Élucider les bases moléculaires et biochimiques de la maladie humaine à mutation AhR

Dans une étude précédente, nous avons identifié une famille consanguine du nord d'Israël avec trois enfants atteints de nystagmus infantile idiopathique (IIN) et d'hypoplasie fovéale, qui suivent un mode de transmission autosomique récessif du gène AhR. dans cette étude nous allons :

1. Déterminer si le phénotype de la maladie est la conséquence d'une diminution ou de l'absence d'activité AHH induite par l'AHR. À cette fin, l'activité enzymatique AHH basale et médiée par un ligand sera comparée chez des membres de la famille hétérozygotes et homozygotes par rapport à des volontaires sains.
2. Examiner les niveaux de protéines à l'état d'équilibre de la protéine AHR dans les cellules de patients homozygotes et hétérozygotes par rapport à ceux de volontaires sains. Si aucune protéine mutante n'est détectée, nous déterminerons l'effet de la mutation sur la stabilité de l'ARNm.
3. Analyser les niveaux à l'état d'équilibre des protéines partenaires apparentées (telles que l'ANRT) et les niveaux de protéines des cibles transcriptionnelles (AHH) chez les membres de la famille hétérozygotes et homozygotes par rapport aux volontaires sains.
4. Étudier la capacité de l'allèle mutant à induire une activation transcriptionnelle dans un système de test de levure modifié. Nous utiliserons une souche de levure conçue pour contenir l'AHR humain et le translocateur nucléaire AHR avec un gène rapporteur pour déterminer si la mutation interfère avec l'activation de la transcription.