Plasma-inducerbar nitrogenoxidsyntase (iNOS) analyse og sepsis-undersøgelse (PliNOSa® Test)

På nuværende tidspunkt eksisterer der ikke en nøjagtig og definitiv klinisk test til at forudsige tidligt indtræden af ​​sepsispatologien. Mindst 7 millioner mennesker om året går ind i de tidlige stadier af sepsispatologien, hvilket vil føre til mere end 250.000 dødsfald om året i USA og mere end 750.000 på verdensplan. En tidlig, nøjagtig og pålidelig test, der kan vurdere en intensivafdelings (ICU)-patients risiko for at blive septisk, ville være et stort medicinsk gennembrud. Der er et stort udækket klinisk laboratoriebehov for en test, der kan hjælpe læger med at vurdere deres patients risiko for opståen af ​​sepsispatologien. De nuværende kulturprocedurer lider af en række problemer. (1) De er langsomme. Det første svar opnås først efter 24 timers dyrkning, og et absolut svar kræver minimum 48 timers dyrkning. (2) Bloddyrkning giver kun positive resultater (dvs. sepsis er til stede) hos ca. 28 % af patienterne, der bliver septiske, og over 70 % af patienterne giver således ikke positive blodkulturer. Alle i sepsisområdet er enige om, at der er et desperat behov for bedre IVD-tests for sepsispatologien. Vores PliNOSa IVD-test baseret på tilstedeværelsen af ​​iNOS i plasma skulle identificere disse patienter som værende i risiko for at udvikle sepsis, da vores assay ikke er afhængig af dyrkning af levende bakterier eller andre mikroorganismer.

Sepsis udvikler sig fra en række forskellige bakterie- og svampekilder, der stammer fra patientens manglende evne til at bekæmpe infektion, og er almindeligt erhvervet, mens den kommer sig efter alvorlige skader og operation på hospitaler. En tidlig, nøjagtig og pålidelig klinisk diagnostisk test for begyndelsen af ​​sepsis eksisterer i øjeblikket ikke, men der eksisterer et enormt klinisk laboratoriebehov. I januar 2008 gennemgik Levenson den aktuelle status for den kliniske diagnose af sepsis og konkluderede [1], at ingen af ​​de nuværende FDA-godkendte risikovurderingstests fungerer godt, og [2] at nye biomarkører, der er specifikke for sepsispatologien, ville være en stor medicinsk behandling. bryde igennem. I 2000 anslog Institute of Medicine ved National Academy of Science omkostningerne for det amerikanske sundhedssystem til at være 17-29 milliarder dollars årligt. Tilstedeværelsen i plasma af et normalt intracellulært protein, inducerbar nitrogenoxidsyntase (iNOS), har vist sig at være en tidlig og nøjagtig biomarkør for begyndelsen af ​​sepsis-patologien. Data indsamlet ved hjælp af vores in vitro diagnostiske (IVD) test til at analysere mere end 1.200 blodprøver indsamlet under vores kliniske undersøgelser på 350 forsøgspersoner (295 ICU-patienter og 55 raske frivillige) viste, at iNOS kun er til stede i plasmaprøver fra mennesker, der lider af begyndelsen af ​​sepsis. I vores tre kliniske undersøgelser, hvoraf de to sidstnævnte blev delvist finansieret af NIH, viste vores kandidat IVD-test for plasma iNOS sig at forudsige begyndelsen af ​​sepsis 24 - 72 timer før fremkomsten af ​​de fysiologiske symptomer på patologien.

Overlegenheden af ​​plasma iNOS sammenlignet med andre potentielle biokemiske markører for SIRS (præ-sepsis) og sepsis blev vurderet ved hjælp af data fra vores tredje kliniske undersøgelse. Fire kohorter fra denne undersøgelse blev analyseret for plasmaniveauer for fire potentielle biomarkører for sepsispatologien: iNOS, procalcitonin (PCT), interleukin-6 (IL-6) og tumornekrosefaktor-alfa (TNFα). De fire kohorter er (1) 36 normale raske individer som gruppe A; (2) kritisk skadede patienter, som forblev SIRS og septisk negative gennem hele undersøgelsesperioden som gruppe B; (3) kritisk syge patienter, som blev septiske i løbet af undersøgelsesperioden, med deres plasmaniveauer 24 timer før symptomerne på sepsis blev genkendt af de behandlende læger som gruppe C; og (4) bekræftede septiske patienter, som var indskrevet i vores undersøgelse og ikke havde modtaget antibiotika før deres optagelse som gruppe D. Kun plasma iNOS blev fundet at skelne mellem ikke-septiske kritisk syge patienter (Gruppe B) og de kritisk syge patienter, som udviklede sepsis (Gruppe C) eller var allerede septiske (Gruppe D). Plasmaniveauet af procalcitonin, en af ​​FDA-godkendte IVD-tests, var ikke specifik for sepsis, da et antal normale raske frivillige og mange af de ikke-SIRS- og ikke-septiske patienter havde forhøjede plasmaniveauer af procalcitonin (PCT).

For at opsummere kan infektioner på intensivafdelinger og andre hospitalsmiljøer være forårsaget af forskellige typer organismer, såsom bakterier og svampe. Disse infektioner forårsager årligt mere end 7.000.000 tilfælde af SIRS (præ-sepsis), der kan forværres til sepsis, svær sepsis med organdysfunktion og septisk shock med multipel organsvigt. Til dato er der udført tre kliniske undersøgelser på dette projekt, hvor 295 intensivafdelingspatienter og 55 raske frivillige er blevet indskrevet og undersøgt. Data opnået under disse tidligere kliniske undersøgelser viser klart, at en målbar stigning i plasmaniveauet af iNOS forekommer under begyndelsen af ​​sepsis-patologien. Hovedfokus for dette forskningsforslag er at indsamle de nødvendige data for at opnå FDA-godkendelse til at markedsføre vores nye PliNOSa®-test ved at påvise i et statistisk signifikant antal kritisk syge intensivpatienter, at tilstedeværelsen af ​​iNOS i plasma er en pålidelig tidlig biomarkør som en risikovurderingshjælp for opståen af ​​sepsis.