizierung basiert auf einem Nested-PCR-Assay, der auf das 18S-rRNA-Gen abzielt. Das 18S-rRNA-Gen wird als Ziel verwendet, da es sowohl hochkonservierte als auch variable Regionen für jede Plasmodium-Art enthält. Auf die gattungsspezifische PCR folgt eine speziesspezifische PCR-Amplifikation für Plasmodium. Amplikons aus der zweiten PCR werden durch Elektrophorese auf einem 2 %igen Agarosegel aufgetrennt und zur Visualisierung mittels ultravioletter Durchbeleuchtung mit Ethidiumbromid angefärbt. Das Vorliegen einer Parasitämie wird bestätigt, wenn die erwartete Bandengröße entsprechend P. falciparum, P. vivax, P. malariae und/oder P. ovale identifiziert wird.

   Beurteilung der Arzneimittelresistenz von Plasmodium falciparum. Zielgene für Arzneimittelresistenz von P. falciparum: Pfk13-Propeller, Pfdhfr und Pfdhps. Die Polymorphismusanalyse der Propellerdomäne des Pfk13-Gens wird durch PCR-Amplifikationen und anschließende Sequenzierung durchgeführt. Die Analyse des Pfdhfr-Gens an den Codons 51, 59, 108 und des Pfdhps-Gens an den Codonpositionen 436, 437, 540, 581, 613 erfolgt mittels Amplifikationen und anschließender Sanger-Sequenzierung. Kommerzielle Oligonukleotid-Primerpaare für Pfk13 werden auf der Grundlage des veröffentlichten Artikels von Taylor et al. erhalten, während für die Analyse der dhfr- und dhps-Gene Primerpaare auf der Grundlage des veröffentlichten Artikels von Menegon et al. erhalten werden. [31]. Die erhaltenen Sequenzen werden mit der Accelrys DS Gene-Software zusammengestellt und analysiert. PlasmoDB-Gen-Identifikationsnr. PF3D7_1343700 (S. falciparum Stamm 3D7) wird als Referenz bei der Nummerierung der Nukleotid- und Aminosäurepositionen verwendet. Molekulare Studien werden nur zu Forschungszwecken durchgeführt und haben keinen Einfluss auf die klinische Behandlung der Studienpatienten.

   Um den Kapazitätsaufbau vor Ort zu fördern, wird ein Labormitarbeiter des Aber-Krankenhauses an einer zweiwöchigen Exposition im Referenzlabor in Italien teilnehmen.

   Studienzeitpunkte ZEITPUNKT STUDIENVERFAHREN UND DATENSAMMLUNG REKRUTIERUNG (ANC-BESUCH) – Vollständiger Fragebogen, der von einem geschulten Gesundheitspersonal verwaltet wird, um demografische Informationen zu sammeln (z. B. Alter, Wohnort), sozioökonomische Faktoren (z. Bildung, Beruf), Anzahl und Ergebnis früherer Schwangerschaften, Datum der letzten Menstruation, Besitz und Verwendung von Bettnetzen, Einhaltung der Malaria-Chemoprävention, Gründe für die Nichteinhaltung, Malariaverhalten, Hindernisse bei der Verabreichung von IPTp, Verwendung von ITNs, wahrgenommene Auswirkungen von COVID-19 wird verabreicht.

   • Klinische Untersuchung zur Beurteilung des allgemeinen Wohlbefindens und des Ernährungszustands der Frau sowie Routinemessungen (einschließlich Gewicht, Größe, Auskultation, Blutdruck und Temperatur). Das Gestationsalter wird, sofern verfügbar, durch geburtshilflichen Ultraschall und, falls nicht verfügbar, durch eine von erfahrenen Hebammen durchgeführte Beckenuntersuchung bestimmt

   • Entnahme einer Blutprobe, die wie folgt analysiert wird:

     • Malaria-Diagnosetest mit Mikroskopie und, wenn positiv, Parasitenzählung. Positive Proben werden zur ISS geschickt. Zur Bestätigung der Mikroskopieergebnisse und zur Unterscheidung zwischen Plasmodium-Arten wird eine molekulare Diagnose durchgeführt. Plasmodium falciparum-positive Proben werden auf den Nachweis von Einzelnukleotidpolymorphismen in P. falciparum-Genen analysiert, die mit Artemisinin- und SP-Resistenz assoziiert sind. Frauen, bei denen Malaria diagnostiziert wurde, werden gemäß den klinischen Richtlinien von Uganda behandelt und überwacht, und die Parasitämie wird am dritten Tag erneut beurteilt.
     • HIV-Diagnosetest.
     • Hämoglobinspiegel. Alle Frauen, bei denen bei Studienbeginn HIV+ festgestellt wurde, werden zur weiteren Untersuchung und Behandlung überwiesen.

