Geneettinen alttius - krooninen munuaistoksisuus CI-maksansiirron saajilta - mahdollinen korrelaatio - virtsan biomarkkerit

Opintojen suunnittelu:

Tämä tutkimus on poikkileikkaustutkimus maksansiirron saajista, joille on tehty maksansiirto ja joita on seurattu vähintään 6 kuukautta. Tämä tutkimus suoritetaan Northwestern Memorial Hospitalissa, Northwestern Medical Faculty Foundationissa ja Northwestern Universityssä.

Potilaat, joille on tehty maksansiirto ja joita on seurattu vähintään 6 kuukautta ja jotka saavat ylläpitohoitoa immunosuppressioon (joka koostuu kalsineuriinin estäjistä (CI), syklosporiinista (CsA) tai takrolimuusista (Tac) koko elinsiirron jälkeisen seurantajakson ajan otetaan mukaan analyysiin.

Jokaisesta potilaasta kerätään seuraavat tiedot:

• Elinsiirtopäivä, ikä, sukupuoli, rotu, maksan vajaatoiminnan syyt, aiempi sairaushistoria, mukaan lukien verenpainetauti, diabetes mellitus, leikkauksen jälkeiset komplikaatiot, postoperatiiviset infektiot, akuuttien maksan hylkimisjaksojen lukumäärä, kuolema, CsA- ja Tac-tasot eri aikapisteinä siirron jälkeisinä ja sCr-tasoina ennen maksansiirtoa, 1, 6, 12, 24 kuukauden kohdalla ja vuosittain siirron jälkeen.
• GFR (Glomerulaarinen suodatusnopeus) MDRD-yhtälöllä ennen maksansiirtoa, 1, 6, 12, 24 kuukauden kohdalla ja vuosittain siirron jälkeen.
• Yritetään sulkea pois kaikki potilaat, joilla on aiemmin ollut CRF ennen maksansiirtoa, vain potilaat, joiden sCr < 1,0 mg/dl ennen maksansiirtoa sisällytetään analyysiimme.

Genotyypitys:

• DNA eristetään maksansiirron saajilta käyttämällä veren buffy coatia.
• ACE-genotyyppien määritys suoritetaan käyttämällä polymeraasiketjureaktiosekvenssispesifisiä alukkeita (PCR-SSP) ja polymeraasiketjureaktion restriktiofragmentin pituuspolymorfiaa (PCR-RFLP).
• MDRD-yhtälön GRF-laskelman perusteella maksansiirtopotilaat luokitellaan kolmeen ryhmään kroonisen munuaissairauden NKF-vaiheen perusteella:

Ryhmä I -> normaali GFR (>90 ml/min/1,73 m2). Vaihe I CKD Ryhmä II->GFR välillä 30-59 ml/min/1,73 m2. Vaihe III CKD Ryhmä III->GFR välillä 15-29 ml/min/1,72 m2. Vaihe IV CKD

• Virtsa (80cc) kerätään kaikilta kolmen ryhmän potilailta ja analysoidaan interstitiaalisen fibroosin ja proksimaalisen tubulusvaurion biomarkkerien varalta. Erityisiä testattavia biomarkkereita ovat: virtsan TGF-beeta1, munuaisvauriomolekyyli-1 ja angiotensinogeeni. Virtsan biomarkkerit normalisoidaan kreatiniiniksi ja analysoidaan käyttämällä ELISA-määritystä.
• Veri (20cc) otetaan yhdellä käynnillä.
• Kaikilta koehenkilöiltä pyydetään ylimääräinen verenotto (18cc). Tätä verta käytetään tutkittaessa elinsiirtojen sietokykyä henkilöillä, jotka käyttävät parhaillaan immunosuppressiivisia lääkkeitä.

Tilastosuunnitelma - Suoritettavat tilastolliset testit:

Kun maksansiirtopotilaiden genotyyppi on määritetty ja virtsanäytteet on kerätty, verrataan CKD:n kehittymistä maksansiirron jälkeen assosiaatioiden suhteen virtsan biomarkkereihin ja ACE-geenin polymorfismiin. Kahta näytteen t-testiä käytetään vertaamaan jatkuvien muuttujien eroja maksapotilaiden välillä, joilla on eriasteinen CKD; chi-neliötestejä käytetään diskreettien muuttujien erojen vertailuun. Monimuuttujalogistinen regressioanalyysi suoritetaan myös sellaisten kliinisen muuttujan ja geenipolymorfismien yhdistelmän tunnistamiseksi, jotka liittyvät merkittävästi maksansiirron jälkeisen munuaisten vajaatoiminnan kehittymiseen.

Tämän tutkimuksen avulla voimme oppia ja arvioida mahdollista geneettistä taipumusta munuaisten vajaatoiminnan kehittymiselle CI-altistuksen jälkeen. Jos hypoteesimme pitää paikkansa, RAS-genotyyppien komponenttien testaus voi auttaa tunnistamaan potilaita, joilla on riski saada CI-nefrotoksisuus, ja auttaa esivalintaan maksansiirtoehdokkaita, joilla CI:n käyttöä primaarisena immunosuppressiona tulisi välttää.

Lisäksi tästä tutkimuksesta saadut tiedot voivat toimia vahvana perustana tulevalle NIH:n perustamalle hankkeelle, jossa tarkastellaan reniini-angiotensiinijärjestelmää estävien aineiden roolia CI:n aiheuttaman kroonisen nefrotoksisuuden ehkäisyssä.