Использование кислорода матерью во время родов и супероксиддисмутаза пуповинной крови

Мы провели проспективное рандомизированное контролируемое клиническое исследование на когорте рожениц, поступивших в центр родовспоможения в больнице Университета Джорджа Вашингтона. Это исследование было одобрено Институциональным наблюдательным советом Университета Джорджа Вашингтона, и перед включением в него было получено согласие всех субъектов. Все включенные пациенты соответствовали следующим критериям: а) неосложненная беременность, б) срок гестации от полных 37 до 42 недель и в) нормальные самопроизвольные роды через естественные родовые пути (НСВД) или плановое кесарево сечение. Беременные женщины были исключены из этого исследования, если у них было любое из следующего: а) гипертония или эклампсия, б) диабет, вызванный беременностью, в) анемия, г) другие медицинские или хирургические осложнения во время текущей беременности, д) разрыв амниотических оболочек. более 18 часов, f) наличие в анамнезе младенцев с инвазивной стрептококковой инфекцией группы B при предыдущих беременностях, g) дистресс плода перед родами и h) подозрение на хромосомные и структурные аномалии или врожденные инфекции. Мы собрали данные об истории матери (возраст, раса, паритет и тип анестезии) и истории рождения (антропометрические измерения, гестационный возраст, пол и баллы по шкале Апгар).

Рандомизация: после включения в исследование все испытуемые были случайным образом распределены в одну из двух групп с использованием метода запечатывания непрозрачных конвертов. Ко всем испытуемым прикрепляли носовые канюли и соединяли с флоуметром, покрытым металлической фольгой, чтобы ведущие акушеры не знали, к какой группе принадлежит конкретный испытуемый. Участники Oxygen Group получали 100% кислород со скоростью 2 литра в минуту, начиная не менее чем за 30 минут до родов. У участников контрольной группы носовая канюля все еще была прикреплена к выключенному расходомеру. Назальная канюля была отключена от участников после родов.

Процедура мониторинга: у беременных женщин непрерывно контролировали частоту сердечных сокращений, частоту дыхания и насыщение кислородом. Если насыщение кислородом снижалось <93% в течение как минимум 60 секунд и/или когда акушер считал это необходимым в любое время, вводили терапевтический кислород и участника исключали из исследования.

Лабораторные исследования: Мы получили три образца цельной крови по три мл от каждой пары мать-младенец в обеих группах. Первый образец крови был получен из периферической вены участников во время регистрации до рандомизации (базовый уровень). Второй образец крови был получен из плацентарной стороны пуповины после родов. Третий образец был получен из периферической вены участников через 4 часа после родов.

Мы измеряли газы крови в каждом образце у постели больного с помощью анализатора iSTAT (Abbott, IL). Остальную часть пробы использовали для определения СОД. Его собирали в пробирку со льдом, содержащую ЭДТА, и центрифугировали при 4 ºC. Плазму удаляли, а суспензию эритроцитов промывали физиологическим раствором и снова дважды центрифугировали. Отмытые суспензии эритроцитов хранили при температуре -70 ºC до момента анализа.

Концентрацию СОД измеряли косвенным колориметрическим методом с использованием хорошо растворимой в воде соли тетразолия WST-1, которая при восстановлении супероксид-анионом дает водорастворимый формазановый краситель. Набор для анализа СОД Cayman Chemical использовали для измерения активности СОД в лизате эритроцитов. Активность SOD оценивали путем измерения дисмутации супероксидных радикалов, образованных окислением ксантина и гипоксантином, в удобном 96-луночном формате. Этот метод включал стандарт SOD с контролируемым качеством. Стандартная кривая, полученная с использованием этого фермента, позволяет точно определить активность всех трех типов СОД (Cu/Zn-, Mn- и Fe-СОД). Концентрация СОД, выраженная в МЕ на грамм содержания гемоглобина. Регистрировали результаты концентрации СОД, рН, рСО2, рО2, дефицита оснований, концентрации Ht и Na.