   ANC-BESUCHE

   • Körperliche Untersuchung
   • Folgebefragung zur Untersuchung von Fieber in der Vorgeschichte, Einstellungen zur Malariaprävention (Einhaltung von IPTp, Verwendung von ITN) und eventuellen Hindernissen bei der Suche nach medizinischer Versorgung aufgrund der COVID-19-Pandemie.
   • Malaria-Diagnosetest mit Mikroskopie und, wenn positiv, Parasitenzählung. Positive Proben werden zur ISS geschickt. Zur Bestätigung der Mikroskopieergebnisse und zur Unterscheidung zwischen Plasmodium-Arten wird eine molekulare Diagnose durchgeführt. Plasmodium falciparum Positive Proben werden auf den Nachweis von Einzelnukleotidpolymorphismen in P. falciparum-Genen analysiert, die mit Artemisinin- und SP-Resistenz assoziiert sind. Frauen, bei denen Malaria diagnostiziert wurde, werden gemäß den klinischen Richtlinien von Uganda behandelt und überwacht, und die Parasitämie wird am dritten Tag erneut beurteilt.

   JEGLICHE Spontane Besuche im Krankenhaus im Zusammenhang mit einer Schwangerschaft und/oder Malaria

   • standardisierte Geschichte
   • körperliche Untersuchung einschließlich Temperatur-, Puls- und Blutdruckmessung.
   • Bei Teilnehmern, die fieberhaft sind (Trommelfelltemperatur > 38,0 °C) oder in der Vergangenheit in den letzten 24 Stunden Fieber hatten, wird für einen dicken Blutausstrich Blut durch einen Fingerstich entnommen. Ist der dicke Blutausstrich positiv, wird beim Patienten Malaria diagnostiziert. Wenn der dicke Blutausstrich negativ ist, wird der Patient von den Studienärzten auf eine nicht-malariabedingte fieberhafte Erkrankung hin behandelt. Wenn der Patient fieberfrei ist und kein kürzlich aufgetretenes Fieber meldet, wird kein dicker Blutausstrich durchgeführt, es sei denn, er befolgt routinemäßige Testpläne.
   • Bei Patienten mit positiver Mikroskopie auf P. falciparum wird die erste vor der Therapie als DBS entnommene Blutprobe zur Bestätigung der molekularen Diagnose und zur genetischen Analyse der Malariaresistenz gegen ISS gesendet. Darüber hinaus wird bei diesen Patienten die Parasitämie gemäß dem WHO-Protokoll am dritten Tag erneut beurteilt.
   • Zu diesem Zeitpunkt wird die Rekrutierung der Teilpopulation nicht schwangerer Personen durchgeführt.

   LIEFERUNG

   • Informationen zur Entbindung: Das Studienpersonal wird die Einzelheiten der Entbindung dokumentieren, einschließlich Datum und Uhrzeit, Art der Entbindung, geschätzten Blutverlust und etwaige mütterliche, geburtshilfliche oder neonatale Komplikationen.
   • Fetales Ergebnis.
   • Informationen für Kleinkinder: Apgar-Score und Geburtsgewicht mit geeichter Waage. Zum Zeitpunkt der Entbindung werden die Frauen wiederholt einem HIV-Schnelltest unterzogen, der auf nationalen Richtlinien basiert. Wenn festgestellt wird, dass sich Frauen während der Schwangerschaft mit HIV infiziert haben, werden sowohl die Mutter als auch ihr Neugeborenes aus der Studie ausgeschlossen und sofort zur Behandlung gemäß den örtlichen Richtlinien zur Prävention der Mutter-Kind-Übertragung überwiesen.

   2.8 DATENERFASSUNG UND -VERWALTUNG 2.8.1 Datenerfassungstools Die Daten werden mit halbstrukturierten Fragestellern gesammelt und mithilfe der elektronischen Datenerfassungstools von REDCap verwaltet, die an der „Katholischen Universität des Heiligen Herzens“, Rom, Italien, REDCap (Research Electronic Data Capture) gehostet werden. ist eine sichere, webbasierte Softwareplattform zur Unterstützung der Datenerfassung für Forschungsstudien. Sie bietet 1) eine intuitive Schnittstelle für die validierte Datenerfassung; 2) Prüfpfade zur Verfolgung von Datenmanipulations- und Exportvorgängen; 3) automatisierte Exportverfahren für nahtlose Datendownloads in gängige Statistikpakete; und 4) Verfahren zur Datenintegration und Interoperabilität mit externen Quellen.

   2.8.2 Verwaltung der Daten zur Malariaresistenz Die Daten werden auf Standardformularen zur Erhebung von Studiendaten erfasst und auf Richtigkeit und Vollständigkeit überprüft. Nach der Behebung von Datenformularfehlern/fehlenden Werten ist das Formular für die Dateneingabe bereit. Die gewonnenen Ergebnisse werden in eine Datenbank eingegeben. Zur Dateneingabe und Verwaltung der Studiendaten wird eine Datenbank entwickelt. Die Datenbank wird mit einem Standard-Datenverwaltungssoftwarepaket wie Microsoft Access erstellt. Für jedes Studienformular wird eine Datei erstellt. Durch die Analyse der sequenzierten Proben werden eine Reihe standardisierter Berichte erstellt: separate Excel-Datenblätter und Karten für zugehörige Arzneimittelresistenz-SNPs und alle anderen SNPs (exonisch und intronisch). Darüber hinaus werden einzelne Sample Variant Call Format (VCF)-Dateien generiert.

