Aufklärung der molekularen und biochemischen Grundlagen der menschlichen AhR-Mutationskrankheit

In einer früheren Studie haben wir eine blutsverwandte Familie aus dem Norden Israels mit drei Kindern identifiziert, die an idiopathischem infantilem Nystagmus (IIN) und fovealer Hypoplasie leiden, die einem autosomal-rezessiven Vererbungsmodus des AhR-Gens folgen. In dieser Studie werden wir:

1. Um festzustellen, ob der Krankheitsphänotyp die Folge einer Abnahme oder Abwesenheit der AHR-induzierten AHH-Aktivität ist. Zu diesem Zweck wird die basale und ligandenvermittelte AHH-Enzymaktivität bei heterozygoten und homozygoten Familienmitgliedern mit gesunden Freiwilligen verglichen.
2. Es sollten die Steady-State-Proteinspiegel des AHR-Proteins in Zellen homo- und heterozygoter Patienten im Vergleich zu denen gesunder Freiwilliger untersucht werden. Wenn kein mutiertes Protein nachgewiesen wird, bestimmen wir die Auswirkung der Mutation auf die mRNA-Stabilität.
3. Analyse der Steady-State-Spiegel verwandter Partnerproteine ​​(wie ANRT) und der Proteinspiegel transkriptioneller Ziele (AHH) bei heterozygoten und homozygoten Familienmitgliedern im Vergleich zu gesunden Freiwilligen.
4. Es sollte die Fähigkeit des mutierten Allels untersucht werden, die Transkriptionsaktivierung in einem manipulierten Hefetestsystem zu induzieren. Wir werden einen Hefestamm verwenden, der so konstruiert ist, dass er menschliches AHR und einen AHR-Kerntranslokator zusammen mit einem Reportergen enthält, um zu untersuchen, ob die Mutation die Transkriptionsaktivierung beeinträchtigt.