Zuurstofgebruik van de moeder tijdens de bevalling en superoxidedismutase uit navelstrengbloed

We hebben een prospectieve, gerandomiseerde, gecontroleerde klinische studie uitgevoerd bij een cohort van bevallende vrouwen die waren opgenomen in het bevallingscentrum van het George Washington University Hospital. Deze studie is goedgekeurd door de Institutional Review Board van de George Washington University en toestemming is verkregen van alle proefpersonen vóór inschrijving. Alle ingeschreven proefpersonen voldeden aan de volgende criteria: a) ongecompliceerde zwangerschap, b) voldragen zwangerschapsduur van voltooide 37 weken tot 42 weken, en c) normale spontane vaginale bevalling (NSVD) of electieve keizersnede. Zwangere vrouwen werden uitgesloten van dit onderzoek als ze een van de volgende symptomen hadden: a) hypertensie of eclampsie, b) door zwangerschap veroorzaakte diabetes, c) bloedarmoede, d) andere medische of chirurgische complicaties tijdens de huidige zwangerschap, e) ruptuur van het vruchtwater. gedurende meer dan 18 uur, f) geschiedenis van baby's met invasieve groep B-streptokokkenziekte tijdens eerdere zwangerschappen, g) foetale nood vóór de bevalling en h) vermoedelijke chromosomale en structurele anomalieën of aangeboren infecties. We verzamelden gegevens over de geschiedenis van de moeder (leeftijd, ras, pariteit en type anesthesie) en geboortegeschiedenis (antropometrische metingen, zwangerschapsduur, geslacht en Apgar-scores).

Randomisatie: Eenmaal ingeschreven in het onderzoek, werden alle proefpersonen willekeurig toegewezen aan een van de twee groepen met behulp van de techniek van verzegelde, ondoorzichtige enveloppen. Aan alle proefpersonen was een neuscanule bevestigd en deze was verbonden met een flowmeter bedekt met een metalen folie, zodat de leidende verloskundigen niet wisten tot welke groep de betreffende proefpersoon behoorde. De deelnemers aan de Oxygen Group kregen vanaf minimaal 30 minuten voor de bevalling 100% zuurstof met 2 liter/minuut. De deelnemers aan de controlegroep hadden hun neuscanule nog steeds vastgemaakt aan een flowmeter die was uitgeschakeld. De neuscanule was na de bevalling losgekoppeld van de deelnemers.

Bewakingsprocedure: Zwangere vrouwen werden continu gecontroleerd op hartslag, ademhalingsfrequentie en zuurstofverzadiging. Als de zuurstofverzadiging gedurende ten minste 60 seconden < 93% daalde en/of wanneer de verloskundige dit op enig moment nodig achtte, werd therapeutische zuurstof toegediend en werd de deelnemer uitgesloten van het onderzoek.

Laboratoriumonderzoek: We verkregen drie monsters van drie ml volbloed van elk moeder-kind-paar in beide groepen. Het eerste bloedmonster werd verkregen uit de perifere ader van de deelnemers op het moment van inschrijving vóór randomisatie (basislijn). Het tweede bloedmonster werd na de bevalling afgenomen van de placentazijde van de navelstreng. Het derde monster werd binnen 4 uur na levering verkregen uit de perifere ader van de deelnemer.

We maten bloedgassen in elk monster aan het bed met behulp van een iSTAT-analysator (Abbott, IL). De rest van het monster werd gebruikt voor SOD-assays. Het werd verzameld in een ijsbuis met EDTA en gecentrifugeerd bij 4 °C. Plasma werd weggegooid en de erytrocytensuspensie werd gewassen met normale zoutoplossing en opnieuw tweemaal gecentrifugeerd. Gewassen erytrocytensuspensies werden bewaard bij -70°C tot het tijdstip van de analyse.

De SOD-concentratie werd gemeten met een indirecte colorimetrische methode met behulp van het sterk in water oplosbare tetrazoliumzout WST-1, dat na reductie met een superoxide-anion een in water oplosbare formazan-kleurstof produceert. De Cayman Chemical SOD-testkit werd gebruikt voor het meten van SOD-activiteit in erytrocytenlysaat. SOD-activiteit werd beoordeeld door de dismutatie van superoxideradicalen te meten die werden gegenereerd door xanthine-oxidatie en hypoxanthine in een handig formaat met 96 putjes. Deze techniek omvatte een op kwaliteit gecontroleerde SOD-standaard. De standaardcurve, die met dit enzym is gegenereerd, biedt een manier om de activiteit van alle drie soorten SOD (Cu/Zn-, Mn- en Fe-SOD) nauwkeurig te kwantificeren. SOD-concentratie uitgedrukt in IU per gram hemoglobinegehalte. Resultaten van SOD-concentratie, pH, pCO2, pO2, basedeficit, Ht- en Na-concentratie werden geregistreerd.