Äidin hapen käyttö synnytyksen aikana ja napanuoraveren superoksididismutaasi

Suoritimme mahdollisen satunnaistetun kontrolloidun kliinisen kohortin synnyttäneille naisille, jotka otettiin George Washingtonin yliopistollisen sairaalan synnytyskeskukseen. Tämän tutkimuksen on hyväksynyt George Washingtonin yliopiston Institutional Review Board, ja kaikilta koehenkilöiltä hankittiin suostumus ennen ilmoittautumista. Kaikki tutkimukseen osallistuneet täyttivät seuraavat kriteerit: a) komplisoitumaton raskaus, b) raskausaika päättyneestä 37 viikosta 42 viikkoon ja c) normaali spontaani vaginaalinen synnytys (NSVD) tai elektiivinen keisarileikkaus. Raskaana olevat naiset suljettiin pois tästä tutkimuksesta, jos heillä oli jokin seuraavista: a) verenpainetauti tai eklampsia, b) raskauden aiheuttama diabetes, c) anemia, d) muut lääketieteelliset tai kirurgiset komplikaatiot nykyisen raskauden aikana, e) lapsivesikalvojen repeämä yli 18 tuntia, f) pikkulapsilla, joilla on ollut invasiivinen B-ryhmän streptokokkitauti aiemmissa raskauksissa, g) sikiöhäiriö ennen synnytystä ja h) epäillään kromosomi- ja rakenteellisia poikkeavuuksia tai synnynnäisiä infektioita. Keräsimme tietoja äidin historiasta (ikä, rotu, pariteetti ja anestesian tyyppi) ja syntymähistoriasta (antropometriset mittaukset, raskausikä, sukupuoli ja Apgar-pisteet).

Satunnaistaminen: Kun kaikki koehenkilöt oli otettu mukaan tutkimukseen, ne jaettiin satunnaisesti toiseen kahdesta ryhmästä käyttämällä suljettujen läpinäkymättömien kirjekuorien tekniikkaa. Kaikkiin koehenkilöihin kiinnitettiin nenäkanyyli, joka liitettiin metallikalvolla peitettyyn virtausmittariin, jotta johtavat synnytyslääkärit eivät tienneet, mihin ryhmään kyseinen koehenkilö kuuluu. Oxygen Groupin osallistujat saivat 100 % happea nopeudella 2 pentuetta minuutissa alkaen vähintään 30 minuuttia ennen synnytystä. Kontrolliryhmän osallistujien nenäkanyyli oli edelleen kiinni virtausmittarissa, joka oli sammutettu. Nenäkanyyli irrotettiin osallistujista synnytyksen jälkeen.

Seurantamenettely: Raskaana olevia naisia ​​seurattiin jatkuvasti sykkeen, hengitystiheyden ja happisaturaation suhteen. Jos happisaturaatio laski < 93 % vähintään 60 sekunniksi ja/tai kun synnytyslääkäri katsoi sen tarpeelliseksi milloin tahansa, terapeuttista happea annettiin ja osallistuja suljettiin pois tutkimuksesta.

Laboratoriotutkimus: Saimme kolme näytettä kolmen ml:n kokoverta kustakin äiti-vauva-parista molemmissa ryhmissä. Ensimmäinen verinäyte otettiin osallistujien ääreislaskimosta ilmoittautumishetkellä ennen satunnaistamista (perustila). Toinen verinäyte otettiin napanuoran istukan puolelta synnytyksen jälkeen. Kolmas näyte otettiin osallistujien ääreislaskimosta 4 tunnin sisällä synnytyksestä.

Mittasimme verikaasut kustakin näytteestä sängyn vieressä käyttämällä iSTAT-analysaattoria (Abbott, IL). Loput näytteestä käytettiin SOD-määrityksiin. Se kerättiin EDTA:ta sisältävään jääputkeen ja sentrifugoitiin 4 ºC:ssa. Plasma heitettiin pois ja erytrosyyttisuspensio pestiin normaalilla suolaliuoksella ja sentrifugoitiin jälleen kahdesti. Pestyjä erytrosyyttisuspensioita säilytettiin -70 ºC:ssa määritykseen asti.

SOD-konsentraatio mitattiin epäsuoralla kolorimetrisellä menetelmällä käyttämällä erittäin vesiliukoista tetratsoliumsuolaa WST-1, joka tuottaa vesiliukoisen formatsaaniväriaineen pelkistämällä superoksidianionilla. Cayman Chemical SOD -määrityssarjaa käytettiin SOD-aktiivisuuden mittaamiseen erytrosyyttilysaatissa. SOD-aktiivisuus arvioitiin mittaamalla ksantiinin hapettumisen ja hypoksantiinin synnyttämien superoksidiradikaalien dismutaatio sopivassa 96-kuoppaisessa muodossa. Tämä tekniikka sisälsi laatuohjatun SOD-standardin. Standardikäyrä, joka luotiin käyttämällä tätä entsyymiä, tarjoaa keinon kvantifioida tarkasti kaikkien kolmen SOD-tyypin (Cu/Zn-, Mn- ja Fe-SOD) aktiivisuus. SOD-pitoisuus ilmaistuna IU:na hemoglobiinipitoisuuden grammaa kohti. Tulokset SOD-pitoisuudesta, pH:sta, pCO2:sta, pO2:sta, emäsvajeesta, Ht- ja Na-pitoisuudesta kirjattiin.