Plasma-indusoituvan typpioksidisyntaasin (iNOS) määritys ja sepsistutkimus (PliNOSa® Test)

Tällä hetkellä ei ole olemassa tarkkaa ja lopullista kliinistä testiä sepsispatologian varhaisen alkamisen ennustamiseksi. Ainakin 7 miljoonaa ihmistä vuosittain astuu sepsispatologian alkuvaiheeseen, mikä johtaa yli 250 000 kuolemaan vuodessa Yhdysvalloissa ja yli 750 000 kuolemaan maailmanlaajuisesti. Varhainen, tarkka ja luotettava testi, joka voi arvioida tehohoitoyksikössä (ICU) potilaan riskiä tulla septiseksi, olisi merkittävä lääketieteellinen läpimurto. Kliinisissä laboratorioissa on suuri tarpeeton testi, joka voi auttaa lääkäreitä arvioimaan potilaan riskiä sepsispatologian puhkeamisesta. Nykyiset kulttuuriprosessit kärsivät useista ongelmista. (1) Ne ovat hitaita. Ensimmäinen vastaus saadaan vasta 24 tunnin viljelyn jälkeen, ja absoluuttinen vastaus vaatii vähintään 48 tunnin viljelyn. (2) Veriviljely antaa vain positiivisia tuloksia (ts. sepsis) noin 28 %:lla potilaista, joista tulee septinen, joten yli 70 % potilaista ei tuota positiivisia veriviljelmiä. Kaikki sepsiksen alalla työskentelevät ovat yhtä mieltä siitä, että parempia IVD-testejä sepsiksen patologian selvittämiseksi tarvitaan kipeästi. Plasman iNOS:n esiintymiseen perustuva PliNOSa IVD -testimme pitäisi tunnistaa ne potilaat, joilla on riski saada sepsis, koska analyysimme ei ole riippuvainen elävien bakteerien tai muiden mikro-organismien viljelystä.

Sepsis kehittyy useista bakteeri- ja sienilähteistä, jotka johtuvat potilaan kyvyttömyydestä taistella infektioita vastaan. Sepsis saadaan yleensä toipuessaan vakavista vammoista ja sairaalaleikkauksista. Varhaista, tarkkaa ja luotettavaa kliinistä diagnostista testiä sepsiksen alkamiselle ei tällä hetkellä ole olemassa, mutta kliinisen laboratorion tarve on valtava. Tammikuussa 2008 Levenson tarkasteli sepsiksen kliinisen diagnoosin nykytilannetta ja totesi [1], että yksikään tällä hetkellä FDA:n hyväksymistä riskinarviointitesteistä ei toimi hyvin ja [2] että uudet sepsispatologialle spesifiset biomarkkerit olisivat merkittävä lääketieteellinen. läpimurto. Vuonna 2000 National Academy of Sciencen lääketieteen instituutti arvioi Yhdysvaltain terveydenhuoltojärjestelmän kustannusten olevan 17-29 miljardia dollaria vuodessa. Normaalisti solunsisäisen proteiinin, indusoituvan typpioksidisyntaasin (iNOS) läsnäolon plasmassa on havaittu olevan varhainen ja tarkka biomarkkeri sepsispatologian alkamiselle. In vitro -diagnostiikkatestillämme (IVD) kerätyt tiedot yli 1 200 verinäytteen analysoimiseksi, jotka oli kerätty kliinisissä tutkimuksissamme 350 tutkimushenkilöstä (295 tehohoitopotilasta ja 55 tervettä vapaaehtoista), osoittivat, että iNOS on läsnä vain plasmanäytteissä, jotka on otettu ihmisiltä, ​​jotka kärsivät sepsiksen puhkeaminen. Kolmessa kliinisessä tutkimuksessamme, joista kaksi jälkimmäistä rahoitettiin osittain NIH:lla, plasman iNOS-tutkimuksen ehdokas IVD-testimme havaittiin ennustavan sepsiksen alkamista 24–72 tuntia ennen patologian fysiologisten oireiden ilmaantumista.

Plasman iNOS:n paremmuus verrattuna muihin mahdollisiin SIRS:n (esisepsiksen) ja sepsiksen biokemiallisiin markkereihin arvioitiin käyttämällä kolmannen kliinisen tutkimuksemme tietoja. Tämän tutkimuksen neljästä kohortista analysoitiin plasmatasot neljälle mahdolliselle sepsispatologian biomarkkerille: iNOS, prokalsitoniini (PCT), interleukiini-6 (IL-6) ja tuumorinekroositekijä-alfa (TNFa). Neljä kohorttia ovat (1) 36 normaalia tervettä yksilöä ryhmänä A; (2) kriittisesti loukkaantuneet potilaat, jotka pysyivät SIRS- ja septisesti negatiivisina koko tutkimusjakson ajan ryhmänä B; (3) kriittisesti sairaat potilaat, jotka tulivat septiseksi tutkimusjakson aikana ja joiden plasmatasot 24 tuntia ennen sepsiksen oireet tunnistivat hoitavat lääkärit ryhmäksi C; ja (4) vahvistetut septiset potilaat, jotka otettiin mukaan tutkimukseemme ja jotka eivät olleet saaneet antibiootteja ennen heidän ilmoittautumistaan ​​ryhmään D. Vain plasman iNOS:n havaittiin erottavan ei-septiset kriittisesti sairaat potilaat (ryhmä B) ja kriittisesti sairaat potilaat, jotka heillä oli sepsis (ryhmä C) tai he olivat jo septisiä (ryhmä D). Prokalsitoniinin plasmataso, yksi FDA:n hyväksymistä IVD-testeistä, ei ollut spesifinen sepsikselle, koska useilla normaaleilla terveillä vapaaehtoisilla ja monilla ei-SIRS-potilailla ja ei-septisillä potilailla oli kohonneet plasman prokalsitoniinitasot (PCT).

Yhteenvetona voidaan todeta, että infektiot tehohoidossa ja muissa sairaalaympäristöissä voivat olla erityyppisten organismien, kuten bakteerien ja sienten, aiheuttamia. Nämä infektiot aiheuttavat vuosittain yli 7 000 000 SIRS-tapausta (pre-sepsis), jotka voivat pahentua sepsikseksi, vakavaan sepsikseen, johon liittyy elinten toimintahäiriö, ja septisen shokin, johon liittyy useiden elinten vajaatoiminta. Tähän mennessä projektista on tehty kolme kliinistä tutkimusta, joihin on otettu mukaan ja tutkittu 295 tehohoitopotilasta ja 55 tervettä vapaaehtoista. Näistä aikaisemmista kliinisistä tutkimuksista saadut tiedot osoittavat selvästi, että iNOS:n plasmataso nousee mitattavissa olevasti sepsispatologian alkaessa. Tämän tutkimusehdotuksen pääpaino on kerätä tiedot, joita tarvitaan FDA:n hyväksynnän saamiseksi uuden PliNOSa®-testimme markkinoimiseksi osoittamalla tilastollisesti merkittävälle määrälle kriittisesti sairaita tehohoitopotilaita, että iNOS:n esiintyminen plasmassa on luotettava varhainen biomarkkeri. riskinarviointiapu sepsiksen alkaessa.