Predisposición genética-Nefrotoxicidad crónica de CI-Receptores de trasplante de hígado-Correlación potencial-Biomarcadores urinarios

Diseño del estudio:

Este estudio será una investigación transversal de los receptores de trasplante de hígado que recibieron un trasplante de hígado y tienen al menos 6 meses de seguimiento. Este estudio se llevará a cabo en el Northwestern Memorial Hospital, la Fundación de la Facultad de Medicina de Northwestern y la Universidad de Northwestern.

Pacientes que se sometieron a un trasplante de hígado y tienen al menos 6 meses de seguimiento recibiendo una inmunosupresión de mantenimiento (que consiste en inhibidores de la calcineurina (IC), ciclosporina (CsA) o tacrolimus (Tac)) durante todo el período de seguimiento posterior al trasplante se incluirán en el análisis.

Para cada paciente, se recopilará la siguiente información:

• Fecha del trasplante, edad, sexo, raza, causas de insuficiencia hepática, antecedentes médicos, incluida la incidencia de hipertensión, diabetes mellitus, complicaciones posoperatorias, infecciones posoperatorias, número de episodios de rechazo hepático agudo, muerte, niveles mínimos de CsA y Tac en diferentes puntos de tiempo después del trasplante y niveles de sCr antes del trasplante de hígado, a 1, 6, 12, 24 meses y después del trasplante anual.
• FG (tasa de filtración glomerular) con ecuación MDRD antes del trasplante de hígado, a 1, 6, 12, 24 meses y después del trasplante anual.
• En el intento de descartar a todos los pacientes con IRC preexistente antes del trasplante hepático, solo los pacientes con sCr<1,0 mg/dL antes del trasplante de hígado se incluirán en nuestro análisis.

Genotipado:

• El ADN se extraerá utilizando una capa leucocitaria de sangre de los receptores de trasplantes de hígado.
• La determinación de los genotipos de ACE se realizará mediante el uso de cebadores específicos de secuencia de reacción en cadena de polimerasa (PCR-SSP) y polimorfismo de longitud de fragmento de restricción de reacción en cadena de polimerasa (PCR-RFLP).
• Según el cálculo de GRF mediante la ecuación MDRD, los pacientes con trasplante de hígado se clasificarán en tres grupos según la estadificación NKF de la enfermedad renal crónica:

Grupo I->FG normal (>90ml/min/1,73m2). Estadio I ERC Grupo II->FG entre 30-59ml/min/1,73m2. ERC estadio III Grupo III->TFG entre 15-29ml/min/1,72m2. ERC en estadio IV

• Se recolectará orina (80 cc) de todos los pacientes en los 3 grupos y se analizará en busca de biomarcadores de fibrosis intersticial y lesión del túbulo proximal. Los biomarcadores específicos que se probarán son: TGF-beta1 urinario, molécula de daño renal-1 y angiotensinógeno. Los biomarcadores urinarios se normalizarán a creatinina y se analizarán mediante un ensayo ELISA.
• Se tomará sangre (20 cc) en una visita.
• Se solicitará una extracción de sangre adicional (18 cc) de todos los sujetos. Esta sangre se usará para estudiar la tolerancia al trasplante de órganos en sujetos que actualmente están usando medicamentos inmunosupresores.

Plan Estadístico-Pruebas estadísticas a realizar:

Una vez que se haya realizado el genotipo de los pacientes con trasplante de hígado y se hayan recolectado muestras de orina, compararemos el desarrollo de la ERC posterior al trasplante de hígado en busca de asociaciones con biomarcadores urinarios y polimorfismos del gen ACE. Se utilizarán pruebas t de dos muestras para comparar diferencias en variables continuas entre pacientes hepáticos con diferentes grados de ERC; Se utilizarán pruebas de chi cuadrado para comparar diferencias en variables discretas. También se realizará un análisis de regresión logística multivariable para identificar la combinación de variables clínicas y polimorfismos genéticos que están significativamente asociados con el desarrollo de disfunción renal posterior al trasplante de hígado.

Este estudio nos permitirá conocer y evaluar la predisposición genética potencial para el desarrollo de disfunción renal después de la exposición a IC. Si nuestra hipótesis es correcta, la prueba del componente de los genotipos RAS puede ayudar a identificar pacientes con riesgo de nefrotoxicidad por IC y ayudar en la preselección de candidatos a trasplante hepático en los que se debe evitar el uso de IC como inmunosupresión primaria.

Además, los datos generados a partir de este estudio podrían servir como una base sólida para un proyecto prospectivo fundado por NIH para analizar el papel de los agentes que bloquean el sistema renina-angiotensina para la prevención de la nefrotoxicidad crónica inducida por IC.