Perspectivas sobre la Diseminación del Cáncer de Pulmón (LUCID)

En pacientes con NSCLC resecable tratados solo con cirugía o con cirugía como parte de un tratamiento multimodal, se evaluarán los niveles de CTC, ctADN, STAS y micrometástasis ganglionares para ver si se asocian con patrones de recurrencia y resultados a largo plazo.

Para lograr este objetivo, se analizarán la presencia y el recuento de CTC y ctADN a partir de muestras de sangre venosa periférica recogidas en tres momentos (antes y después de la cirugía y durante el seguimiento). Además, se evaluarán los siguientes aspectos como objetivos secundarios:

1. Evaluar la consistencia de la transcriptómica espacial entre las células tumorales localizadas en el tumor pulmonar primario y las presentes en STAS y/o metástasis ganglionares, así como las diferencias en el perfil molecular entre las células tumorales pulmonares primarias y las células tumorales circulantes.
2. Cuantificar el impacto de las variables intraoperatorias en la liberación de CTC y ctADN al torrente sanguíneo.

Las principales variables intraoperatorias son:

• La secuencia de resección de las estructuras hiliares (por ejemplo, vena primero frente a arteria primero).
• Técnicas de manipulación pulmonar (cirugía abierta, VATS, RATS).
• La extensión de la resección (segmentectomía, lobectomía, neumonectomía). Los CTC se analizarán utilizando la plataforma estándar de oro actual (sistema CellSearch, Menarini Silicon Biosystems, Italia), mientras que el ctADN se evaluará mediante tecnología de secuenciación de próxima generación (NGS) (plataforma ILLUMINA).

Para la evaluación de la transcriptómica espacial, se analizarán láminas teñidas con eosina y hematoxilina del tumor primario y de STAS y/o metástasis ganglionares utilizando la plataforma Xenium (10x Genomics, EE. UU.) para cuantificar espacialmente especies de ARNm con el panel de perfil de inmuno-oncología humana Xenium.

Para los puntos finales del proyecto, las variables continuas se describirán como mediana (RIC) y se compararán mediante pruebas t o pruebas de Mann-Whitney; las variables categóricas se describirán como n (%) y se compararán mediante pruebas χ²/Fisher. La SG y la SL se estimarán mediante Kaplan-Meier, se compararán mediante pruebas de log-rank y se analizarán mediante modelos de Cox multivariantes (verificación del supuesto de proporcionalidad; resultados como HR e IC del 95%). Para la incidencia de recurrencia considerando la muerte como un evento competitivo (IFL), utilizaremos funciones de incidencia acumulada y pruebas de Gray; para el análisis multivariante, el modelo de Fine-Gray (cociente de subriesgo, IC del 95%). Las asociaciones entre biomarcadores (CTC/ctADN como continuos y/o dicotomizados, por ejemplo, CTC ≥1 célula; VAF%/ng•mL) y resultados dependientes del tiempo se evaluarán con Cox/Fine-Gray; la probabilidad de STAS y micrometástasis ganglionares con regresión logística. Las dinámicas de CTC/ctADN pre-/post-/seguimiento se analizarán mediante pruebas pareadas (Wilcoxon) y modelos lineales/mixtos con medidas repetidas o ANCOVA ajustando por valores basales. El efecto de las variables intraoperatorias en ΔCTC/ΔctADN se estimará mediante modelos lineales/mixtos; en el riesgo de recurrencia/muerte con Cox/Fine-Gray, ajustando por edad, sexo, estadio, histotipo, grado (G3), invasión pleural visceral, PD-L1, abordaje (Abierto/VATS/RATS), extensión de la resección y terapias adyuvantes (con posible estratificación por estadio). Los datos faltantes se tratarán con imputación múltiple (supuesto MAR) y se realizarán análisis de sensibilidad (por ejemplo, umbrales alternativos de biomarcadores). Umbral de significación α = 0,05 bilateral; se reportarán valores p e IC del 95%; cuando sea apropiado, corrección para comparaciones múltiples (Benjamini-Hochberg). Análisis con R/Stata/SPSS.