Predisposizione genetica-Nefrotossicità cronica da CI-Destinatari di trapianto di fegato-Potenziali correlazioni-Biomarcatori urinari

Disegno dello studio:

Questo studio sarà un'indagine trasversale sui riceventi di trapianto di fegato che hanno ricevuto un trapianto di fegato e hanno almeno 6 mesi di follow-up. Questo studio sarà condotto presso il Northwestern Memorial Hospital, la Northwestern Medical Faculty Foundation e la Northwestern University.

Pazienti sottoposti a trapianto di fegato e con almeno 6 mesi di follow-up che ricevono un'immunosoppressione di mantenimento (che consiste in inibitori della calcineurina (CI), ciclosporina (CsA) o tacrolimus (Tac)) durante l'intero periodo di follow-up post-trapianto saranno inclusi nell'analisi.

Per ogni paziente verranno raccolte le seguenti informazioni:

• Data del trapianto, età, sesso, razza, cause di insufficienza epatica, anamnesi pregressa inclusa incidenza di ipertensione, diabete mellito, complicanze postoperatorie, infezioni postoperatorie, numero di episodi di rigetto acuto del fegato, decesso, livelli minimi di CsA e Tac in momenti diversi post-trapianto e livelli di sCr prima del trapianto di fegato, a 1, 6, 12, 24 mesi e annualmente dopo il trapianto.
• GFR (velocità di filtrazione glomerulare) con equazione MDRD prima del trapianto di fegato, a 1, 6, 12, 24 mesi e annualmente dopo il trapianto.
• Nel tentativo di escludere tutti i pazienti con IRC preesistente prima del trapianto di fegato, solo i pazienti con sCr<1,0 mg/dL prima del trapianto di fegato saranno inclusi nella nostra analisi.

Genotipizzazione:

• Il DNA verrà estratto utilizzando il buffy coat del sangue dai riceventi di trapianto di fegato.
• La determinazione dei genotipi di ACE sarà eseguita utilizzando primer specifici della sequenza della reazione a catena della polimerasi (PCR-SSP) e polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione della reazione a catena della polimerasi (PCR-RFLP).
• Sulla base del calcolo del GRF mediante l'equazione MDRD, i pazienti sottoposti a trapianto di fegato saranno classificati in tre gruppi in base alla stadiazione NKF della malattia renale cronica:

Gruppo I->VFG normale (>90 ml/min/1,73 m2). Fase I CKD Gruppo II-> GFR tra 30-59 ml/min/1,73 m2. Fase III CKD Gruppo III-> GFR tra 15-29 ml/min/1,72 m2. IV stadio della malattia renale cronica

• L'urina (80 cc) verrà raccolta da tutti i pazienti nei 3 gruppi e analizzata per biomarcatori di fibrosi interstiziale e lesioni del tubulo prossimale. I biomarcatori specifici che saranno testati sono: TGF-beta1 urinario, molecola di danno renale-1 e angiotensinogeno. I biomarcatori urinari saranno normalizzati alla creatinina e analizzati utilizzando un saggio ELISA.
• Il sangue (20 cc) verrà prelevato in una visita.
• A tutti i soggetti sarà richiesto un ulteriore prelievo di sangue (18cc). Questo sangue verrà utilizzato per studiare la tolleranza al trapianto di organi in soggetti che attualmente stanno utilizzando farmaci immunosoppressori.

Piano Statistico-Test statistici da eseguire:

Una volta che i pazienti sottoposti a trapianto di fegato sono stati genotipizzati e raccolti campioni di urina, confronteremo lo sviluppo di CKD post trapianto di fegato per associazioni con biomarcatori urinari e polimorfismi del gene ACE. Verranno utilizzati due test t campione per confrontare le differenze nelle variabili continue tra pazienti epatici con diverso grado di CKD; test del chi quadrato saranno utilizzati per confrontare le differenze nelle variabili discrete. Verrà inoltre eseguita un'analisi di regressione logistica multivariata per identificare la combinazione di variabile clinica e polimorfismi genici che sono significativamente associati allo sviluppo della disfunzione renale post trapianto di fegato.

Questo studio ci consentirà di conoscere e valutare la potenziale predisposizione genetica per lo sviluppo di disfunzione renale dopo l'esposizione a CI. Se la nostra ipotesi è corretta, il test del componente dei genotipi RAS può aiutare a identificare i pazienti a rischio di nefrotossicità CI e aiutare nella preselezione dei candidati al trapianto di fegato in cui l'uso di CI come immunosoppressione primaria dovrebbe essere evitato.

Inoltre, i dati generati da questo studio potrebbero servire come solida base per un progetto prospettico fondato da NIH per esaminare il ruolo degli agenti che bloccano il sistema renina-angiotensina per la prevenzione della nefrotossicità cronica indotta da CI.