Zużycie tlenu przez matkę podczas porodu i dysmutaza nadtlenkowa krwi pępowinowej

Przeprowadziliśmy prospektywne, randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne na kohorcie rodzących kobiet, które zostały przyjęte do ośrodka porodowego w George Washington University Hospital. Badanie to zostało zatwierdzone przez Institutional Review Board of the George Washington University i uzyskano zgody wszystkich podmiotów przed rejestracją. Wszystkie włączone pacjentki spełniały następujące kryteria: a) niepowikłana ciąża, b) donoszony wiek ciążowy od ukończonych 37 tygodni do 42 tygodni oraz c) prawidłowy spontaniczny poród siłami natury (NSVD) lub elektywne cięcie cesarskie. Kobiety w ciąży zostały wykluczone z badania, jeśli miały którekolwiek z poniższych: a) nadciśnienie tętnicze lub rzucawka b) cukrzyca indukowana ciążą c) niedokrwistość d) inne powikłania medyczne lub chirurgiczne podczas obecnej ciąży e) pęknięcie błon owodniowych dłużej niż 18 godzin, f) historia noworodków z inwazyjną chorobą paciorkowcową grupy B w poprzednich ciążach, g) stan zagrożenia płodu przed porodem oraz h) podejrzenie anomalii chromosomowych i strukturalnych lub wrodzonych infekcji. Zebraliśmy dane dotyczące historii matki (wiek, rasa, liczba porodów i rodzaj znieczulenia) oraz historii porodu (pomiary antropometryczne, wiek ciążowy, płeć i wyniki w skali Apgar).

Randomizacja: Po włączeniu do badania wszyscy uczestnicy zostali losowo przydzieleni do jednej z dwóch grup przy użyciu techniki zapieczętowanych nieprzezroczystych kopert. Wszystkim badanym zamocowano kaniulę do nosa i połączono z przepływomierzem zakrytym metalową folią, tak aby prowadzący położnicy nie byli świadomi, do której grupy należy dana pacjentka. Uczestnicy Grupy Tlenowej otrzymywali 100% tlenu w ilości 2 litrów na minutę, zaczynając co najmniej 30 minut przed porodem. Uczestnicy grupy kontrolnej nadal mieli kaniulę nosową podłączoną do wyłączonego przepływomierza. Kaniula nosowa została odłączona od uczestniczek po porodzie.

Procedura monitorowania: Kobiety w ciąży były stale monitorowane pod kątem częstości akcji serca, częstości oddechów i nasycenia tlenem. Jeśli wysycenie tlenem zmniejszyło się < 93% przez co najmniej 60 sekund i/lub gdy położnik uzna to za konieczne w dowolnym momencie, podawany był tlen terapeutyczny i uczestniczka była wykluczana z badania.

Badanie laboratoryjne: Uzyskaliśmy trzy próbki po trzy ml pełnej krwi od każdej pary matka-niemowlę w obu grupach. Pierwszą próbkę krwi pobrano z żyły obwodowej uczestników w momencie rejestracji przed randomizacją (linia podstawowa). Drugą próbkę krwi pobrano ze strony łożyskowej pępowiny po porodzie. Trzecią próbkę pobrano z żyły obwodowej uczestniczek w ciągu 4 godzin po porodzie.

Zmierzyliśmy gazometrię w każdej próbce przy łóżku za pomocą analizatora iSTAT (Abbott, IL). Resztę próbki wykorzystano do testów SOD. Zebrano go do lodowatej probówki zawierającej EDTA i odwirowano w temperaturze 4°C. Osocze usunięto, a zawiesinę erytrocytów przemyto normalnym roztworem soli i ponownie odwirowano dwukrotnie. Przemyte zawiesiny erytrocytów przechowywano w temperaturze -70 ºC do czasu oznaczenia.

Stężenie SOD mierzono metodą kolorymetryczną pośrednią z użyciem dobrze rozpuszczalnej w wodzie soli tetrazoliowej WST-1, która po redukcji anionem ponadtlenkowym tworzy rozpuszczalny w wodzie barwnik formazanowy. Do pomiaru aktywności SOD w lizacie erytrocytów zastosowano zestaw Cayman Chemical SOD. Aktywność SOD oceniano przez pomiar dysmutacji rodników ponadtlenkowych generowanych przez utlenianie ksantyny i hipoksantynę w dogodnym formacie 96-studzienkowym. Technika ta obejmowała standard SOD o kontrolowanej jakości. Krzywa standardowa, która została wygenerowana przy użyciu tego enzymu, zapewnia środki do dokładnego ilościowego określenia aktywności wszystkich trzech rodzajów SOD (Cu/Zn-, Mn- i Fe-SOD). Stężenie SOD wyrażone w IU na gram zawartości hemoglobiny. Rejestrowano wyniki stężenia SOD, pH, pCO2, pO2, deficytu zasad, stężenia Ht i Na.