Esclarecimiento de las bases moleculares y bioquímicas de la enfermedad humana por mutación AhR

En un estudio previo, hemos identificado una familia consanguínea del norte de Israel con tres hijos afectados de nistagmo infantil idiopático (NII) e hipoplasia foveal, que siguen un modo de herencia autosómico recesivo del gen AhR. en este estudio vamos a:

1. Determinar si el fenotipo de la enfermedad es consecuencia de una disminución o ausencia de la actividad AHH inducida por AHR. Para ello, se comparará la actividad de la enzima AHH basal y mediada por ligandos en miembros de familias heterocigóticas y homocigóticas frente a voluntarios sanos.
2. Examinar los niveles de proteína en estado estacionario de la proteína AHR en células de pacientes homocigóticos y heterocigóticos frente a los de voluntarios sanos. Si no se detecta proteína mutante, determinaremos el efecto de la mutación en la estabilidad del ARNm.
3. Analizar los niveles en estado estacionario de proteínas asociadas relacionadas (como ANRT) y los niveles de proteínas de objetivos transcripcionales (AHH) en miembros de la familia heterocigóticos y homocigóticos frente a voluntarios sanos.
4. Investigar la capacidad del alelo mutante para inducir la activación transcripcional en un sistema de prueba de levadura diseñado. Usaremos una cepa de levadura diseñada para contener AHR humano y translocador nuclear AHR junto con un gen informador para investigar si la mutación interfiere con la activación de la transcripción.