GCF Anexina-A1, anhidrasa carbónica-1 y niveles gamma del factor de elongación-1 en periodontitis

El diagnóstico de las enfermedades y afecciones periodontales se organizó de acuerdo con los criterios de diagnóstico clínico y radiográfico propuestos por el Taller mundial sobre clasificación de enfermedades y afecciones periodontales y periimplantarias de 2017; En este estudio se incluyeron 20 pacientes con periodontitis generalizada en estadio III grado B, 20 pacientes con periodontitis generalizada en estadio III grado C, 19 pacientes con gingivitis y voluntarios periodontalmente sanos.

El examen periodontal clínico de los sujetos sanos y con periodontitis consistió en el índice de placa (PI), la profundidad de la bolsa al sondaje (PPD), el nivel de inserción clínica (CAL) y el sangrado al sondaje (BOP) registrados. CAL se calculó sumando GR a los valores de PPD. Se calcularon los promedios de boca completa PPD, CAL y el porcentaje de sitios con BOP para cada sujeto. Un solo examinador calibrado (VO) realizó un examen periodontal de boca completa de todos los participantes. Las mediciones se realizaron con una sonda periodontal Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, EE. UU.). Todas las mediciones se realizaron en toda la boca y en 4 sitios (mesio-bucal, medio-bucal, distobucal y medio-lingual) para cada diente. Antes de las mediciones clínicas, la calibración intraexaminador se realizó midiendo los valores de PPD y CAL dos veces en cinco pacientes con un intervalo de un día, lo que resultó en coeficientes de correlación intraclase de 0,92 para PD y 0,90 para CAL.

Se tomaron muestras de GCF de las caras bucales de dos sitios interproximales no adyacentes en dientes de una sola raíz. En los grupos de periodontitis, se tomaron muestras de GCF de dos bolsas más profundas de dientes de una sola raíz. Se recogieron muestras de los sitios con signos visibles de inflamación en el grupo de gingivitis y sin BOP en el grupo sano. Las áreas seleccionadas se limpiaron cuidadosamente de placa supragingival utilizando curetas estériles, se aislaron con rollos de algodón y se secaron ligeramente al aire para evitar la contaminación.

Se usaron tiras de papel de filtro estandarizadas (PerioPaper, Proflow, Amityville, NY) para el muestreo de GCF. Se insertaron suavemente tiras de papel estériles en el surco o bolsa gingival hasta que se sintió una leve resistencia y se dejaron allí durante 30 segundos. Se evitó la irritación mecánica y se descartaron las tiras visualmente contaminadas con sangre. Un dispositivo electrónico precalibrado midió el volumen de líquido absorbido (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY). Las lecturas se convirtieron a un volumen real (microlitro, μL) por referencia a la curva estándar. Las tiras de papel se colocaron individualmente en un tubo de polipropileno estéril y se almacenaron a -80 ◦C para su posterior análisis.

Los niveles de anexina-A1 se estudiaron con kits comercialmente disponibles usando el método ELISA (Bioscience SRB, catálogo no: 201-12-3158). La densidad óptica se midió espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm (Tecan). Los rangos de ensayo para el kit de Anexina-A1 fueron de 0,20-20 ng/mL, la sensibilidad de 0,2 ng/mL y los coeficientes de variación (CV%) intraensayo e interensayo fueron <10%. Los resultados se presentaron como ng.

Los niveles de anhidrasa carbónica 1 se estudiaron con kits comercialmente disponibles usando el método ELISA (Bioscience SRB, catálogo no: SRB-T-88927). La densidad óptica se midió espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm (Tecan). Los rangos de ensayo para el kit CA I fueron de 3,12 a 200 ng/mL, la sensibilidad <1,875 ng/mL y los coeficientes de variación (CV%) intra e interensayo fueron <10 %. Los resultados se presentaron como ng.

Los niveles de EEF1G se estudiaron con kits comercialmente disponibles usando el método ELISA (Bioscience SRB, catálogo no: 201-12-3732). La densidad óptica se midió espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm (Tecan). Los rangos de ensayo para el kit EF1-Ɣ fueron 31.25-2000 pg/mL, sensibilidad <12,4 pg/mL, y los coeficientes de variación (CV%) intra e interensayo fueron <10%. Los resultados se presentaron como ng.

El análisis estadístico se realizó mediante técnicas no paramétricas. Las comparaciones entre los grupos de estudio se realizaron mediante la prueba de Kruskal-Wallis. Cuando hubo diferencias significativas (p < 0,05), las comparaciones post-hoc de 2 grupos se evaluaron con pruebas U de Mann-Whitney corregidas por Bonferroni, y los valores de p < 0,05 se consideraron significativos. Todo el análisis de datos se realizó utilizando un paquete estadístico (Abacus Concepts Inc., Berkeley, CA, EE. UU.). Se evaluaron la precisión diagnóstica, la sensibilidad, la especificidad, el valor predictivo positivo (PPV), el valor predictivo negativo (NPV), la curva característica operativa del receptor (ROC) y el área bajo la curva ROC (AUC) del conjunto de datos de prueba. Los valores de p < 0,05 se consideraron estadísticamente significativos y se calcularon los intervalos de confianza (IC) del 95%.