Uso materno di ossigeno durante il parto e superossido dismutasi del sangue cordonale

Abbiamo condotto uno studio clinico prospettico randomizzato controllato su una coorte di partorienti ricoverate al centro per il parto presso il George Washington University Hospital. Questo studio è stato approvato dall'Institutional Review Board della George Washington University e i consensi sono stati ottenuti da tutti i soggetti prima dell'iscrizione. Tutti i soggetti arruolati soddisfacevano i seguenti criteri: a) gravidanza non complicata, b) età gestazionale a termine da 37 settimane a 42 settimane completate e c) parto vaginale spontaneo normale (NSVD) o taglio cesareo elettivo. Le donne in gravidanza sono state escluse da questo studio se presentavano una delle seguenti condizioni: a) ipertensione o eclampsia, b) diabete indotto dalla gravidanza, c) anemia, d) altre complicanze mediche o chirurgiche durante la gravidanza in corso, e) rottura delle membrane amniotiche per più di 18 ore, f) anamnesi di neonati con malattia invasiva da streptococco di gruppo B in precedenti gravidanze, g) sofferenza fetale prima del parto e h) sospette anomalie cromosomiche e strutturali o infezioni congenite. Abbiamo raccolto dati sulla storia materna (età, razza, parità e tipo di anestesia) e sulla storia della nascita (misurazioni antropometriche, età gestazionale, sesso e punteggi Apgar).

Randomizzazione: una volta arruolati nello studio, tutti i soggetti sono stati assegnati in modo casuale a uno dei due gruppi utilizzando la tecnica delle buste opache sigillate. Una cannula nasale è stata attaccata a tutti i soggetti ed è stata collegata a un flussometro coperto da un foglio di metallo in modo che gli ostetrici responsabili non sapessero a quale gruppo appartenesse quel particolare soggetto. I partecipanti al gruppo dell'ossigeno hanno ricevuto il 100% di ossigeno a 2 cucciolate/minuto a partire da almeno 30 minuti prima del parto. I partecipanti al gruppo di controllo avevano la cannula nasale ancora attaccata a un flussometro spento. La cannula nasale è stata scollegata dai partecipanti dopo il parto.

Procedura di monitoraggio: le donne in gravidanza sono state monitorate continuamente per la frequenza cardiaca, la frequenza respiratoria e la saturazione di ossigeno. Se la saturazione di ossigeno diminuiva < 93% per almeno 60 secondi e/o quando ritenuto necessario dall'ostetrico in qualsiasi momento, veniva somministrato ossigeno terapeutico e la partecipante veniva esclusa dallo studio.

Indagine di laboratorio: Abbiamo ottenuto tre campioni di tre ml di sangue intero da ciascuna coppia madre-bambino in entrambi i gruppi. Il primo campione di sangue è stato prelevato dalla vena periferica dei partecipanti al momento dell'arruolamento prima della randomizzazione (Baseline). Il secondo campione di sangue è stato prelevato dal lato placentare del cordone ombelicale dopo il parto. Il terzo campione è stato prelevato dalla vena periferica dei partecipanti entro 4 ore dal parto.

Abbiamo misurato i gas del sangue in ciascun campione al capezzale utilizzando un analizzatore iSTAT (Abbott, IL). Il resto del campione è stato utilizzato per i saggi SOD. È stato raccolto in una provetta ghiacciata contenente EDTA e centrifugato a 4 ºC. Il plasma è stato scartato e la sospensione di eritrociti è stata lavata con soluzione salina normale e centrifugata ancora due volte. Le sospensioni di eritrociti lavati sono state conservate a -70 ºC fino al momento dell'analisi.

La concentrazione di SOD è stata misurata con un metodo colorimetrico indiretto utilizzando il sale di tetrazolio altamente solubile in acqua WST-1, che produce un colorante formazano solubile in acqua dopo la riduzione con un anione superossido. Il kit di analisi SOD Cayman Chemical è stato utilizzato per la misurazione dell'attività SOD nel lisato di eritrociti. L'attività SOD è stata valutata misurando la dismutazione dei radicali superossido generati da xantina ossidata e ipoxantina in un comodo formato a 96 pozzetti. Questa tecnica includeva uno standard SOD di qualità controllata. La curva standard, che è stata generata utilizzando questo enzima, fornisce un mezzo per quantificare accuratamente l'attività di tutti e tre i tipi di SOD (Cu/Zn-, Mn- e Fe-SOD). Concentrazione di SOD espressa in UI per grammo di contenuto di emoglobina. Sono stati registrati i risultati della concentrazione di SOD, pH, pCO2, pO2, deficit di basi, concentrazione di Ht e Na.