Ensayo de óxido nítrico sintasa inducible por plasma (iNOS) y estudio de sepsis (PliNOSa® Test)

En la actualidad no existe una prueba clínica precisa y definitiva para predecir precozmente la aparición de la patología sepsis. Al menos 7 millones de personas al año entran en las primeras etapas de la patología de la sepsis, lo que provocará más de 250.000 muertes al año en EE. UU. y más de 750.000 en todo el mundo. Una prueba temprana, precisa y confiable que pueda evaluar el riesgo de que un paciente de la unidad de cuidados intensivos (UCI) se vuelva séptico sería un gran avance médico. Existe una gran necesidad insatisfecha de laboratorio clínico de una prueba que pueda ayudar a los médicos a evaluar el riesgo de su paciente para el inicio de la patología de sepsis. Los procedimientos de cultivo actuales adolecen de una serie de problemas. (1) Son lentos. La primera respuesta se obtiene solo después de 24 horas de cultivo, y una respuesta absoluta requiere un mínimo de 48 horas de cultivo. (2) El cultivo de sangre solo arroja resultados positivos (es decir, sepsis está presente) en aproximadamente el 28% de los pacientes que se vuelven sépticos, por lo que más del 70% de los pacientes no arrojan hemocultivos positivos. Todos en el campo de la sepsis están de acuerdo en que se necesitan desesperadamente mejores pruebas IVD para la patología de la sepsis. Nuestra prueba PliNOSa IVD basada en la presencia de iNOS en plasma debería identificar a aquellos pacientes que están en riesgo de desarrollar sepsis ya que nuestro ensayo no depende del cultivo de bacterias vivas u otros microorganismos.

La sepsis se desarrolla a partir de una variedad de fuentes bacterianas y fúngicas derivadas de la incapacidad del paciente para combatir infecciones, y comúnmente se adquiere mientras se recupera de lesiones graves y cirugías en hospitales. Actualmente no existe una prueba de diagnóstico clínico temprana, precisa y confiable para el inicio de la sepsis, pero existe una enorme necesidad de laboratorio clínico. En enero de 2008, Levenson revisó el estado actual del diagnóstico clínico de la sepsis y concluyó [1] que ninguna de las pruebas de evaluación de riesgos actualmente aprobadas por la FDA funciona bien y [2] que los nuevos biomarcadores específicos para la patología de la sepsis serían un importante problema médico. descubrimiento. En 2000, el Instituto de Medicina de la Academia Nacional de Ciencias estimó que el costo para el sistema de salud de los EE. UU. era de $17 a $29 mil millones anuales. Se ha encontrado que la presencia en el plasma de una proteína normalmente intracelular, la óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), es un biomarcador temprano y preciso para el inicio de la patología de la sepsis. Los datos recopilados mediante nuestra prueba de diagnóstico in vitro (IVD) para analizar más de 1200 muestras de sangre recolectadas durante nuestros estudios clínicos en 350 sujetos de estudio (295 pacientes de UCI y 55 voluntarios sanos) demostraron que iNOS está presente solo en muestras de plasma obtenidas de personas que sufren de el inicio de la sepsis. En nuestros tres estudios clínicos, los dos últimos parcialmente financiados por los NIH, se encontró que nuestra prueba IVD candidata para iNOS en plasma predice el inicio de la sepsis 24 a 72 horas antes de la aparición de los síntomas fisiológicos de la patología.

La superioridad de iNOS en plasma en comparación con otros marcadores bioquímicos potenciales de SIRS (pre-sepsis) y sepsis se evaluó utilizando los datos de nuestro tercer estudio clínico. En cuatro cohortes de este estudio se analizaron los niveles plasmáticos de cuatro biomarcadores potenciales de la patología de la sepsis: iNOS, procalcitonina (PCT), interleucina-6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral alfa (TNFα). Las cuatro cohortes son (1) 36 individuos sanos normales como Grupo A; (2) pacientes gravemente heridos que permanecieron SIRS y sépticos negativos durante todo el período de estudio como Grupo B; (3) pacientes críticamente enfermos que se volvieron sépticos durante el período de estudio, cuyos niveles plasmáticos 24 horas antes de los síntomas de sepsis fueron reconocidos por los médicos tratantes como Grupo C; y (4) pacientes sépticos confirmados que se inscribieron en nuestro estudio y no habían recibido antibióticos antes de su inclusión en el Grupo D. Solo se encontró iNOS en plasma para diferenciar entre pacientes en estado crítico no sépticos (Grupo B) y los pacientes en estado crítico que estaban desarrollando sepsis (Grupo C) o ya eran sépticos (Grupo D). El nivel plasmático de procalcitonina, una de las pruebas IVD aprobadas por la FDA, no fue específico para la sepsis, ya que varios voluntarios sanos normales y muchos de los pacientes sin SRIS y no sépticos tenían niveles plasmáticos elevados de procalcitonina (PCT).

En resumen, las infecciones en las unidades de cuidados intensivos y otros entornos hospitalarios pueden ser causadas por diferentes tipos de organismos, como bacterias y hongos. Estas infecciones provocan anualmente más de 7.000.000 de casos de SIRS (pre-sepsis) que pueden evolucionar a sepsis, sepsis grave con disfunción orgánica y shock séptico con falla multiorgánica. Hasta la fecha, se han realizado tres estudios clínicos en este proyecto en los que se han inscrito y estudiado 295 pacientes de la UCI y 55 voluntarios sanos. Los datos obtenidos durante estos estudios clínicos previos demuestran claramente que se produce un aumento medible en el nivel plasmático de iNOS durante el inicio de la patología de la sepsis. El enfoque principal de esta propuesta de investigación es recopilar los datos necesarios para obtener la aprobación de la FDA para comercializar nuestra nueva prueba PliNOSa® al demostrar en un número estadísticamente significativo de pacientes en UCI con enfermedades críticas que la presencia de iNOS en plasma es un biomarcador temprano confiable como un ayuda para la evaluación del riesgo de aparición de sepsis.