Dirigirse al TFPI con concizumab para mejorar la hemostasia en pacientes con trombastenia de Glanzmann: un estudio in vitro (GLAT)

TTAS (mediciones únicas)

Formación de coágulos en sangre total bajo flujo (2000 s-1) en una cámara de flujo de microfluidos recubierta con factor tisular y colágeno (T-TAS con chip AR)

1. 500 µL de sangre entera por cada punto;
2. 7 puntos por cada condición;
3. Se necesitarán alrededor de 4 ml de sangre total por cada paciente o sujeto sano;
4. Se informarán los valores de área bajo la curva (unidad arbitraria), tiempo de inicio de oclusión (min) y tiempo de oclusión (min).

ROTEM (medidas individuales)

1. Se agregarán tazas ROTEM

   • 20 µL de reactivo de calcio (STARTEM)
   • Se agregaron 20 µL de reactivo r-ExTEM prediluido 2940 veces (dilución de 50 000 veces en relación con 340 µL en la copa)
   • 300 µl de PRP enriquecido a 250 g/l (2,5 ml de PRP/paciente)
2. Se informarán los valores de tiempo de coagulación (CT seg, tiempo de formación de coágulo (CFT) seg, formación máxima de coágulo (mm).

TGA (medidas únicas)

1. Se agregará lo siguiente al pozo:

   • 20 uL de reactivo PRP
   • 80 uL de PRP enriquecido (600 µL/paciente a 100 G/L)
   • 20 uL FluCa
2. Valores de actividad de trombina versus tiempo y los parámetros derivados incl. Se informará el tiempo de retraso (min), el tiempo hasta el pico (min), el tiempo hasta el pico (min), y la ETP (Unidad Arbitraria).

TTAS (mediciones únicas)

Formación de coágulos en sangre total bajo flujo (2000 s-1) en una cámara de flujo de microfluidos recubierta con factor tisular y colágeno (T-TAS con chip AR)

1. 500 µL de sangre entera por cada punto;
2. 7 puntos por cada condición;
3. Se necesitarán alrededor de 4 ml de sangre total por cada paciente o sujeto sano;
4. Se informarán los valores de área bajo la curva (unidad arbitraria), tiempo de inicio de oclusión (min) y tiempo de oclusión (min).

ROTEM (medidas individuales)

1. Se agregarán tazas ROTEM

   • 20 µL de reactivo de calcio (STARTEM)
   • Se agregaron 20 µL de reactivo r-ExTEM prediluido 2940 veces (dilución de 50 000 veces en relación con 340 µL en la copa)
   • 300 µl de PRP enriquecido a 250 g/l (2,5 ml de PRP/paciente)
2. Se informarán los valores de tiempo de coagulación (CT seg, tiempo de formación de coágulo (CFT) seg, formación máxima de coágulo (mm).

TGA (medidas únicas)

1. Se agregará lo siguiente al pozo:

   • 20 uL de reactivo PRP
   • 80 uL de PRP enriquecido (600 µL/paciente a 100 G/L)
   • 20 uL FluCa
2. Valores de actividad de trombina versus tiempo y los parámetros derivados incl. Se informará el tiempo de retraso (min), el tiempo hasta el pico (min), el tiempo hasta el pico (min), y la ETP (Unidad Arbitraria).

Las muestras se analizarán mediante medición de la capacidad hemostática in vitro:

• Formación de coágulos en sangre total bajo flujo (2000 s-1) en una cámara de flujo de microfluidos recubierta con factor tisular y colágeno. Se informarán los valores de área bajo la curva (unidad arbitraria), tiempo de inicio de oclusión (min) y tiempo de oclusión (min).
• Cambios viscoelásticos de PRP bajo la formación de coágulos medidos por tromboelastometría. Se informarán los valores de tiempo de coagulación (segundos), tiempo de formación de coágulos (segundos) y formación máxima de coágulos (mm).
• Ensayo de generación de trombina en PRP utilizando factor tisular desencadenante. Valores de actividad de trombina versus tiempo y los parámetros derivados incl. Se informará el tiempo de retraso (min.), el tiempo hasta el pico (min), el tiempo hasta el pico (min), y la ETP (Unidad Arbitraria)
• Capacidad fibrinolítica global (Lysis Timer en min) en sangre entera utilizando reactivos para la activación in vitro del coágulo y su lisis