   2.8.3 Maßnahmen zur Eindämmung von COVID-19:

   Die Forscher wissen, dass das COVID-19-Risiko über den größten Teil der Studiendauer bestehen bleibt. Alle Studienverfahren, einschließlich Datenerfassungs- und Verwaltungsaktivitäten, werden unter Berücksichtigung dieses Verständnisses durchgeführt und die folgenden Maßnahmen zur Risikominderung von COVID-19 werden befolgt:

   • Das gesamte Studienpersonal wird sich an den vom Gesundheitsministerium (MOH) mitgeteilten COVID-19-Standardarbeitsanweisungen (SOPs) orientieren.
   • Bei den Orientierungstreffen wird die vom MOH empfohlene Teilnehmerzahl im Einklang mit den COVID-19-Präventionsprotokollen eingehalten.
   • Die Prüfärzte nutzen regelmäßig die Zoom-Plattform für Online-Meetings, um sich über den Studienfortschritt an den Studienorten zu informieren
   • Dem Studienpersonal und den Teilnehmern wird persönliche Schutzausrüstung für COVID-19 (Maske, Händedesinfektionsmittel und Handwaschseife) zur Verfügung gestellt, die sie bei der Durchführung der Studienaktivitäten verwenden können
   • COVID-19-Präventionsprotokolle werden in allen Studienaktivitätsbereichen veröffentlicht, angezeigt und befolgt. Die Aufmerksamkeit der Teilnehmer wird im Rahmen der einleitenden Kommunikation auf diese Protokolle gelenkt, um auch weiterhin den Zugang zu wesentlichen Dienstleistungen sicherzustellen.
   • Alle Studienmitarbeiter und Teilnehmer werden ausreichend informiert und ermutigt, die vom MOH empfohlene COVID-19-Impfung durchzuführen

   2.11 ETHISCHE ÜBERLEGUNGEN Ein Studienprotokoll wird der Forschungsethikkommission des Lacor Hospital und dem Uganda National Council of Science and Technology (UNCST) zur Genehmigung vorgelegt. Schwangere Frauen werden um eine schriftliche Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Studie gebeten. Wir werden die Einwilligung auf zwei Ebenen verwalten; Zunächst werden wir die Einwilligung zur Teilnahme an der Studie einholen und anschließend die Einwilligung zur Entnahme und zum Transport von Blutproben nach Italien einholen. Die entnommenen Blutproben werden nur für den Zweck dieser Studie verwendet und nicht über das laufende Studienprojekt hinaus gespeichert. Alle unverarbeiteten Blutproben der Abteilung für Infektionskrankheiten der Universität Bari-Italien werden am Ende des Projekts als biologischer Sanitärabfall vernichtet. Unabhängig von der Teilnahme wird allen schwangeren Frauen der gleiche Betreuungsstandard gewährleistet. Die Würde der Studienteilnehmer wird von den Prüfärzten gewährleistet, ebenso wie die Vertraulichkeit der Daten und das Recht, Daten und/oder biologische Proben jederzeit zu entnehmen. Die Einwilligung schwangerer Frauen sowie reifer und emanzipierter Minderjähriger wird gemäß den Uganda Human Subjects Protection Guidelines eingeholt.

   Bei allen Malaria-positiven Proben, die für die molekulare Analyse in der vorliegenden Studie verarbeitet werden, werden identifizierende Informationen entfernt, um einen angemessenen Schutz der ärztlichen Schweigepflicht und Privatsphäre zu gewährleisten. Auf diese Weise können sensible Daten nicht mit identifizierbaren menschlichen Subjekten verknüpft oder erneut verknüpft werden, wodurch jede verarbeitete Probe anonymisiert wird.

   Die Polymorphismusanalyse der Propellerdomäne des Pfk13-Gens wird durch fortschrittliche Amplifikationstechniken und anschließende Sanger-Sequenzierung in einem hochspezialisierten wissenschaftlichen Labor durchgeführt. Die in dieser Studie gesammelten Blutproben werden an ein Labor der Universität Bari, Italien, geschickt, um Zugang zu den neuesten Pfk13-Genamplifikationstechniken zu erhalten. Um den Kapazitätsaufbau vor Ort zu verbessern, wird ein Labormitarbeiter des Aber-Krankenhauses dabei unterstützt, an einer zweiwöchigen Exposition im Referenzlabor in Italien teilzunehmen. Genehmigung für den Versand von Blutproben nach Italien: Die Genehmigung für den Probentransport wird von UNCST vor dem Versand von Blutproben eingeholt Italien. Ein Antrag auf Übertragung der Blutproben wird schriftlich an den Geschäftsführer des UNCST gestellt. Dies wird von einer Materialtransfervereinbarung (MTA) zwischen dem Pope John Hospital Aber (dem Übertragenden), Doctors with Africa CUAMM (dem Studienpartner) und der Abteilung für Infektionskrankheiten der Universität Bari (dem Empfänger) begleitet. Die genaue Spezifikation der Transferbedingungen und das genehmigte Studienprotokoll werden ebenfalls mit der Anfrage zur Übertragung der Blutproben an UNCST übermittelt.