Ensaio de Óxido Nítrico Sintase Induzível por Plasma (iNOS) e Estudo de Sepse (PliNOSa® Test)

Atualmente, não existe um teste clínico preciso e definitivo para prever precocemente o início da patologia da sepse. Pelo menos 7 milhões de pessoas por ano entram nos estágios iniciais da patologia da sepse, o que levará a mais de 250.000 mortes por ano nos EUA e mais de 750.000 em todo o mundo. Um teste precoce, preciso e confiável que possa avaliar o risco de um paciente de unidade de terapia intensiva (UTI) se tornar séptico seria um grande avanço médico. Existe uma grande necessidade laboratorial clínica não atendida de um teste que possa ajudar os médicos a avaliar o risco de seus pacientes para o início da patologia da sepse. Os procedimentos de cultura atuais sofrem de uma série de problemas. (1) Eles são lentos. A primeira resposta é obtida somente após 24 horas de cultivo, sendo que uma resposta absoluta requer no mínimo 48 horas de cultivo. (2) A hemocultura produz apenas resultados positivos (i.e. sepse está presente) em aproximadamente 28% dos pacientes que se tornam sépticos, portanto, mais de 70% dos pacientes não produzem hemoculturas positivas. Todos no campo da sepse concordam que melhores testes de IVD para a patologia da sepse são desesperadamente necessários. Nosso teste PliNOSa IVD baseado na presença de iNOS no plasma deve identificar esses pacientes como estando em risco de desenvolver sepse, uma vez que nosso ensaio não depende da cultura de bactérias vivas ou outros microrganismos.

A sepse se desenvolve a partir de uma variedade de fontes bacterianas e fúngicas decorrentes da incapacidade do paciente de combater a infecção e é comumente adquirida durante a recuperação de ferimentos graves e cirurgias em hospitais. Atualmente, não existe um teste de diagnóstico clínico precoce, preciso e confiável para o início da sepse, mas existe uma enorme necessidade de laboratório clínico. Em janeiro de 2008, Levenson revisou o status atual do diagnóstico clínico de sepse e concluiu [1] que nenhum dos testes de avaliação de risco atualmente liberados pela FDA funcionam bem e [2] que novos biomarcadores específicos para a patologia da sepse seriam uma importante avanço. Em 2000, o Instituto de Medicina da Academia Nacional de Ciências estimou o custo para o sistema de saúde dos EUA em US$ 17 a 29 bilhões anualmente. A presença no plasma de uma proteína normalmente intracelular, sintase de óxido nítrico induzível (iNOS), foi considerada um biomarcador precoce e preciso para o início da patologia da sepse. Os dados coletados usando nosso teste de diagnóstico in vitro (IVD) para analisar mais de 1.200 amostras de sangue coletadas durante nossos estudos clínicos em 350 sujeitos do estudo (295 pacientes de UTI e 55 voluntários saudáveis) demonstraram que o iNOS está presente apenas em amostras de plasma obtidas de pessoas que sofrem de o início da sepse. Em nossos três estudos clínicos, os dois últimos parcialmente financiados pelo NIH, nosso candidato a teste IVD para plasma iNOS foi capaz de prever o início da sepse 24 a 72 horas antes do aparecimento dos sintomas fisiológicos da patologia.

A superioridade da iNOS plasmática em comparação com outros potenciais marcadores bioquímicos de SIRS (pré-sepse) e sepse foi avaliada usando os dados de nosso terceiro estudo clínico. Quatro coortes deste estudo foram analisadas quanto aos níveis plasmáticos de quatro potenciais biomarcadores da patologia da sepse: iNOS, procalcitonina (PCT), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral-alfa (TNFα). As quatro coortes são (1) 36 indivíduos saudáveis ​​normais como Grupo A; (2) pacientes gravemente feridos que permaneceram SIRS e negativos sépticos durante todo o período do estudo como Grupo B; (3) pacientes gravemente enfermos que se tornaram sépticos durante o período do estudo, com seus níveis plasmáticos 24 horas antes dos sintomas de sepse, foram reconhecidos pelos médicos assistentes como Grupo C; e (4) pacientes sépticos confirmados que foram incluídos em nosso estudo e não receberam antibióticos antes de serem incluídos no Grupo D. Apenas a iNOS plasmática foi capaz de diferenciar entre pacientes críticos não sépticos (Grupo B) e os pacientes críticos que estavam desenvolvendo sepse (Grupo C) ou já eram sépticos (Grupo D). O nível plasmático de procalcitonina, um dos testes IVD liberados pela FDA, não era específico para sepse, uma vez que um número de voluntários saudáveis ​​normais e muitos dos pacientes não-SIRS e não sépticos apresentavam níveis plasmáticos elevados de procalcitonina (PCT).

Para resumir, as infecções em unidades de terapia intensiva e outros ambientes hospitalares podem ser causadas por diferentes tipos de organismos, como bactérias e fungos. Essas infecções causam anualmente mais de 7.000.000 de casos de SIRS (pré-sepse) que podem evoluir para sepse, sepse grave com disfunção orgânica e choque séptico com falência de múltiplos órgãos. Até o momento, três estudos clínicos foram conduzidos neste projeto em que 295 pacientes de UTI e 55 voluntários saudáveis ​​foram incluídos e estudados. Os dados obtidos durante esses estudos clínicos anteriores demonstram claramente que ocorre um aumento mensurável no nível plasmático de iNOS durante o início da patologia da sepse. O foco principal desta proposta de pesquisa é reunir os dados necessários para obter a liberação do FDA para comercializar nosso novo teste PliNOSa®, demonstrando em um número estatisticamente significativo de pacientes críticos em UTI que a presença de iNOS no plasma é um biomarcador inicial confiável como um ajuda na avaliação de risco para o aparecimento de sepse.